浙江省自然科学基金(Y206467)
- 作品数：7 被引量：20H指数：2
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- 不同吸入麻醉药对人精子运动功能和体外获能的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨不同吸入麻醉药对人精子运动功能和体外获能的影响.方法 成年男性精液经Percoll梯度离心法处理后,沉淀精子置于人精子体外获能培养基,调节精子密度（30～50）×106/ml,随机分为5组（n=7）：对照组（C组）正常培养,2%、4%七氟醚组（SEV1、2组）和1.1%、2.2%异氟醚组（ISO1、2组）在37℃孵箱中分别暴露于2%、4%七氟醚和1.1%、2.2%异氟醚5 h,采用计算机辅助精子分析系统评价精子运动功能,记录精子运动活力[（a＋b）%]、曲线速度（VCL）、直线速度（VSL）、平均速度（VAP）和头部侧向运动平均振幅（ALH）,采用金霉素荧光染色技术评价精子体外获能情况.计算吸入麻醉药组各指标的相对抑制率.结果 与C组比较,SEV1组、SEV2组和ISO2组（a＋b）%、VCL、VSL、VAP降低,SEV2组ALH、SEV2组和ISO1、2组精子获能程度降低（P＜0.05）;与SEV1组比较,SEV2组（a＋b）%、VCL、VSL、VAP降低,ISO1组（a＋b）%、VCL、VSL、VAP的相对抑制率降低（P＜0.05）;与ISO1组比较,ISO2组（a＋b）%、VCL、VSL、VAP降低（P＜0.05）;与SEV2组比较,ISO2组（a＋b）%、VCL、VSL、VAP和ALH的相对抑制率降低（P＜0.05）.结论 七氟醚和异氟醚均可呈剂量依赖性地抑制人精子运动功能和体外获能;七氟醚抑制精子运动功能的作用较异氟醚强.
- 王兰兰郭晶晶林函黄学锋金建远王秋帆叶雪飞宋海龙连庆泉
- 关键词：麻醉药吸入精子能动性精子获能
- 麻醉浓度七氟醚对TM3小鼠睾丸间质细胞活力的影响
- 2011年
- 目的探讨麻醉浓度七氟醚对TM3小鼠睾丸间质细胞活力的影响。方法采用随机数字表法，将TM3小鼠睾丸间质细胞株随机分为3组，每组24皿：对照组（C组）、2％七氟醚组和5％七氟醚组（SEV1、2组）。将细胞放置于37℃的密闭培养箱中，通人七氟醚，维持浓度2％（SEV3组）或5％（SEU组）。c组仅给予95％空气和5％CO2的混合气体。于七氟醚孵育2、4、6h（T1-3）时采用光学双目倒置显微镜观察细胞形态，并采用CCK-8法测定细胞活力。于七氟醚孵育6h后，收集C组和SEV2组细胞，应用基因芯片筛选差异基因。结果与C组和SEV1组比较，SEV2组L时细胞活力明显降低（P〈0．05），T1、3时差异无统计学意义（P〉0．05）；SEV1组和C组各时点细胞活力比较差异无统计学意义（P〉0．05）。C组和SEV1组细胞形态未见异常，SEV2组细胞发生形态学改变。与C组比较，SEV2组差异表达的基因有45个，差异倍数最大的有：前列腺素内过氧化物酶2基因、趋化因子配体2基因和双特异性磷酸酶1基因。结论麻醉浓度七氟醚可抑制TM3小鼠睾丸间质细胞的活力，且与浓度有关，其机制可能与前列腺素内过氧化物酶2基因、趋化因子配体2基因和双特异性磷酸酶1基因表达异常有关。
- 叶雪飞郎俊慧陈蓓萍郭晶晶王兰兰王秋帆林函连庆泉
- 关键词：麻醉药莱迪希细胞麻醉
- 七氟烷和异氟烷急性暴露对SD新生大鼠海马的神经毒性作用被引量：11
- 2011年
- 目的探讨七氟烷与异氟烷急性暴露对SD仔鼠脑海马的毒性作用及其机制。方法出生7 d的雄性SD新生大鼠分别急性暴露3.6%七氟烷和2.3%异氟烷6 h。TUNEL和活化胱天蛋白酶3片段的免疫组化技术(IHC)检测神经元凋亡;透视电镜观察海马神经元形态学的改变;Western印迹法检测胱天蛋白酶3表达。结果与正常对照组相比,七氟烷和异氟烷组海马神经元凋亡显著增加(P<0.05)。TUNEL显示,与正常对照组神经元凋亡数量2±2相比,七氟烷和异氟烷组海马神经元凋亡数量显著提高,分别为13±2和22±5,且异氟烷组与七氟烷组神经元凋亡数相比较有统计学差异(P<0.05)。透视电镜见七氟烷和异氟烷组大鼠海马神经元内有残缺不全的细胞核、肿胀的线粒体和内质网。Western印迹法结果显示,胱天蛋白酶3表达显著增加(P<0.05),且异氟烷作用强于七氟烷(P<0.05)。结论七氟烷和异氟烷急性暴露可致发育中神经元的凋亡;在等效浓度下异氟烷能引起更严重的神经元损伤。
- 余梓浦王佩芳李纯林函康定鑫狄美琴连庆泉
- 关键词：七氟烷异氟烷海马神经毒性
- Pum基因在小鼠海马的转录
- 2008年
