贵州省自然科学基金(J[2011]2332)
- 作品数：12 被引量：62H指数：6
- 相关作者：程振涛周碧君王开功文明王慧更多>>
- 相关机构：贵州大学贵州省动物疫病研究室贵州省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：贵州省自然科学基金贵州省农业科技攻关项目贵州省重大科技专项计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 2012年贵州羊蓝舌病血清流行病学调查及影响因素分析被引量：10
- 2013年
- 为了解2012年贵州省各地区羊蓝舌病血清流行病学情况,以便合理进行疫病预警和防控。本研究收集2012年贵州省不同地区羊血清样本1869头份,采用ELISA方法对羊蓝舌病血清抗体进行检测,分别就不同地区、年龄阶段、性别、海拔高度及不同类型养殖模式五种因素对BTV血清抗体阳性率影响进行分析。结果显示:贵州省7个市(州)的羊群均检出BTV血清抗体阳性样本,总体阳性率为25.79%(482/1869),各地区间存在差别,以黔东南州最高,铜仁市最低,但差异不十分显著;对不同养殖模式下羊群BTV血清抗体阳性率进行比较,呈现散养户>养羊小区>规模养殖场趋势;不同年龄阶段及性别对BTV血清抗体阳性率影响不大;不同海拔高度对BTV血清抗体阳性率影响呈现一定的规律性,海拔最低处羊群阳性率较低,700m以上海拔高度的羊群BTV抗体阳性率均较高,并且随着海拔不断升高又呈现下降趋势。研究结果表明,贵州省各地区均存在BTV隐性感染风险,应根据影响因素采取合理措施进行防控。
- 王慧覃岚尹鑫周碧君文明程振涛王开功
- 关键词：蓝舌病血清流行病学调查影响因素
- 绵羊肺炎支原体贵州分离株的鉴定被引量：10
- 2013年
- 【目的】对贵州省疑似绵羊肺炎支原体(Mo)感染山羊病例进行病原确定性诊断。【方法】采集疑似Mo感染山羊肺脏,以支原体专用培养基从其中分离致病支原体,并通过形态学观察、生化试验、血清学试验及分子生物学方法对分离菌株进行鉴定。【结果】分离菌株菌落呈无中心脐圆形凸起,菌体呈多形性,大小在0.2～0.4μm;分离株表现出了与Mo标准株Y98相同的生化特性,在含抗Mo血清培养基中不生长;分离株16SrRNA基因序列与Mo Y98株同源性达99.55%,系统进化树分析与MoGH3-3株进化关系最近。【结论】成功分离到了Mo,为确定本地山羊支原体肺炎病原种类提供了理论依据,并为后续围绕病原进行防控工作研究奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民王慧崔亚兰覃岚夏鹏
- 关键词：绵羊肺炎支原体肺炎
- 丝状支原体山羊亚种贵州株的分离与鉴定被引量：5
- 2013年
- 为确定贵州毕节地区某养殖场疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)的病原,通过分子生物学方法对疑似CCPP山羊肺组织进行病原核酸检测,并进行病原分离及初步鉴定。结果显示:从疑似CCPP山羊肺组织中检测到丝状支原体山羊亚种(Mmc)核酸,并从肺组织中分离到具有典型煎蛋样菌落的菌株,命名为GZ-DF;分离菌株进行生化试验,结果与参考株PG3相符;同源性分析及进化树比较结果显示,分离株GZ-DF与Mmc参考株PG3(Mmc PG3)、丝状支原体大菌落型(MmmLC Y-goat)、丝状支原体小菌落型(MmmSC PG1)同源性高达99%,且与MmcPG3共同形成基因树的一个分支;动物回归试验成功复制出CCPP的典型症状和病例剖解变化。结果表明:本次疫情应为Mmc感染羊群所致,研究结果为疫情控制提供方向。
- 王慧周碧君张双翔罗成波贺纛孔令萍文明尹鑫程振涛王开功
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎丝状支原体山羊亚种分子生物学鉴定
- 绵羊肺炎支原体DnaK B细胞抗原表位预测及其蛋白结构分析被引量：3
- 2014年
- 以绵羊肺炎支原体(Mo)热休克蛋白Hsp70(DnaK蛋白)氨基酸序列为基础,运用DNAStar软件和在线服务器等生物信息学分析工具,在同源性分析的基础上,通过Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法、Karplus-Schulz法及Welling法分别预测其抗原指数、亲水性、柔韧性、表面可极性等参数,综合分析、预测了该蛋白的B细胞抗原表位,并进行了蛋白的二级结构预测和3D结构模拟。结果表明,Mo贵州分离株的Hsp70蛋白与其它可致羊发病支原体的Hsp70蛋白同源性较低,说明该蛋白具有良好的特异性;Mo Hsp70蛋白整体抗原性较好,同时呈现较规则的空间结构,其中以C末端较稳定,区域也最大(第394-598区段),为优势B细胞抗原表位区域。
- 王慧罗成波贺纛孔令萍周碧君文明程振涛王开功
