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广东省科技计划工业攻关项目(2008GBCBC01250014149)
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
相关作者:
孙祥宙
刘贵华
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相关机构:
中山大学附属第一医院
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2011
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慢病毒-血管内皮生长因子165载体的构建及其在脂肪组织来源的干细胞中过表达的研究
被引量:1
2011年
目的构建慢病毒-血管内皮生长因子。(VEGF165)载体并转染脂肪组织来源干细胞(ADSCs)以得到用于基因治疗的种子细胞。方法通过聚合酶链反应(PCR)方法将EHSl001—68950485313912克隆突变成VEGF165(NM_001025368)转录本后采用三质粒系统(pGC—FU、pHelpl.0和pHelp2.0)进行包装慢病毒。通过定时定量PCR测定滴度后使用慢病毒-VEGFl65转染ADSCs。免疫荧光、Westernblot鉴定VEGF165在ADSCs中的表达。结果PCR(535bp)、DNA测序、Westernblot(49×10^3)检测证明成功构建的载体为VEGF165与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体。实时定量PCR确定病毒滴度达到2×10^8TU/ml。慢病毒-VEGF165贷载体转染ADSCs后经免疫荧光验证约95%ADSCs可表达VEGF165,同时Westernblot也证明基因稳定表达。结论通过获得稳定表达VEGF165的ADSCs,为血管性疾病特别是糖尿病性勃起障碍的治疗奠定了基础。
孙祥宙
刘贵华
黄燕平
高勇
张亚东
邓春华
关键词:
脂肪组织来源干细胞
VEGF165
慢病毒
过表达
前列腺癌根治术后勃起功能障碍动物模型的建立
被引量:3
2011年
目的 对大鼠海绵体神经(CN)进行解剖并对其造成钳夹损伤,以建立前列腺癌根治术(RP)后勃起功能障碍(ED)的动物模型.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组、正常组,术后4周通过阿朴吗啡(APO)实验及海绵体内压(ICP)/平均动脉压(MAP)测定、阴茎神经型一氧化氮合酶(nNOS)免疫组织化学检测以评估建立模型的效果.结果 术后4周3组大鼠的阴茎勃起率和平均勃起次数分别为0%和0次、100%(11/11)和(2.24±0.86)次、100%(12/12)和(2.39±0.92)次.模型组大鼠无明显勃起反应,假手术组、正常组可见明确勃起反应.电刺激盆腔星状神经节(MPG)前3组大鼠ICP/MAP分别为(0.13±0.04)、(0.10±0.03)、(0.12±0.03),电刺激MPG后分别为(0.12±0.05)、(0.57±0.08)、(0.58±0.06),电刺激MPG前3组ICP/MAP差异均无统计学意义(P>0.05),模型组与假手术组、正常组的电刺激MPG后ICP/MAP差异有统计学意义(P<0.05).3组大鼠阴茎nNOS阳性神经纤维数分别为(23.04±2.59)、(73.94±7.51)、(80.26±6.95),模型组大鼠阴茎nNOS阳性神经纤维数明显少于假手术组、正常组(P<0.05).结论 大鼠CN结构与人类非常相似,CN钳夹损伤是建立RP术后ED模型的可靠的方法.
卞军
孙祥宙
戴宇平
刘贵华
邓春华
杨国胜
关键词:
前列腺癌根治术
勃起功能障碍
海绵体神经
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