国家自然科学基金(30872555)
- 作品数：19 被引量：67H指数：6
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- 肺癌患者以生物材料为中心细菌感染的研究进展被引量：1
- 2013年
- 肺癌患者不但自身细胞免疫功能低下,而且肺癌组织可以产生大量免疫抑制因子(TDSF)促成肺癌患者免疫功能障碍。肺癌患者在接受手术、化疗、放疗后免疫功能进一步损伤。医用生物材料植入后导致细菌生物膜相对更易出现,细菌生物膜的形成是导致生物材料植入后感染难治性的主要根源。文章就肺癌患者以生物材料为中心细菌感染的研究进展及防治进行综述。
- 饶钟鸣黄云超雷玉洁
- 关键词：生物材料肺癌细菌生物膜免疫功能
- 溴代呋喃酮对聚氯乙烯材料表面大肠杆菌生物膜形成的影响被引量：5
- 2010年
- 目的探讨不同溴代呋喃酮对聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)材料表面大肠杆菌生物膜形成的影响,为生物材料表面改性研究及临床生物材料植入感染的防治提供新思路。方法选用具有化学结构代表性的3种溴代呋喃酮,溴代呋喃酮1:3,4-二溴基-5-羟基-呋喃酮,溴代呋喃酮2:4-溴-5-(4-甲氧基苯基)-3-(甲氨基)-呋喃酮,溴代呋喃酮3:3,4-二溴基-5,5-二甲苯基-2(5H)-呋喃酮,分别对PVC材料片(1cm×1cm)进行表面涂层改性,将改性后的PVC材料片与大肠杆菌共同培养;将PVC材料片用75%乙醇浸泡5min后与大肠杆菌共同培养作为对照组。分别于培养6、12、18、24h,采用激光共聚焦显微镜动态观测PVC材料表面单位面积细菌群落数及细菌群落厚度,扫描电镜观察PVC材料表面细菌生物膜表面结构。结果激光共聚焦显微镜观测显示,各时间点溴代呋喃酮3组PVC材料表面单位面积细菌群落数以及细菌群落厚度均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而溴代呋喃酮1组和溴代呋喃酮2组与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜观察示,与对照组比较,溴代呋喃酮3组培养后6h PVC材料表面细菌群落附着数量较少;18h时对照组及溴代呋喃酮1组和溴代呋喃酮2组PVC材料表面细菌生物膜结构已初步形成,而溴代呋喃酮3组PVC材料表面无明显细菌生物膜结构形成。结论不同溴代呋喃酮对PVC材料表面大肠杆菌生物膜形成的影响不同,3,4-二溴基-5,5-二甲苯基-2(5H)-呋喃酮可抑制PVC材料表面单位面积大肠杆菌群落数和细菌群落厚度形成。
- 叶联华许赓黄云超周友全赵光强雷玉洁
- 关键词：聚氯乙烯细菌生物膜大肠杆菌
- 在非小细胞肺癌患者中甲状旁腺激素相关蛋白PTHrP的表达及其临床意义
- 2011年
- 背景与目的:甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)通常在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中表达,结构与甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)相似,除引起恶性肿瘤高钙血症,还可调节癌细胞的生长、凋亡和肿瘤血管生成,此作用与性激素状态相关。本研究旨在探讨NSCLC患者中PTHrP的表达、PTHrP的表达与性别的关系及其临床意义,为肺癌发病过程中性别角色的研究提供一定的临床依据。方法:用免疫组织化学SP法检测125例NSCLC肿瘤组织、癌旁组织及远端正常组织中PTHrP的表达,分析PTHrP的表达与患者年龄、性别、组织学分型、临床分期、吸烟史及预后的相关性。用Log-rank法比较阳性及阴性患者的生存率。