- 关键词：绵羊肺炎支原体蛋白结构B细胞抗原表位
- 应用荧光定量PCR筛选绵羊肺炎支原体最适生长培养基被引量：3
- 2013年
- 为筛选绵羊肺炎支原体(Mo)最适生长培养基,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因FQ-PCR方法,通过检测不同培养时间各Mo培养液中Mo Y98株核酸含量,比较Mo于不同培养基中培养特性,以筛选Mo最适生长培养基。结果,以Broth-ame与TSB1培养Mo 7,10和14 d时Mo核酸检测值较高,较Frey-ame、PPLO-ame更适合Mo生长。本研究为后续Mo生物学特性分析奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民覃岚崔亚兰王慧
- 关键词：荧光定量PCR绵羊肺炎支原体
- 热休克蛋白免疫增效作用研究进展被引量：8
- 2015年
- 热休克蛋白是生物细胞受到应激原刺激后产生的一类细胞伴侣蛋白,其包括了大分子量HSP家族、HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族、小分子量HSP家族和泛素等。其在淋巴细胞和巨噬细胞的活化、抗原经典呈递和交叉呈递途径以及作为佐剂增强抗原的免疫原性,调节机体的免疫应答水平方面发挥了重要作用。在疫苗研究中,热休克蛋白作为免疫佐剂已被证实具有重要的调节作用。论文就热休克蛋白的分类、热休克蛋白作为分子伴侣及其在抗原递呈和诱导免疫应答方面的作用研究进展进行综述,为热休克蛋白的进一步研究提供参考。
- 吴燕王琦周碧君石平黄德江程振涛
- 关键词：热休克蛋白免疫增效
- 绵羊肺炎支原体LAMP检测方法的建立及初步应用被引量：6
- 2013年
- 针对绵羊肺炎支原体(Mo)16SrRNA基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)引物,通过优化反应条件与体系,建立了Mo检测LAMP方法,并对其进行特异性、敏感性及临床应用性检测。结果显示,于60℃保温60min即可最优化检测Mo,且所建方法仅能特异扩增Mo,最低检出分子拷贝数为1.0×102copies/μL,具有良好的特异性和敏感性。对4份已知阳性病料进行LAMP检测均为阳性,表明所建LAMP可初步应用于临床检测,为羊Mo感染病例诊断提供了新方法。
- 张双翔周碧君程振涛文明王开功李泽民王慧崔亚兰覃岚
- 关键词：绵羊肺炎支原体环介导等温扩增
- 绵羊肺炎支原体热休克蛋白Hsp70的生物信息学分析被引量：6
- 2014年
- 本试验旨在了解绵羊肺炎支原体(Mo)标准Y98株Hsp70基因生物学特性,以期利用该基因表达蛋白建立ELISA方法。本研究应用DNAStar、Bioedit 7.0、ClustalX 3.0、Mega 4.0软件与Protparam、TMpred、IEDB在线工具对Hsp70蛋白的理化参数、跨膜结构、信号肽、二级结构、B细胞表位及与其他支原体Hsp70蛋白进化关系进行了比对分析。结果显示,Mo Y98株Hsp70蛋白理论分子质量为66.14ku,pI值为5.08,为稳定的可溶性蛋白。该蛋白无跨膜结构,不分泌信号肽,存在多处具有免疫原性的肽段,具有形成抗原表位的优势结构,是建立免疫学方法较为理想的靶蛋白。与多种支原体Hsp70基因进化关系分析结果表明,该蛋白与Mo进化关系最近,与丝状支原体簇成员亲缘关系较远,为进一步分析Mo致病机理提供了理论依据。
- 张双翔程振涛唐宇冉隆仲李涛周碧君文明王开功王慧
- 关键词：绵羊肺炎支原体HSP70基因生物信息学
- 山羊源Mo贵州株药物敏感性分析与基因疫苗研究
- 绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae,Mo）是引起山羊和绵羊特别是羔羊增生性间质性肺炎的主要病原之一,其所致山羊支原体肺炎常造成山羊养殖业的重大经济损失。自1972年首次分离鉴定Mo后,Mo已...
- 覃岚
- 关键词：绵羊肺炎支原体P30基因基因疫苗
- 文献传递
- 小反刍兽疫一步法RT-PCR检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 为储备小反刍兽疫疫情防控技术,根据GenBank公布的小反刍兽疫病毒N基因序列设计合成特异性引物,以小反刍兽疫弱毒疫苗为材料,建立小反刍兽疫病毒一步法PT-PCR检测方法,并对所建方法进行条件优化和性能评价。结果显示,建立的方法能有效扩增大小约447bp目的基因片段。该一步法RT-PCR最佳模板质量浓度为6.76×10-3 g/L,最佳退火温度60℃。该一步法RT-PCR检测方法性能评价结果显示,其最小模板检出质量浓度为6.76×10-6 g/L,且方法具良好的特异性和临床应用性,可用于小反刍兽疫多种样本的检测。
- 王琦吴燕文明周碧君罗成波王开功程振涛
- 关键词：小反刍兽疫病毒一步法RT-PCR
