国家自然科学基金(30260035)
- 作品数:18 被引量:42H指数:5
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- 窦前期卵泡颗粒细胞端粒酶的表达及调控被引量:1
- 2008年
- 目的:观察体外培养的大鼠窦前期卵泡颗粒细胞中端粒酶表达的调控因素。方法:体外培养大鼠窦前期卵泡颗粒细胞,加入不同处理因素振荡培养,用端粒酶重复扩增酶联免疫吸附分析法(TRAP-ELISA法)分析端粒酶活性的改变。结果:在卵泡颗粒细胞中表达有端粒酶活性,且在人绒毛膜促性腺激素(hcG)、促卵泡生成素(FSH)、二丁酰环磷腺苷(dbcAMP)及维拉帕米(verapamil)作用下活性明显升高,而在反义c-myb作用下活性明显降低。同时用放射免疫法测定培养液中雌孕激素含量发现,在Verapamil及FSH作用下雌孕激素分泌量明显升高,在db-cAMP及hcG作用下分泌量无明显改变,而在反义c-myb作用下分泌量明显降低,在不同作用因素下的端粒酶活性与它相对应的E2分泌量成正相关r=0.953,P<0.01。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定,反义hTERT能明显抑制颗粒细胞的增殖。结论:窦前期卵巢的颗粒细胞中表达有端粒酶活性,强弱可进行调控。
- 张静郑月慧郑丽萍
- 关键词:端粒端粒酶颗粒细胞
- 肿瘤坏死因子-α与卵子生成被引量:3
- 2007年
- 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种多效的细胞因子,与相应受体结合后通过一系列的信号传导通路,在体内发挥着重要的调节作用,是卵巢局部微环境重要的组成成分之一。它的作用涉及卵子发生的每一个环节,如卵泡发育、排卵、卵泡闭锁等,调控着卵巢细胞的生死平衡。
- 李芳郑月慧肖秋香
- 关键词:卵泡发育排卵信号传导通路
- 受精及其调控机制研究进展
- 2004年
- 受精过程非常复杂 ,在体内受到精胺、γ 氨基丁酸、孕酮及卵透明带 (ZP)蛋白等多种生理性物质的调控 ,诸多的调控受精的机理可能与膜受体 G蛋白介导的cAMP信使系统及磷酸肌醇系统、钙离子通道蛋白及原癌基因有关。
- 吴凌峰郑月慧张静
- 关键词:受精
- 原癌基因c-erbB_2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响被引量:7
- 2005年
- 目的:探讨原癌基因c-erbB2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法:建立小鼠卵 母细胞体外培养模型,用不同浓度反义c-erbB2寡脱氧核苷酸(c-erbB2ASODN)和反义c-myb寡脱氧 核苷酸(c-myb ASODN)分别与未成熟卵母细胞共孵育,观察c-erbB2ASODN和c-myb ASODN对 卵母细胞体外成熟的影响。结果:c-erbB2ASODN和c-myb ASODN均能呈剂量依赖方式抑制24h 卵母细胞的GVBD率和PB1排出率,并显著延迟其成熟的时间,而无义tat寡脱氧核苷酸则无此 作用。结论:原癌基因c-erbB2和c-myb均在卵母细胞成熟过程中起着重要的作用。
- 郑莉萍吴磊汪小浪郑月慧
- 关键词:C-ERBB2C-MYB体外成熟
- 卵泡发育与端粒酶表达及调控
- 2005年
- 端粒酶是一种核糖核蛋白,具有合成端粒的功能。细胞的年龄和寿命与端粒酶的活性和端粒的长度密切相关。卵巢是一个以周期性的细胞增殖分化和凋亡为特征的器官,在正常的卵巢中端粒酶的表达随卵泡发育的不同阶段而变化。故卵巢端粒酶的活性是衡量卵泡功能的重要指标。端粒酶活性受雌激素和孕激素调控,并且均通过有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)路径介导。
- 张静郑月慧吴凌峰
- 关键词:端粒端粒酶卵巢
- NO调节在小鼠生发泡期卵母细胞体外成熟中的作用被引量:1
- 2015年
- 目的观察不同浓度硝普钠(SNP)、左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)对小鼠生发泡(GV)期卵母细胞体外成熟的影响。方法给小鼠腹腔注射PMSG 8IU,取其双侧卵巢,用卵母细胞体外培养法,分为L-NAME组、SNP+dbc AMP+L-NAME组、P+dbc AMP+SNP+L-NAME组,在倒置生物显微镜下观察卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率及第一极体(PB1)排出率。结果 SNP+dbc AMP组的GVBD率与PB1率分别为(52.5±0.4与32.5±0.1)显著高于dbc AMP组的(28.0±0.2与11.1±0.7)(P<0.05)。P+dbc AMP+SNP+L-NAME组的GVBD率与PB1率分别为(62.8±0.3与20±1.4)显著低于P+dbc AMP+SNP组的(90.1±1.3与66.6±0.9),GVBD率与PB1率显著性降低(P<0.05)。结论 L-NAME与二丁酰环腺苷酸(dbc AMP)抑制小鼠卵母细胞成熟时,小剂量NO呈现促进作用,这种促进作用在孕酮(P)存在时进一步加强。
