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转基因生物新品种培育专项(2009ZX08007-003B)
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黄英
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比较牛催乳素与生长激素对外源基因表达的影响
2013年
目的:用牛生长激素(bGH)和牛催乳素(bPRL)乳腺特异载体DNA分别转染携带人转铁蛋白(hTF)的转基因小鼠乳腺上皮细胞,比较这二种载体对外源基因(人转铁蛋白)的表达影响,为研制特异、高效表达外源蛋白转基因动物过程中载体的合理构建,提供有价值的理论和技术基础。方法:将构建β-酪蛋白启动子(P1A3)调控的bGH和bPRL乳腺特异表达载体分别转染体外培养的转基因小鼠乳腺上皮细胞;并将转染pcDNA3.1质粒和未转染细胞作为对照,收集不同代数的细胞及上清液,用RT-PCR及Elisa法分析mRNA及蛋白,分析比较二者对hTF表达水平的影响。结果:RT-PCR显示人转铁蛋白转录电泳条带明显;Elisa表明二者均能提高hTF蛋白水平的表达。结论:首次应用牛生长激素和催乳素对外源基因表达影响作用进行比较研究;β-酪蛋白启动子(P1A3)调控的bGH和bPRL均能促进在乳腺上皮细胞水平上外源蛋白表达。因此,在研制转基因动物———乳腺生物反应器中,采用bGH和bPRL促进乳汁中外源蛋白特异、高效表达的载体都将是可选择的新技术途径。
闫亚彬
蔡勤
蔡琳琳
龚秀丽
朱怡文
管翌华
黄英
关键词:
牛生长激素
乳腺生物反应器
重组转铁蛋白的研究进展
2010年
转铁蛋白家族存在于脊椎和无脊椎动物中。该家族蛋白是由血清转铁蛋白、卵转铁蛋白、乳转铁蛋白、黑色素转铁蛋白、碳酸酐酶抑制因子等构成[1]。血清转铁蛋白(serum transferrin)在人、罗猴、狗、猫、兔、荷兰猪、小鼠、大鼠、奶牛、绵羊、山羊、马、火鸡、鸭、海龟和响尾蛇中均有存在,丰要由肝细胞合成,分布在胆汁、羊水、脑脊液、淋巴液、初乳和乳汁中,但血浆中含量最高(2.5g/L),
谢俊
黄英
关键词:
血清转铁蛋白
无脊椎动物
家族蛋白
肝细胞合成
碳酸酐酶
哺乳动物乳腺上皮细胞的研究和应用
2013年
转基因动物一乳腺生物反应器的研制是近十多年发展起来的一项生物制药方法,具有巨大的应用前景。外源目的基因载体的构建是制备转基因动物一乳腺生物反应器成功的关键技术环节,因此建立简单、快捷检测外源基因载体构建的合理性和表达情况的方法至关重要。由于乳腺上皮细胞能较真实反映哺乳动物乳腺生长发育及泌乳的各项生理功能,开展体外培养哺乳动物乳腺上皮细胞,可作为转基因动物制备过程中载体有效性检验的一种体外模型途径。本文将对哺乳动物乳腺组织的结构和乳腺上皮细胞体外培养的增殖能力、诱导、维持分化的特点,以及乳腺上皮细胞的培养和它在生物、医学领域中的应用研究进行简要概述。
闫亚彬
黄英
关键词:
乳腺生物反应器
基因载体
乳腺上皮细胞
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