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国家自然科学基金(30872525)
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
相关作者:
夏红利
乔建国
谭最
陈德杰
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发文基金:
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邱仁峰
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谭最
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乔建国
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夏红利
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年份
2篇
2011
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从scFv噬菌体抗体库中筛选抗GPⅡb/Ⅲa单链抗体
2011年
目的从scFv噬菌体库中获取人源化特异性Anti—GPⅡb/Ⅲa单克隆scFv抗体。方法对Tomlinson I+JscFv文库进行3次淘洗,富集特异性的抗GPⅡb/Ⅲa抗体。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和双脱氧终止法基因测序及同源性对比,检测出人源化的抗GPⅡb/Ⅲa单克隆抗体。结果在3次淘洗后,得到了抗GPⅡb/Ⅲa单克隆噬菌体抗体,阳性克隆的获取率在95.6%以上;ELISA和基因测序筛选出25种不同的全长抗GPⅡb/Ⅲa噬菌体抗体,这些基因序列与人免疫球蛋白可变区基因同源性达到89%以上;分泌性抗体ELISA检测提示这些抗体顺利表达了蛋白并特异性结合GPⅡb/Ⅲa,其中15种scFv对GPIIb/ma有更强的阳性反应。结论人源化的特异性抗-GPⅡb/Ⅲa scFv能通过噬菌体展示技术快速有效地获得。
夏红利
谭最
陈德杰
乔建国
邱仁峰
关键词:
噬菌体展示技术
从scFv噬菌体库分离特异性的人源化抗D-dimer抗体
被引量:1
2011年
目的 从scFv(单链Fv)噬菌体抗体库分离出对D-dimer有特异性的人源化单克隆scFv.方法 对Tomlinson scFv噬菌体文库进行3轮淘洗,富集特异性的抗D-dimer抗体并进行ELISA 验证.通过酶联免疫检测和双脱氧终止法基因测序,获取特异性的人源化单克隆抗体.结果 3轮淘洗选择出38个抗D-dimer噬菌体抗体,酶联免疫和基因测序分析后,20个不同的全长单克隆抗D-dimer scFv噬菌体抗体被筛选出来,3轮选择后阳性克隆获取率为100% 分泌性抗体ELISA结果显示单克隆anti-D-dimer噬菌体顺利表达了抗体蛋白 5个A450值较高的单克隆中,3个显示了对D-dimer的高特异性和亲和力.结论 抗体噬菌体展示技术是分离获取人源化特异性anti-D-dimer抗体的高效快速方法.
夏红利
谭最
陈德杰
乔建国
邱仁峰
关键词:
噬菌体展示技术筛选
噬菌体展示技术筛选
噬菌体展示技术
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