- 高风兰相淑芳郑月慧肖秋香郑莉萍吴磊
- 关键词:一氧化氮卵母细胞L-NAMEDBCAMP孕酮
- c-myb对小鼠体外受精的影响及作用机制的分析被引量:3
- 2005年
- 目的 :本文采用免疫组织化学方法观察Myb转录因子家族成员c myb蛋白在小鼠精子和卵母细胞 卵丘复合物中的分布。方法 :建立小鼠体外受精模型 ,用不同浓度反义c myb寡脱氧核苷酸 (c mybASODNs)与精子、卵母 卵丘细胞复合物共孵育观察其对小鼠体外受精率的影响 ,并进一步探讨c mybASODNs对小鼠体外受精率的影响机制。结果 :在颗粒细胞胞核和精子的头部有c myb蛋白分布。c mybASODNs呈剂量依赖性抑制小鼠体外受精率 (小鼠体外受精率在空白组、低、中、高浓度c mybASODNs组、无义tatODNs组分别为 34.97%、30 .89%、2 0 .14 %、16 .6 8%、34.4 7% )。GABA、P4、Verapamil和dbcAMP与c mybASODNs共同作用时 ,GABA、P4、dbcAMP三者均逆转c mybASODNs对受精的抑制作用 ,(小鼠体外受精率在空白组、中浓度c mybASODNs组、GABA、P4、Verapamil和dbcAMP组、分别为 34.81%、2 2 .96 %、4 0 .83%、39.12 %、7.4 6 3%、4 0 .6 1% ) ,GABA、P4、和dbcAMP三者对精子中的c myb蛋白免疫组化染色阳性的细胞百分率无明显影响。Verapamil能抑制小鼠体外受精 ,并协同c mybASODNs的抑制作用 ,且使精子中的c myb蛋白免疫组化染色阳性的细胞百分率明显下降。结论 :c mybA SODNs与受精密切相关 ,Verapamila可能通过调节精子中的c
- 吴凌峰郑月慧张静
- 关键词:C-MYB反义寡脱氧核苷酸体外受精
- 内皮素-1调节小鼠生发泡期卵母细胞体外成熟作用的实验研究
- 2006年
- 目的研究内皮素-1(ET-1)对小鼠未成熟卵母细胞生发泡破裂(GVBD)、第一极体(PBⅠ)排出的影响。方法昆明系雌性小鼠生发泡(GV期)卵母细胞分为去卵丘裸卵(DO)组及卵丘卵母细胞复合体(COC)组,在体外培养条件下,观察ET-1对两组GVBD、PBⅠ形成的量效和时效关系。结果(1)DO在10-9、10-8、10-7、10-6mol/LET-1作用3、6、9、12、24h对其成熟分裂无明显影响(P>0.05);(2)COC在10-8mol/LET-1作用6h能显著抑制GVBD率(P<0.05),在10-7、10-6mol/LET-1作用6h极显著抑制GVBD率(P<0.01);在10-8mol/LET-1作用12h明显抑制PBⅠ率(P<0.05),10-7、10-6mol/LET-1作用12h极显著抑制PBⅠ率(P<0.01)。结论ET-1对COC体外成熟具有抑制作用并呈剂量依赖性,对DO体外成熟无明显影响。
- 肖秋香郑月慧高凤兰李芳吴磊郑莉萍
- 关键词:内皮素卵母细胞第一极体
- 原癌基因在介导细胞因子影响卵母细胞成熟中的作用被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨原癌基因c-erbB_2、c-myb在介导表皮生长因子、肿瘤坏死因子α、内皮素-1及一氧化氮影响卵母细胞成熟中的作用。方法:建立小鼠卵母细胞体外培养模型,观察EGF、TNFα、ET-1及NO供体小剂量硝普钠(SNP)对卵细胞成熟的影响,用RT-PCR和Western blotting方法检测在上述细胞因子作用下卵母细胞c-erbB2和c-myb表达及丝裂原蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPF)含量的变化。结果:EGF(10μg/L)能促进卵母细胞的成熟,使c-erbB_2 mRNA、c-myb mRNA表达上升,伴随MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量升高;TNFα(10μg/L)和ET-1(10^(-7)mol/ L)均使卵母细胞中c-erb_2 mRNA和c-myb mRNA表达下降,伴随MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量下降,抑制卵母细胞的成熟。小剂量SNP(10^(-5)mol/L)对卵母细胞成熟无明显影响,但能反转二丁酰环磷酸腺苷(dbcAMP)对卵母细胞成熟的抑制作用,使c-erbB_2mRNA和c-myb mRNA表达升高,MAPK磷酸化水平及cyclinB1含量升高,但仍低于对照组。结论:细胞因子对卵母细胞成熟的影响与原癌基因c-erbB_2和c-myb有关,c-erbB_2和c-myb可能是介导细胞因子和MAPK、MPF间调控卵母细胞成熟的上游激活物。
- 郑莉萍王晶磊郑月慧吴磊肖秋香李芳
- 关键词:卵母细胞成熟细胞因子
- 生长因子对卵泡发育调节作用的研究进展被引量:4
- 2005年
- 李芳郑月慧郑莉萍
- 关键词:卵泡发育