国家自然科学基金(30170426)
- 作品数：9 被引量：185H指数：6
- 相关作者：甘华田欧阳钦张蒙黄晓丽陈友琴更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院四川大学大理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省卫生厅科研基金国家教育部博士点基金更多>>
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- 连接肠道炎症和肿瘤的桥梁——磷脂酰肌醇-3激酶/AKT信号转导通路的作用被引量：6
- 2006年
- 磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）家族是一类蛋白激酶，能特异性地催化磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol，PI）环上的3位羟基磷酸化，生成相应的肌醇脂物质，后者是细胞内新型第二信使，与胞质内含血小板-白细胞激酶C底物同源（pleckstrin homology，PH）结构域的信号分子结合后对相应分子发挥活性调节作用。丝氨酸，苏氨酸蛋白激酶AKT是PI3K下游的直接靶蛋白，含有PH结构域，主要负责由PI3K始动的生物信息转导。AKT处于这一通路的中心环节，参与了细胞生长、增殖、生存、炎症、肿瘤的发生、发展等诸多重要生理病理过程。近年来，该通路在炎症和肿瘤中的作用日益受到重视，众多学者对其进行了大量研究。本文就这方面的情况作一综述。
- 黄晓丽廖再波甘华田
- 关键词：信号转导通路肠道炎症肿瘤苏氨酸蛋白激酶PH结构域桥梁
- 抗炎药物对溃疡性结肠炎患者肠黏膜组织NF-κB的活化和细胞黏附分子表达的影响被引量：16
- 2004年
- 探讨抗炎药物柳氮磺胺吡啶 (SASP)和糖皮质激素对溃疡性结肠炎 (Ulcerative colitis,UC)患者肠黏膜活检组织细胞间黏附分子 (Intercellular adhesion molecule- 1,ICAM- 1)与血管细胞黏附分子 (Vascular cell adhes-ion molecule- 1,VCAM- 1) m RNA和蛋白表达的影响 ,以及黏附分子 m RNA的表达与 NF- κB活化的关系。2 7例来自四川大学华西医院的 U C患者 (符合 1993年太原会议溃疡性结肠炎诊断标准 )被纳入本研究。其中 15例使用过药物 (SASP或 SASP+糖皮质激素 )治疗 ,12例未用过任何与 U C治疗相关的药物 ,9例同期结肠癌患者 (取其癌旁正常组织 )被作为对照。采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 ICAM- 1与 VCAM- 1m RNA的表达 ;酶联免疫吸附试验 (EL ISA)测定 ICAM- 1与 VCAM- 1蛋白水平。凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)检测 NF-κB DNA结合活性。结果显示 :与对照组相比 ,UC患者肠黏膜活检组织 ICAM- 1与 VCAM- 1m RNA和蛋白表达以及 NF-κBDNA结合活性明显升高 (P<0 .0 5 ) ;糖皮质激素和 SASP明显抑制 U C患者 NF-κB DNA结合活性 ,降低 ICAM- 1与 VCAM- 1m RNA和蛋白的表达 (P<0 .0 5 ) ;ICAM- 1和 VCAM- 1基因激活与 NF-κB DNA结合活性呈显著正相关 (ICAM- 1:r=0 .86 5 2 ,P<0 .0 5 ;VCAM-
- 陈友琴甘华田欧阳钦徐丹潘芸阿周存
- 关键词：VCAM-1NF-ΚBSASP基因激活
- 溃疡性结肠炎磷脂酰肌醇3激酶的表达及其抑制剂对肿瘤坏死因子α表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt 信号传导通路在溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用并为沃特曼宁(wortmannin)作为 UC 治疗新药物提供实验依据。方法收集 UC 患者30例,15例结肠癌旁正常组织作为对照,采用免疫组化法检测 UC 肠黏膜组织中磷酸化 Akt(p-Akt)的表达情况;体外组织培养观察 PI3 K/Akt 信号传导通路抑制剂 wortmannin 对 UC 肠黏膜活检组织肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响。结果①UC 肠黏膜组织中 p-Akt 的表达明显高于正常对照组(A 值分别为73.6±5.2、18.0±2.6,阳染面积分别为720±58、133±29,均 P<0.05)。②与未用 wortmannin处理的 UC 对照组比较,wortmannin 处理后 UC 肠黏膜组织分泌 TNF-α的水平明显较低(分别为296±39、138±11、26±5,均 P<0.05)。③用 wortmannin 处理后 UC 患者肠黏膜组织中 p-Akt 的表达低于未用 wortmannin 处理的 UC 对照组(A 值分别为:72.3±6.2、35.3±5.6、18.0±2.2,阳染面积分别为716±94、351±50、129±30,均 P<0.05)。结论①PI3K/Akt 信号转导通路参与了促炎性细胞因子 TNF-α的调控与释放,可能在 UC 的发生发展中起着重要作用。②PI3K 的抑制剂 wortmannin 能阻断 PI3K/Akt 信号转导通路,进而减少细胞因子的释放。wortmannin 有可能成为治疗 UC 的新药物。