- 目的:依据Pum蛋白序列寻找和人类亲缘关系较近的动物模型,并在动物模型的脑组织上进行Pum mRNA的定性和定位。方法:查找相关动物的Pum蛋白序列,构建生物进化树,寻找合适的动物模型。RT-PCR扩增Pum片断,接入TA载体制作亚克隆,转化细菌后筛选、扩增、抽提,然后测序鉴定。体外转录Pum基因的mRNA探针,将其和脑组织冰冻切片原位杂交、显色。结果:生物进化树提示,小鼠是合适的动物模型;原位杂交结果显示,小鼠海马区存在Pum1和Pum2 mRNA的表达。结论:小鼠是研究Pum基因在海马转录的合适动物模型。
- 林函金元杨晓凯王本福苏颖连庆泉
- 关键词：小鼠海马原位杂交
- 七氟烷和异氟烷急性暴露对SD幼大鼠学习记忆及海马脑源性神经营养因子表达的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨挥发性麻醉药七氟烷和异氟烷急性暴露对SD大鼠幼年期学习记忆及海马脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响及其机制。方法 7日龄大鼠提前0.5 h ip给予荷包牡丹碱8 mg.kg-1或蝇蕈醇1 mg.kg-1,然后暴露于含3.6%七氟烷或2.3%异氟烷的空氧混合气中,连续6 h。出生后第21天时行Morris水迷宫实验记录潜伏期;取海马,免疫组化及Western印迹法检测γ氨基丁酸-A(GABA-A)受体α1亚基和BDNF表达,逆转录-PCR方法检测mRNA表达。结果 氟烷组的连续5 d总潜伏期均显著延长(P<0.05);与七氟烷和异氟烷组比,提前给予荷包牡丹碱或蝇蕈醇对潜伏期无显著改善作用。免疫组化、Western印迹法和逆转录-PCR结果显示,与正常对照组相比,七氟烷、异氟烷和提前给予荷包牡丹碱或蝇蕈醇组幼鼠海马GABA-A受体α1亚基蛋白与mRNA表达无明显差异;七氟烷和异氟烷组BDNF的蛋白和mRNA表达量显著降低,分别降低了13%,25%和23%,21%(P<0.05)。与七氟烷和异氟烷组相比,提前给予荷包牡丹碱或蝇蕈醇组BDNF的蛋白和mRNA表达量无显著差异。结论 七氟烷和异氟烷急性暴露能够影响SD大鼠幼年期学习记忆功能,可能与BDNF的表达改变有关,GABA-A受体不参与神经发育毒性的介导。
- 余梓浦游珊徐敏林函狄美琴连庆泉
- 关键词：七氟烷异氟烷脑源性神经营养因子
- 七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响被引量：2
- 2013年
- 目的评价七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响。方法取孕15d的SD大鼠，分离皮层进行神经干细胞原代培养，以（1～2）×10^6个／ml的细胞密度稳定传代到第3代后，接种至多聚赖氨酸包被的6孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组（n=24）：对照组（C组）、七氟醚组（S组）和异氟醚组（I组）。将培养板细胞置于暴露箱，s组通入4．9％七氟醚和5％CO2-95％O2的混合气体；I组通入2．8％异氟醚和5％CO2．95％O2的混合气体；C组通人5％CO2．95％02的混合气体。暴露6h后，取出培养板并于37℃细胞培养箱中继续培养2h。采用免疫细胞化学法和酶标法测定细胞增殖情况，采用实时荧光定量PCR法检测增殖相关基因：信号转导和转录激活子3（STAT3）、Sox2、Notchl和P21的mRNA表达水平。采用Westernblot法测定总STAT3蛋白和磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白的表达水平。结果与c组比较，s组和I组神经干细胞增殖率降低，p-STAT3蛋白表达下调，I组STAT3mRNA表达下调（P〈0．05），s组STAT3mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。3组间Sox2mRNA、NotchlmRNA、P21mRNA及总STAT3蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论异氟醚和七氟醚均可抑制大鼠大脑皮质神经干细胞的增殖，其机制可能为七氟醚与抑制STAT3蛋白激活有关，而异氟醚不仅抑制了STAT3蛋白的激活，而且抑制了STAT3基因的转录。
- 林函刘劲李纯王佩芳高雅静马晓晓王春满梅虹霞连庆泉
- 关键词：异氟醚干细胞细胞增殖七氟醚
- 11β-羟类同醇脱氢酶1与记忆被引量：1
- 2010年
- 海马局部长期的高糖皮质激素（GC）水平对海马神经元造成损伤并影响记忆。经循环进入海马组织的肾上腺皮质分泌的GC主要是游离的无活性GC，因而需在具有还原酶活性的11β-羟类固醇脱氢酶1（11β-HSD1）的催化下转化为活性GC才能发挥作用。11β-HSD1在海马组织高表达。11β-HSD1的还原酶活性南内质网中己糖石-6-酸脱氢酶催化生成的还原型辅酶Ⅱ维持。因此，选择性抑制海马11β-HSD1的还原酶活性可以调节海马组织活性GC的水平，保护记忆。
- 苏颖林函连庆泉
- 关键词：糖皮质激素海马记忆
