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表达ROG的重组腺相关病毒载体的构建及高滴度病毒的制备被引量：1: 2005年; 目的:获得表达小鼠ROG(repressor of GATA 3)基因的重组腺相关病毒载体,制备表达ROG的重组腺相关病毒。方法:设计、合成引物,通过RT PCR法从CTLL 2细胞总RNA中扩增ROG基因,测序确认后,连接于pAAV MCS载体,双酶切、PCR鉴定重组病毒载体;制备高滴度重组腺相关病毒。结果:成功扩增了小鼠ROG基因,构建可表达ROG基因的重组腺相关病毒载体,并获得表达ROG的重组腺相关病毒。结论:本实验获得的小鼠ROG重组腺相关病毒,将为支气管哮喘的基因治疗研究奠定基础。; 王桂芳施柯杨丹榕陈吉泉修清玉黎怀星孙树汉; 关键词：REPRESSOR GATA-3 重组腺相关病毒哮喘基因治疗

白细胞介素12对抗原诱导小鼠过敏性气道反应的调节作用: 2002年; 目的 :探讨气道内应用白细胞介素 12 ( IL - 12 )对抗原诱导的过敏性气道反应的影响。方法 :C5 7BL / 6小鼠以卵白蛋白( OVA )免疫建立哮喘模型 ,在主动免疫及抗原激发阶段气道内应用 IL - 12 ,观察肺泡灌洗液细胞成分、肺部淋巴细胞产生细胞因子、外周血 Ig E水平变化。结果 :( 1)致敏阶段应用 IL - 12可明显抑制嗜酸粒细胞浸润和肺淋巴细胞分泌 IL - 5 ,降低血浆总 Ig E和抗原特异性 Ig E的水平 ;( 2 )抗原激发阶段应用 IL - 12 ,可明显抑制嗜酸粒细胞的浸润 ,抑制肺淋巴细胞产生 IL - 4、IL - 5及增强其产生 IFN-γ,但对抗原特异性 Ig E水平则无明显影响 ;( 3 )当在致敏和激发阶段均应用 IL - 12时 ,可明显抑制肺淋巴细胞产生IL - 4、IL - 5 ,增强 IFN-γ的产生 ,抑制气道内嗜酸粒细胞的浸润以及血浆中 Ig E水平的升高。结论 :气道内应用 IL - 12对抗原诱导的气道过敏性炎症有明显的调节作用 ,并与应用时机有关 ;为气道应用 IL -; 陈吉泉修清玉沈策陈海兵颜泽敏罗文侗; 关键词：白细胞介素12 哮喘免疫治疗抗原小鼠

高滴度表达抑制转录因子的重组腺相关病毒的制备: 2004年; 目的　获得表达小鼠抑制转录因子ROG(repressorofGATA -3)基因 ;构建表达ROG的重组腺相关病毒载体 ,制备腺相关病毒。方法　设计、合成引物 ,通过逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)从CTLL- 2细胞总RNA中扩增ROG基因 ,测序成功后 ,最终连接于pAAV- MCS ,双酶切、PCR鉴定阳性重组质粒 ,并在Hela细胞中表达 ;制备高滴度重组腺相关病毒。结果　成功扩增了小鼠ROG基因 ,构建表达ROG基因的重组腺相关病毒表达载体 ,并成功表达于Hela细胞。结论　本实验构建的小鼠ROG重组腺相关病毒将为哮喘的基因治疗研究奠定物质基础。; 王桂芳杨丹榕修清玉施柯吴丹黎怀星孙树汉; 关键词：重组腺相关病毒转录因子 HELA细胞高滴度酶切总RNA

CpG脱氧寡核苷酸对抗原致敏性小鼠气道反应的影响被引量：6: 2001年; 目的 :探讨以非甲基化胞嘧啶 -鸟嘌呤 ( Cp G)脱氧寡核苷酸 ( ODN)治疗支气管哮喘的免疫抑制作用。方法 :以卵白蛋白 ( OVA)免疫 C5 7BL / 6小鼠建立支气管哮喘模型 ,致敏阶段腹腔注射 Cp G ODN,以不含 Cp G序列的 ODN及生理盐水作对照 ,观察应用 Cp G ODN对支气管哮喘形成、气道过敏性免疫反应的影响。结果 :应用 Cp G ODN组与对照组相比 :( 1)明显抑制抗原激发后气道内嗜酸粒细胞的浸润 ( P<0 .0 1) ;( 2 )明显抑制肺内 IL-4、IL-5产生 ,增加 IL-12、IFN-γ的产生 ;( 3)明显抑制抗原诱导的气道反应性的增高 ;( 4 )明显抑制外周血总 Ig E及抗原特异性 Ig E的水平。结论 :致敏阶段应用 Cp G ODN对抗原诱导的气道过敏反应有明显的抑制作用 ,可阻断支气管哮喘的形成 ,这种抑制作用部分与 IL-12、IFN-γ的产生增加有关。; 陈吉泉沈策颜泽敏修清玉; 关键词：哮喘免疫治疗抗原致敏性气道反应小鼠

白介素2重组腺病毒气管内应用治疗实验性肺转移癌的研究: 2002年; 为研究气管内应用白介素 2 (IL 2 )重组腺病毒 (AdIL 2 )对实验性肺转移癌的治疗作用 ,向小鼠气管内滴入AdIL 2 ,用ELISA法测定局部及外周血IL 2及相关因子的水平 ,并向C5 7BL/ 6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌 3LL细胞建立肺转移癌模型 ,观察气管内应用AdIL 2对实验性肺转移癌的治疗作用 ,包括肺转移结节、动物存活期、生存率变化等 ,并比较自然杀伤活性 (NK)和特异性细胞毒(CTL)活性的变化。结果显示 ,气管内应用AdIL 2后肺灌洗液中测到IL 2且高于外周血水平 ,对照组肺灌洗液及外周血中的水平明显低于实验组 (P <0 0 1) ;气管内滴入AdIL 2可使肺转移结节减少、动物的生存期延长、存活率升高 ,同时对NK、CTL活性有增强作用 (P<0 0 1)。提示气管内应用IL 2重组腺病毒可有效表达并对实验性肺转移癌有治疗作用。; 陈吉泉颜泽敏修清玉于益芝; 关键词：肺转移癌白细胞介素2 重组腺病毒肿瘤转移

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国家自然科学基金(30170406)