结果:NSCLC肿瘤组织、癌旁组织及远端正常组织中PTHrP的阳性表达率分别是65.6%(82/125)、24%(30/125)和16.8%(21/125),在癌组织中的表达较在癌旁组织和正常对照组织中的表达高(P<0.05)。在女性患者中PTHrP的表达(82.7%)较在男性患者中PTHrP的表达(53.4%)高(P<0.05)。在不同的组织学分型中以腺癌PTHrP的表达高(70.8%),但差异无统计学意义(P=0.359)。女性患者中PTHrP阳性者的中位生存时间是38.62个月,PTHrP阴性者的中位生存时间是20.00个月(P<0.05);男性患者中PTHrP阳性者的中位生存时间是27.14个月,PTHrP阴性者的中位生存时间是25.00个月(P>0.05)。在吸烟者中,PTHrP阳性者的中位生存时间是35.24个月,PTHrP阴性者的中位生存时间是25.00个月(P<0.05);不吸烟者中,PTHrP阳性者的中位生存时间是38.71个月,PTHrP阴性者的中位生存时间是20.00个月(P<0.05)。结论:在NSCLC患者中PTHrP的表达在肿瘤组织中较高,在女性患者中较高,在腺癌中相对较高。女性患者的生存状态与PTHrP的表达有关,PTHrP阳性者的生存率更高;男性患者的生存状态与PTHrP的表达无关。吸烟或不吸烟者的生存状态均与PTHrP的表达有
- 龚丽明黄云超李鸿钧欧霞王东坤
- 关键词：非小细胞肺癌病理学甲状旁腺激素相关蛋白免疫组织化学
- 血糖对树鼩感染表皮葡萄球菌清除能力及植入性材料细菌黏附性的影响(英文)被引量：1
- 2011年
- 背景:高浓度葡萄糖培养条件下,细菌在生物材料表面有较强的生物膜形成能力。目的:观察血糖升高对表皮葡萄球菌在动物体内清除能力及植入性生物材料上细菌生物膜形成的影响。方法:注射链脲佐菌素建立高血糖树鼩模型(血糖≥11.1mmol/L),采用生物膜形成阳性与阴性表皮葡萄球菌感染高血糖与正常对照树鼩,并同时在动物股静脉内植入PVC导管。结果与结论:感染生物膜形成阳性的表皮葡萄球菌株后,血糖≥11.1mmol/L树鼩血液、心脏、肝脏、肾脏、胰腺的细菌感染率及菌落计数较正常对照组高(P<0.05);扫描电镜观察血糖≥11.1mmol/L组植入生物材料上有明显的生物膜形成。感染生物膜形成阴性表皮葡萄球菌株后无论血糖高低,均未观察到生物膜形成。表明血糖升高不仅使植入生物材料树鼩的细菌清除能力下降,同时可诱导细菌在植入生物材料表面形成明显的生物膜。
- 徐玉善王曦许云敏雷玉洁贺猛黄云超
- 关键词：表皮葡萄球菌生物材料生物膜血糖树鼩
- 大肠杆菌qseC基因敲除及其缺陷株生物被膜形成的研究被引量：4
- 2011年
- 目的通过Red同源重组法构建qseC基因缺失的大肠杆菌突变株，并探讨qseC基因对大肠杆菌生物被膜形成的影响。方法PCR扩增两翼与目的基因上下游同源、含有氯霉素抗性基因片段，电击转化入大肠杆菌MCl000，在Red同源重组酶作用下，用含同源臂的氯霉素抗性片段置换目的基因qseC，并利用FLP位点专一性重组将氯霉素抗性基因删除。结晶紫染色半定量法分析qseC基因缺失株生物被膜形成能力的变化。结果PCR及DNA测序结果表明，qseC基因已被成功敲除。在LB培养基中，qseC基因缺陷株的生长状况与亲株无明显差异。MCl000与MCl000△qseC基因缺失株生物被膜形成能力半定量A值的结果分别为1．00±0．15和0．47±0．10。结论成功构建大肠杆菌qseC基因缺失突变株，且qseC基因对细菌生物被膜的形成具有调控作用。
- 杨堃雷玉洁黄云超叶联华赵光强
- 关键词：大肠杆菌RED同源重组密度感应细菌生物被膜
