转基因生物新品种培育专项(2009ZX08007-005B)
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 相关作者：李俊雅许尚忠高雪刘喜冬李姣更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所吉林省农业科学院东北农业大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项吉林省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转Fat-1基因体细胞克隆草原红牛研究被引量：3
- 2012年
- Fat-1基因的转基因动物克隆,为研究ω-3多不饱和脂肪酸的功能提供了高效、准确的医学、营养学动物模型。试验成功建立了草原红牛耳部成纤维细胞系,将Fat-1基因转染到草原红牛成纤维细胞,获得转基因阳性细胞克隆。以转基因细胞为核供体,体外成熟牛卵母细胞为核受体构建转基因克隆囊胚,比较未转基因与转基因克隆胚胎的体外发育情况。结果表明,体细胞重构胚体外囊胚率分别为26.04%和26.04%,两者之间无显差异著(P>0.05)。转Fat-1基因的草原红牛重构桑葚胚或早期胚胎移植到延边黄牛子宫内,有7头妊娠,但没能够获得妊娠足月个体。
- 康锦丹高威威高青山张立春
- 关键词：体细胞克隆草原红牛
- 转bFat-1基因载体及牛胚胎成纤维转基因细胞系构建
- 2013年
- 为了获取转bFat-1基因牛胎儿成纤维细胞系,试验采用酶切连接方法构建pIRES2-eGFP-bFat-1载体,采用脂质体转染、G418筛选、荧光显微镜观察、基因组PCR和RT-PCR鉴定方法构建重组转bFat-1基因牛胚胎成纤维细胞。结果表明:SacⅠ和ApaⅠ双酶切和测序验证pIRES2-eGFP-bFat-1载体构建正确;经脂质体转染,G418筛选去除未转染细胞,最后通过荧光显微镜观察,基因组PCR和RT-PCR鉴定获得了4株既高表达绿色荧光蛋白又高表达bFat-1基因的牛胚胎成纤维转基因细胞株。说明已成功构建了转bFat-1基因载体并构建出转基因细胞系。
- 张立春金海国刘铮郭振刚曹阳于永生朴庆林王晓阳
- 基于高密度SNP芯片技术对中国西门塔尔牛SCD1基因与肉质性状的相关性分析被引量：7
- 2012年
- 试验借助高密度SNP芯片技术在整个基因组范围内对223头中国西门塔尔牛群体进行基因分型,在SCD1基因上发现7个SNPs位点,对各SNP位点与西门塔尔牛肉质性状进行相关性分析。结果表明,SCD1基因的7个SNPs位点均与大理石花纹等级显著相关(P<0.05或P<0.01);A10050C、A13655G、C14790T和A15565G4个位点对剪切力影响显著(P<0.05);位点A13655G对肌内脂肪含量影响显著(P<0.05);位点A10050C、C14790T、A15565G不同基因型个体间脂肪颜色差异显著(P<0.05)。单体型分析结果显示,7个SNPs位点共构成6种单体型和14种单体型组合。单体型组合H3H6与高肌内脂肪含量极显著相关(P<0.01);单体型组合H6H6与优质大理石花纹极显著相关(P<0.01);单体型组合H4H6与高剪切力值显著相关(P<0.05);各单体型组合对肉色和脂肪颜色影响不显著。
- 张立敏张猛周正奎刘利刘喜冬陈翠陈晓杰朱淼袁峥嵘李姣许尚忠高会江高雪张路培李俊雅
- 关键词：肉质性状单体型
- 线虫fat-1基因密码子优化设计被引量：3
- 2010年
- 本研究旨在优化线虫fat-1基因,使其在牛肌肉组织中高效表达,为进一步生产fat-1转基因肉牛提供目的基因。试验在不改变fat-1基因编码氨基酸序列的基础上,参考了11个牛肌肉蛋白相关基因的密码子使用频率,对fat-1基因进行了密码子优化。结果发现,共改变了65个碱基,涉及65个密码子、7个氨基酸,约占fat-1基因总碱基数的5.38%,G+C含量从45.08%上升到50.04%,且分布均匀利于基因的表达。结构预测结果显示,该优化后的基因能够在牛肌肉中高效表达。
- 杜新华赵志辉于浩李俊雅高雪许尚忠
- 关键词：密码子优化肌肉蛋白
- GH、CAPN1和CAST基因的多态性与雪龙黑牛生长性能和胴体性状的相关性研究
- 【目的】研究雪龙黑牛GH、CAPN1和CAST基因的遗传多肽以及各多态位点对生长性能和胴体性状的相关性,为分子育种提供科学依据。【方法】本试验究采用了分子标记辅助选择技术,以大连雪龙集团的F1代商品雪龙黑牛为试验动物,利...
- 陈晓杰吴蒙张立敏陈翠周正奎张猛黄萌刘利高雪许尚忠李俊雅高会江张路培李姣
- 关键词：GH基因CAPN1基因CAST基因胴体性状
- 文献传递
- ctsd、ctsl基因的多态性与'雪龙'黑牛胴体性状相关性研究
- 为了提高雪龙黑牛的胴体性状,进行新品种选育,以组织蛋白酶D、L(Cathepsin D,Cathepsin L)基因为候选基因,利用PCR-RFLP方法对114头雪龙黑牛F1代商品牛进行多态性检测,应用SAS 9.2软件...