- 黄晓丽易文全张蒙欧阳钦甘华田
- 关键词：结肠炎溃疡性肿瘤坏死因子WORTMANNIN
- 溃疡性结肠炎患者肠粘膜κ基因结合核因子的活化及抗炎药物的作用被引量：45
- 2002年
- 目的 探讨溃疡性结肠炎患者肠粘膜κ基因结合核因子 (NF κB)的活化以及柳氮磺胺吡啶 (SASP)和糖皮质激素对其的影响。方法 31例溃疡性结肠炎患者中 17例使用过药物 (SASP或SASP +糖皮质激素 )治疗 ,14例未用过任何与溃疡性结肠炎治疗相关的药物 ,11例同期结肠癌患者(取其癌旁正常组织 )作为对照。采用凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)检测NF κBDNA结合活性 ;Western蛋白印迹分析检测NF κBp6 5蛋白表达情况 ;免疫组化方法原位检测肠粘膜组织中NF κBp6 5蛋白的表达情况 ;荧光双标激光共聚焦显微镜确定表达NF κBp6 5的细胞类型。结果 溃疡性结肠炎患者肠粘膜NF κBp6 5的表达和NF κBDNA结合活性与对照组比较明显升高 (P <0 .0 5 ) ,且与炎症程度有关 ;溃疡性结肠炎患者肠粘膜巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞以及隐窝上皮细胞均有NF κBp6 5的活化 ;糖皮质激素和SASP明显抑制NF κB的活性及表达。结论 NF κB活性和表达的增加可能与溃疡性结肠炎的发生发展有关 ;糖皮质激素和SASP的抗炎作用可能是通过抑制NF κB的活性实现的。NF κB可能为溃疡性结肠炎新药的研究与开发提供一个有价值的靶标。
- 甘华田欧阳钦陈友琴夏庆杰
- 关键词：溃疡性结肠炎基因表达调控柳氮磺胺吡啶抗炎药物肠粘膜
- 核因子-κB p65反义寡核苷酸对溃疡性结肠炎肠黏膜单个核细胞细胞因子表达的影响被引量：22
- 2003年
- 探讨 NF- κB p6 5反义寡核苷酸对溃疡性结肠炎肠黏膜单个核细胞 NF- κB p6 5的表达以及对细胞因子释放的影响。3例溃疡性结肠炎患者 (未用过任何与溃疡性结肠炎治疗相关的药物 ,符合 1993年太原会议溃疡性结肠炎诊断标准 )的活检组织被用于固有层单个核细胞 (L PMC)的分离和培养 ,并用 NF- κB p6 5反义寡核苷酸 (A-SON:5 '- GGAACAGTTCGTCCATGG- 3')及错义寡核苷酸 (MSON:5 '- GGAACAGTTCGTCTATGG- 3')和地塞米松 (EDX)进行干预。采用 :1Western蛋白印迹分析检测 NF-κB p6 5蛋白表达情况 ;2逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检测 IL- 1βm RNA和 IL- 8m RNA的表达 ;3酶联免疫吸附试验 (EL ISA)测定 IL- 1β,IL- 8的分泌水平。结果显示 ,NF-κB p6 5反义寡核苷酸可明显减少 L PMC的 NF-κB p6 5表达 ,阻断 L PS刺激引起的 IL - 1βm RNA和 IL -8m RNA的表达的增强以及两种细胞因子分泌水平均的增高 ,其作用明显强于地塞米松 (P<0 .0 5 )。结论认为 :NF-κB p6 5反义寡核苷酸有可能作为治疗溃疡性结肠炎的新基因药物 。
- 甘华田欧阳钦陈友琴粱峰
- 关键词：P65基因反义寡核苷酸溃疡性结肠炎肠黏膜单个核细胞
- 核因子-κB与炎症性肠病被引量：7
- 2003年
- 甘华田欧阳钦
- 关键词：生物学功能核因子-ΚB炎症性肠病
- 核因子κB“诱饵”寡核苷酸对小鼠葡聚糖硫酸钠结肠炎的影响被引量：11
- 2006年
- 目的探讨核因子κB“诱饵”寡核苷酸(NF-κB Decoy ODN)对葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎的影响,为寻找一种治疗溃疡性结肠炎(UC)的新药提供实验依据。方法36只BALB/C小鼠按编号抽签随机分为:正常对照组;DSS+NF-κB“诱饵”ODN组;DSS+错配物ODN组;DSS+生理盐水组,每组9只。方法(1)测定各组小鼠血清中尿素氮、肌酐、随机血糖、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶浓度。(2)取小鼠结肠组织进行大体及组织形态学观察。(3)免疫组织化学染色观察NF-κB p65在结肠黏膜细胞内的表达。