- DNA结合抑制因子1在非小细胞肺癌组织中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的探讨DNA结合抑制因子1(Id1)在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展中的作用及与NSCLC临床病理特征之间的联系。方法选取30例NSCLC癌组织、癌旁组织和正常肺组织以及10例肺良性病变组织和正常肺组织,采用RT-PCR和免疫组化SP法测定其Id1 mRNA和Id1蛋白的表达情况。结果 (1)Id1 mRNA、Id1蛋白在NSCLC癌组织中的阳性表达率为96.67%(29/30)、93.33%(28/30),在癌旁组织中的阳性表达率为13.33%(4/30)、10%(3/30),在NSCLC正常肺组织、肺良性病变组织及其正常肺组织中均未见表达。(2)NSCLC癌组织Id1 mRNA和Id1蛋白的表达强度随癌细胞分化程度的降低而增强。(3)NSCLC患者Id1 mRNA和Id1蛋白的表达与病理类型、瘤体大小、淋巴结转移及预后无明显相关性。结论 Id1因子可能是鉴别NSCLC与肺良性病变的重要分子标记物之一,且其表达水平与NSCLC癌细胞分化程度呈负相关。
- 向旭东叶联华黄云超李高峰张丽娟周永春
- 关键词：非小细胞肺癌细胞分化
- 医源性表皮葡萄球菌胞间黏附素基因操纵子在聚氯乙烯材料表面细菌生物膜形成中的作用研究被引量：14
- 2011年
- 目的表皮葡萄球菌胞间黏附素基因(intercellar adhesion,ica)是细菌聚集的关键因子,通过分析医源性表皮葡萄球菌生物膜基因型,探讨ica操纵子在聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)材料表面细菌生物膜形成中的作用。方法取56株医源性表皮葡萄球菌临床分离株,应用PCR法、基因测序技术检测细菌生物膜形成相关基因,包括16S rRNA、自溶素(autolysin,atlE)、纤维蛋白原结合蛋白(fi brinogen binding protein,fbe)以及ica。取医源性表皮葡萄球菌制备浓度为1×105cfu/mL的细菌悬液,并根据目的基因检测结果,分别以icaADB、atlE、fbe阳性基因型(ica操纵子阳性组)以及icaADB阴性而atlE、fbe阳性基因型(ica操纵子阴性组)与PVC材料培养。于6、12、18、24、30h各取2个PVC材料,进行激光共聚焦显微镜及扫描电镜观察,测量单位视野细菌群落数量及形成的细菌生物膜厚度。结果目的基因检测示,医源性表皮葡萄球菌16S rRNA阳性率为100%(56/56);icaADB、atlE、fbe阳性基因型菌株占57.1%(32/56);icaADB阴性而atlE、fbe阳性基因型菌株占37.5%(21/56)。测序结果示,目的基因16S rRNA、atlE、fbe、icaADB扩增产物序列分别与GenBank中基因序列相符。随时间延长,ica操纵子阴性组的PVC材料表面无明显细菌生物膜形成;ica操纵子阳性组的PVC材料表面细菌群落数量逐渐增多,细菌生物膜体积逐渐增大,24h时可见成熟的细菌生物膜结构,30h时细菌生物膜体积趋于稳定。培养各时间点ica操纵子阳性组PVC材料表面单位视野细菌群落数量(F=435.987,P=0.000)及细菌生物膜厚度(F=6714.395,P=0.000)明显高于ica操纵子阴性组,差异均有统计学意义。结论医源性表皮葡萄球菌可以分为ica操纵子阴性和ica操纵子阳性两类细菌;ica操纵子可以增加PVC材料表面细菌生物膜的形成能力、细菌群落数量及细菌生物膜厚度,在PVC材料表面细菌生物膜形成中具有重要作用。
- 叶联华黄云超许赓杨达宽刘馨周友全郭凤丽
- 关键词：医源性表皮葡萄球菌细菌生物膜聚氯乙烯
- 生物材料植入后发生感染与表皮葡萄球菌生物膜被引量：15
- 2010年
