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人类疱疹病毒7型体外生长特点的研究被引量：5: 2000年; 研究了人类疱疹病毒 7型 (HHV 7)南京株YY5在脐血单个核细胞 (CBMCs)及SUPT1细胞株上生长特点。观察病毒感染细胞后不同时间病变效应程度 ,记数死亡细胞百分率 ,间接免疫荧光染色记数抗原表达阳性细胞数 ,并用透射电镜观察病毒感染细胞超微结构变化及病毒复制不同时期的特点。结果发现 :HHV 7在CBMCs及SUPT1上出现CPE时间迟于HHV 6,且CPE程度也低于HHV 6;HHV 7在SUPT1细胞上尽管有CPE及抗原表达 ,但很难找到成熟的病毒颗粒 ;电镜下 ,病毒主要存在于肿胀的病变细胞内 ,且病毒感染细胞常出现核染色质聚集 ,核固缩 ,及胞浆细胞器空泡化 ,细胞裂解等特点 ;成熟的HHV 7颗粒直径约 170 - 190nm ,核衣壳约 90 - 10 0nm ,核衣壳内致密核心约 4 0nm ,核衣壳与包膜之间是丰富的被膜约 30 - 35nm ,包膜上有刺突。HHV 7常发现无核心的病毒颗粒。; 彭光勇姚堃任强季晓辉乐美兆; 关键词：人类疱疹病毒病毒复制细胞病变效应

唾液中分离的人类疱疹病毒7型的电镜观察及分子生物学鉴定被引量：5: 2000年; 目的　旨在分离人类疱疹病毒 7型 (HHV 7)的南京地方株。方法　收集健康成人及肾病患儿唾液 ,经抗生素处理和离心过滤后接种于PHA预刺激的人脐带血单个核细胞 (CBMC) ,当细胞出现气球样病变效应 (CPE)时 ,透射电镜观察病毒颗粒、特异性引物扩增病毒核酸并对分离株的PCR扩增产物作序列测定。结果　从 7例唾液标本中分离出 4株病毒 ,电镜下呈典型疱疹病毒科病毒形态 ,经巢式PCR扩增都在预期的 186bp(外引物 )和 92bp(代表株 ,内引物 )处出现条带 ,代表株186bp产物序列与标准株RK和JI株基因相应区域同源性为 10 0 %。结论　分离的病毒为HHV 7。; 任强姚堃彭光勇季晓辉; 关键词：唾液电镜观察分子生物学鉴定

人类疱疹病毒6、7型体外感染淋巴细胞对四种细胞因子分泌的影响被引量：7: 2000年; 目的　研究人类疱疹病毒 6、7型 (humanherpesvirus 6and 7,HHV 6、HHV 7)体外感染对免疫功能的影响。方法　采用生物活性法或ELISA法分别检测了HHV 7Glasgow、YY5 2株病毒及HHV 6GS株感染脐血单个核细胞 (CBMCs) ,培养上清中细胞因子TNF α、IFN γ、IL 10、IL 12P70水平的动态变化。结果　 3株病毒感染CBMCs后前 2天均轻度抑制IFN γ产生 ,然后此抑制作用逐渐消失 ;3株病毒均能平稳诱导IL 12P70产生 ,但GS组诱生水平低于Glasgow及YY5组 ;3株病毒在接种后早期都能诱生IL 10 ,GS诱生IL 10水平高于Glasgow、YY5株 ;3株病毒均能较强地诱导CBMCs产生TNF α ,但到达峰值时间Glasgow、YY5迟于GS株。结论　HHV 6、HHV 7感染早期都可以通过影响细胞因子的分泌影响免疫功能 ,但HHV 6影响程度强于HHV 7。; 彭光勇姚堃任强季晓辉; 关键词：HHV-7 细胞因子淋巴细胞

抗人类疱疹病毒7型南京分离株YY5单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2003年; 目的:制备抗人类疱疹病毒7型(HHV-7)单克隆抗体,应用于临床与科研。方法:用纯化的HHV-7南京株YY5免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA法筛选。间接免疫荧光、免疫印迹试验等方法鉴定单抗。结果:获得了3株分泌抗(HHV-7)单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为6H9、6C11、4D5。单克隆抗体亚类鉴定表明:6H9为IgG1类,6C11、4D5为IgM类。用间接ELISA方法检测单抗腹水滴度分别为:1:6.40×104,1:1.28×105,1:1.00×103。免疫印迹试验结果表明:6C11能与分子质量约70 ku大小的病毒蛋白结合。结论:成功制备并鉴定3株抗HHV-7单克隆抗体,为进一步研究HHV-7的特性及为临床快速诊断提供可能。; 杨晓梅姚堃朱建中丁传林窦洁冯东举周锋仇镇宁; 关键词：单克隆抗体人类疱疹病毒7型小鼠 HHV-7 骨髓瘤细胞

人类疱疹病毒6型U94基因克隆、表达、纯化及抗体制备被引量：2: 2007年; 目的:制备人类疱疹病毒6型U94蛋白及其抗体。方法:PCR扩增U94基因,经测序后克隆到原核表达载体PGEX- 6p-1中。重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,诱导蛋白表达。应用酶切鉴定、SDS-PAGE及Western blot等方法确保基因片段的正确性及表达蛋白的特异性。表达的蛋白经亲和层析纯化,纯化的蛋白免疫动物制备抗血清。结果:成功地获得了高纯度的U94融合蛋白,纯度可达90%以上。用其制备多克隆抗体滴度可达1:100 000。结论:获得高纯度的U9d融合蛋白及其高效价的抗体。; 尹全章姚堃王芳许文嵘徐建陈云周锋冯东举; 关键词：人类疱疹病毒6型基因表达

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江苏省自然科学基金(BK97051)