(4)酶联免疫吸附法(ELISA)测定结肠黏膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。(5)共聚焦显微镜观测NF-κB“诱饵”ODN在小鼠结肠黏膜内的分布。结果(1)5%DSS处理的3组小鼠的DAI评分和组织学评分及肠黏膜组织内TNF-α表达均明显高于正常对照组(均P<0·05);而NF-κB“诱饵”ODN组的上述指标均明显低于错义NF-κB“诱饵”ODN组和生理盐水组(均P<0·01)。(2)5%DSS处理的3组小鼠其肠黏膜组织NF-κB p65的表达以胞核为主,而且这3组间NF-κB p65胞核表达差异无统计学意义。相反,正常对照组小鼠NF-κB p65以胞质表达为主。(3)NF-κB诱饵ODN可有效进入小鼠结肠黏膜层和黏膜下层组织。(4)各实验组小鼠肝、肾功能及血糖比较差异无统计学意义。结论NF-κB“诱饵”ODN对小鼠DSS结肠炎有较好的保护作用。
- 吴礼国甘华田欧阳钦彭兰张蒙
- 关键词：NF-ΚB寡脱氧核糖核苷酸类
- p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对溃疡性结肠炎肠黏膜肿瘤坏死因子α表达的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜组织中磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的表达及 p38 MAPK 抑制剂 SB203580对活动性 UC 患者肠黏膜组织 TNFα表达的影响。方法 30例活动性 UC 患者被纳入本研究,以15例结肠癌患者的癌旁正常组织作为对照。免疫组化法检测 UC 患者肠黏膜活检组织中磷酸化 p38 MAPK 的表达。体外组织培养条件下观察 SB203580对UC 患者肠黏膜组织 TNFα表达的影响,ELISA 法检测培养上清液中 TNFα含量。结果(1)UC 患者肠黏膜磷酸化 p38 MAPK 的表达明显高于正常肠黏膜,A 值分别为549.22±32.54、143.52±11.89,阳染面积分别为[(1680.61±115.30)×10^(-5)、(351.68±12.73)×10^(-5)]μm^2,P 值均<0.01。(2)与未用 SB203580处理的 UC 组比较,处理后 UC 肠黏膜组织分泌 TNFα的水平明显较低,分别为(549.96±107.63、72.07+20.30)ng/L(P<0.01)。(3)与未用 SB203580处理的 UC 组比较,处理后 UC 肠黏膜组织 p38 MAPK 下游分子活化转录因子-2(ATF_2)的活性表达明显减少,A 值分别为688.32±47.37、265.82±40.25,阳染面积分别为[(2489.02±193.63)×10^(-5)、(1213.76±204.77)×10^(-5)]μm^2,P 值均<0.01,但对磷酸化 p38 MAPK 的表达无影响,A 值分别为480.34±38.87、465.64±38.69,阳染面积分别为[(1536.68±182.16)×10^(-5)、(1486.26±165.49)×10^(-5)]μm~,P 值均>0.05。结论 p38 MAPK 信号传导通路在 UC 的发病中起着重要作用,阻断该通路可减少炎性细胞因子的释放。提示 p38 MAPK 信号传导通路可以为 UC 的治疗提供一个新的靶标,SB203580有可能成为 UC 治疗的新药物。
- 易文全甘华田黄晓丽张蒙欧阳钦
- 关键词：结肠炎溃疡性肿瘤坏死因子
- 溃疡性结肠炎患者核因子-κB活化与细胞因子基因表达被引量：101
- 2002年
- 目的 探讨溃疡性结肠炎 (UC)患者肠黏膜活检组织细胞因子mRNA的表达及其与NF κB活化的关系 ,以及抗炎药物 (柳氮磺吡啶和糖皮质激素 )对其的影响。方法 31例来自四川大学华西医院的UC患者 (符合 1993年太原会议制定的UC诊断标准 )被纳入本研究。其中 17例使用过药物 (柳氮磺吡啶或柳氮磺吡啶 +糖皮质激素 )治疗 ,14例未用过任何与UC治疗相关的药物 ,11例同期结肠癌患者 (取其癌旁正常组织 )作为对照。采用 :(1)凝胶电泳迁移率改变分析检测核因子 (NF) κBDNA结合活性 ;(2 )逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素 (IL) 1βmRNA和IL 8mRNA的表达。 结果 (1)UC患者肠黏膜活检组织IL 1βmRNA和IL 8mRNA表达与对照组相比明显升高 (P <0 0 5 ) ,且与NF κBDNA结合活性呈显著正相关 (IL 1β :r=0 836 3,P <0 0 5 ;IL 8:r=0 6 0 2 4 ,P <0 0 5 )。 (2 )糖皮质激素和柳氮磺吡啶明显抑制NF κB的活性 ,降低IL 1βmRNA和IL 8mRNA的表达。结论 (1)NF κB是UC细胞因子释放的关键调控因素 ,在UC的发生和发展中起着十分重要的作用。 (2 )糖皮质激素和柳氮磺吡啶可能通过抑制NF κB的活性 ,减少细胞因子的表达而起到抗炎作用。
- 甘华田欧阳钦贾道全夏庆杰
- 关键词：溃疡性结肠炎NF-ΚB免疫反应异常