- 表皮葡萄球菌是生物材料植入后发生感染的主要条件致病菌,细菌生物膜的形成是导致生物材料植入后感染难治性的主要根源。文章就表皮葡萄球菌生物膜、生物材料植入后发生感染与表皮葡萄球菌生物膜进行综述,同时阐述生物材料表面细菌生物膜的研究方法。
- 叶联华黄云超李高峰杨达宽奚廷斐
- 关键词：生物材料表皮葡萄球菌细菌生物膜
- Sox4表达抑制对宣威地区女性肺癌细胞凋亡影响及其机制的探讨被引量：8
- 2013年
- 目的:研究靶向抑制sox4基因的表达对宣威地区女性肺癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:构建靶向抑制转录因子sox4的shRNA重组载体pGFP-V-RS-sox4shRNA并转染宣威地区女性肺癌细胞XWLC-05,以转染pGFP-V-RS-scramshRNA的XWLC-05细胞及亲本XWLC-05细胞作为对照,研究sox4表达抑制对Caspase-3表达、细胞形态、细胞周期和凋亡率等凋亡指标的影响。使用Caspase-3抑制剂z-VAD-FMK处理转染细胞,检测上述细胞凋亡指标。结果:成功构建了能高效抑制sox4基因表达的pGFP-V-RS-A-sox4shRNA重组载体;转染后48及72h,实验组细胞sox4mRNA表达水平分别为0.09±0.018及0.44±0.06,比转染后24h降低了88%和40%,与同一时段中的阴性对照及空白对照组相比表达水平明显降低(P<0.05),其中以转染后48h的抑制最为明显,而Caspase-3mRNA表达与阴性对照及空白对照组相比均明显升高(P<0.05),以48h升高最明显;空白对照组与阴性对照组间比较,转染48及72h后sox4mRNA(P=0.071;P=0.063)和Caspase-3mRNA(P=0.103;P=0.229)的表达水平差异无统计学意义;抑制sox4基因的表达后细胞出现典型的凋亡形态学改变;流式细胞术(FCM)检测显示,转染干扰质粒后48h,细胞出现明显的亚二倍体峰,实验组细胞的凋亡率平均为(34.8±3.37)%,显著高于阴性对照组(0.45±0.05)%及空白对照组(0.44±0.06)%,P均为0.000。经z-VAD-FMK阻断Caspase-3酶活性后,实验组细胞中活化的Caspase-3(13.6±1.76)%显著低于阴性对照组(50.5±6.15)%,差异有统计学意义,P=0.000;实验组细胞的凋亡率(10.8±1.05)%也明显低于阴性对照组细胞(38.3±3.16)%,P=0.000。结论:抑制sox4的表达可促进宣威地区女性肺癌细胞凋亡;转录因子sox4可能通过抑制Caspase-3依赖的凋亡途径而促进宣威地区女性肺癌的发生发展。
- 周永春陈艳王熙才黄尤光金从国姚乾杨世华刘馨黄云超
- 关键词：女性肺肿瘤细胞凋亡基因表达
- 表皮葡萄球菌ica操纵子与聚氯乙烯材料表面细菌生物膜形成的关系被引量：8
- 2010年
- 目的分析医源性表皮葡萄球菌生物膜基因型,探讨医源性表皮葡萄球菌ica操纵子与聚氯乙烯(PVC)材料表面细菌生物膜形成的关系。方法应用PCR法、DNA凝胶成像及基因测序技术检测医源性表皮葡萄球菌的生物膜形成相关基因,采用半定量测定方法测定PVC材料表面表皮葡萄球菌的细菌生物膜形成能力。结果医源性表皮葡萄球菌16S rRNA阳性率为100.0%;icaADB、atlE、fbe阳性基因型菌株占57.1%;icaADB阴性,atlE、fbe阳性基因型菌株占37.5%;ica操纵子阳性表皮葡萄球菌在PVC材料表面的细菌生物膜形成能力较ica操纵子阴性明显增强,差异有统计学意义(P<0.01)。结论医源性表皮葡萄球菌可以分为ica操纵子阴性和ica操纵子阳性两类细菌,ica操纵子可以增加PVC材料表面细菌生物膜的形成能力,这可能是区分共生性和侵袭性表皮葡萄球菌的遗传基础。
- 叶联华黄云超杨达宽赵光强刘馨郭凤丽周友全
- 关键词：表皮葡萄球菌ICA操纵子细菌生物膜聚氯乙烯