- 陈晓杰高雪许尚忠李俊雅高会江张路培李姣吴蒙张立敏陈翠刘喜冬周正奎张猛黄萌刘利
- 关键词：胴体性状
- 线虫Fat-1基因密码子的优化及其真核表达载体构建被引量：2
- 2012年
- 目的:为使线虫Fat-1基因能够在牛中高效表达,通过密码子优化及全基因合成方法制备Fat-1基因,并构建其转基因表达载体。方法:通过生物信息学手段,将来源于线虫的Fat-1基因以牛为表达宿主进行密码子优化,将优化后的Fat-1基因命名为bFat-1;通过全基因合成方法获得bFat-1基因,构建pcDNA3.1-bFat-1真核表达载体。结果:通过密码子优化,影响Fat-1基因在牛中表达的密码子适应指数、优势密码子频率及GC含量等各项指标均有显著改善;全基因合成、克隆及测序结果显示已获得bFat-1基因;构建并鉴定了pcDNA3.1-bFat-1载体。结论:获得了适合牛体表达的Fat-1基因并构建了其转基因载体,为获得高效表达Fat-1基因的转基因牛细胞系奠定了基础。
- 张立春刘晓辉曹阳于永生朴庆林金海国王晓阳
- 关键词：线虫密码子优化
- UCP3基因遗传多态性与中国西门塔尔牛生长及育肥性状的遗传效应分析被引量：5
- 2012年
- 为了分析UCP3基因SNPs与中国西门塔尔牛生长及育肥性状的相关性。以118头中国西门塔尔育肥牛为研究材料,通过DNA测序和PCR-RFLP技术检测UCP3基因BglI酶切位点SNPs,并进行相关分析。UCP3-BglI酶切位点表现多态,且处于Hardy-Weinberg平衡状态。与部分育肥性状的相关分析表明,该位点与饲料转化率性状和平均日增重性状表现显著相关(P<0.05),其中AA基因型个体均值显著优于AB和BB基因型个体,料肉比较低,日增重较高;与部分生长性状的相关分析发现在15月龄体高、体长和胸围性状,12月龄体高性状,8月龄体长性状中UCP3-BglI多态位点差异显著,AA基因型个体表型值显著高于其他或其中一个基因型值(P<0.05);在宰后体尺性状测量性状中,UCP3-BglI多态位点对胴体长、胴体胸深和后腿宽和背膘厚性状影响显著。其中AA和AB基因型个体胴体长、胴体胸深和背膘厚性状的表型值显著高于BB基因型个体(P<0.05);在后腿宽性状中,AB个体表型值显著高于AA和BB个体(P<0.05)。初步认为,AA基因型与优良的生长育肥性状显著相关,对A等位基因的选择有利于优良性状的改良。
- 陈翠张立敏陈晓杰刘喜冬李姣张路培高会江高雪李俊雅许尚忠
- 关键词：生长性状
- 3种不同方法对肉牛胴体性状预测能力的比较研究
- 2012年
- 本研究为了寻求一种对肉牛胴体性状预测准确性较高的方法,运用DPS数据处理系统和SAS软件比较偏最小二乘回归、GM(1,N)灰色系统和BP神经网络3种常用的预测模型对肉牛胴体性状的预测能力。选择肉牛7个宰前生长性状(体高、体长、胸围、腹围、管围、宰前活体质量、平均日增体质量),对2个重要的胴体性状(胴体质量和净肉质量)进行预测。结果表明:偏最小二乘回归方法在肉牛胴体性状预测方面准确性最高;GM(1,N)灰色系统和BP神经网络预测准确度偏低。本研究还将3种预测结果相结合,取其均值,大大提高了预测的准确性。这一研究将为肉牛生产实践提供一定的科学参考。
- 张立敏张猛周正奎刘喜冬陈翠陈晓杰李姣袁峥嵘高雪高会江许尚忠李俊雅
- 关键词：偏最小二乘回归BP神经网络胴体性状
- 草原红牛胎儿成纤维细胞的分离培养及性别鉴定被引量：4
- 2012年
- 为了获得高质量的草原红牛胎儿成纤维细胞,试验以发育40 d的草原红牛胎儿为材料,采用组织块贴壁法及胶原酶消化法分离纯化草原红牛胎儿成纤维细胞,并绘制生长曲线,再以SRY基因为模板设计性别鉴定引物,通过对已知性别草原红牛血液基因组PCR扩增检验所设计引物的性别特异性,最后采用基因组PCR方法鉴定分离得到的成纤维细胞的性别。结果表明:成功分离纯化出草原红牛胚胎成纤维细胞,经基因组PCR检验该细胞株性别为雄性。
- 张立春张国梁于永生朴海仙曹阳金海国
- 关键词：草原红牛胚胎成纤维细胞体外培养性别鉴定
