江苏省科技厅基金(BM2008151)
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
- 相关作者：李瑛崔毓桂刘嘉茵马翔高莉更多>>
- 相关机构：江苏省计划生育科学技术研究所江苏省人民医院东南大学更多>>
- 发文基金：江苏省科技厅基金江苏省医学重点学科基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 双酚A对人子宫内膜基质细胞增殖及雌/雄激素受体表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察双酚A对人子宫内膜基质细胞(hESCs)增殖和雌/雄激素受体(ERα/AR)表达的影响。方法体外培养hESCs,在6孔板贴壁达70%～80%后鉴定细胞纯度。采用无血清培养同步化,然后给予不同浓度的双酚A(0、10-8、10-6、10-4mol/L)处理48 h。Trizol裂解细胞提取总RNA,实时荧光定量PCR法测定基质细胞ERα和AR mRNA表达水平;采用流式细胞技术测定细胞周期。结果本文纯化培养方法得到的hESCs,波形蛋白染色阳性率达95%。10-6、10-4mol/L的双酚A对基质细胞增殖周期有抑制作用。10-4mol/L的双酚A使基质细胞ERαmRNA表达显著升高(P<0.05);10-6、10-4mol/L的双酚A也显著升高AR mRNA的表达水平(P<0.05);但是,10-8mol/L的双酚A则有抑制ERα/AR mRNA表达的趋势(P>0.05)。结论低剂量双酚A抑制人子宫内膜ERα/AR表达,而高浓度双酚A则升高ERα/AR表达,进而影响子宫内膜的功能。
- 秦定霞李瑛刘晓慧钱晓乔蔡瑞芬崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：双酚A雌激素受体Α雄激素受体
- 人SET基因小分子干扰RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：7
- 2010年
- 目的SET基因表达产物是SET／TAF-1β蛋白，功能涉及基因表达调控、染色质修饰、翻译后修饰等生物过程，多水平、多通路地调节靶因子，其表达异常与多种疾病相关。为研究SET基因与临床多种疾病发生发展的关系，文中构建表达人SET基因的小分子干扰RNA（siRNA）重组腺病毒载体。方法根据siRNA靶序列设计并合成2条互补的64 bp寡核苷酸。pShuttle-H1穿梭质粒经BglⅡ、HindⅢ双酶切后，与退火的寡核苷酸连接，构建穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA。该穿梭质粒经Not Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后与pAdTrack-CMV连接，构建含有绿色荧光蛋白（green fluorescense protein，GFP）报告基因的穿梭质粒PATC—H1-siRNA。分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1和穿梭质粒PATC—H1-siRNA转化至BJ-5183感受态细菌中进行同源重组。Pac Ⅰ酶切线性化重组质粒pAd—H1-siRNA后，转染AD293细胞进行病毒包装和扩增。根据GFP报告基因的表达观察重组病毒的产生和感染效率，用Western blot检测人SET蛋白的表达水平。结果穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA经双酶切和测序证实构建成功；重组腺病毒载体经AD293细胞包装后可观察到GFP表达；获得的重组腺病毒载体感染AD293细胞。经Western blot检测，SET基因腺病毒载体（AdH1-SiRNA／SET）感染组与未感染腺病毒载体组（空白对照）和感染对照腺病毒载体组（AdH1-SiRNA／NS）相比，SET蛋白表达水平显著降低（P〈0．05），抑制效率为50％～70％。结论成功构建了表达人SET基因的siRNA重组腺病毒载体AdH1-siRNA／SET，并在AD293细胞中验证其抑制SET蛋白表达的作用，为进一步研究SET基因参与多种疾病的发生发展提供了材料。
- 许波群李瑛薛凯李梅马翔刁飞扬崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：RNA干扰重组腺病毒载体
- 子宫内膜异位症不育患者腹腔镜术后不同治疗方法预后比较被引量：9
- 2010年
- 目的回顾性比较分析子宫内膜异位症(内异症)不育患者腹腔镜术后不同治疗方法的预后。方法 1997年7月至2007年12月在江苏省人民医院因不育经腹腔镜检查证实为内异症的患者179例,男方精液异常者不包括在内。轻型Ⅰ、Ⅱ期患者分为A组62例辅助生育治疗(ART组),其中行官腔内人工授精(IUI)治疗17例、体外受精(IVF)45例,B组35例期待治疗(NART组)两组;重症型Ⅲ、Ⅳ期患者分为C组55例ART组,其中IUI17例、IVF38例,D组27例NART组两组。根据输卵管通畅情况、患者年龄、不孕年限、内异症分期及评分将双侧通畅组、单侧通畅组分别行NART、ART治疗的患者进行配对比较,进行随访,随访时间截止2008年4月,将随访结果进行统计分析。结果 A、B、C、D组累计妊娠率分别为56.5%、45.7%、45.5%、44.4%,各组之间累计妊娠率无明显差异。术后妊娠88例,其中术后1年内妊娠者84例;1年后妊娠者仅为4例(P<0.001)。术后各组的复发率分别为4.8%、11.4%、29.1%和33.3%,A与B组间、C与D组间复发率无明显差异,但C、D组较A、B组复发率明显升高(P<0.05)。双侧输卵管通畅分别行NART、ART的配对组的比较中,轻症内异症行ART或期待疗法的妊娠率无明显差异,而重症内异症行ART较期待治疗妊娠率明显升高(P<0.05)。结论对于轻症内异症,术后采取ART与NART妊娠率无明显差异,但重症内异症术后行ART是一种更积极的获得妊娠的方法。内异症术后复发率与手术的分期密切相关,重症内异症复发率更高。
- 朱丽娟冒韵东高彦丁卫王媁马翔刁飞扬黄洁杨乃明刘嘉茵
- 关键词：子宫内膜异位症不育症妊娠率
- 胰岛素基因可变重复序列多态性与PCOS的相关性被引量：10
- 2010年
- 目的:探讨胰岛素基因可变重复序列(INS-VNTR)多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)易感性之间的关系及其与PCOS发生胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法:用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术,检测130例PCOS患者(PCOS组)和130例非PCOS妇女(对照组)的INS-VNTR多态性。结果:2组的Ⅰ/Ⅰ、Ⅰ/Ⅲ和Ⅲ/Ⅲ基因型频率分布差别无统计学意义(P=0.196),经Logistic回归分析,Ⅲ/Ⅲ基因型并没有增加PCOS发病的危险性(OR=6.25,95%CI:0.74～52.79)。PCOS胰岛素抵抗亚组(PCOS-IR组,88例)相应位点的INS-VNTR基因型频率及等位基因频率均高于PCOS非胰岛素抵抗亚组(PCOS-NIR组,42例,P<0.05);PCOS患者中Ⅲ/Ⅲ基因型者的INS、IR状态高于Ⅰ/Ⅰ基因型者。结论:VNTR可能不是PCOS发病的易感基因,但是Ⅲ型INS-VNTR可能使PCOS患者发生IR的危险性增加。
- 张琴芬韩素萍崔毓桂李瑛马翔高莉冒韵东刘嘉茵
- 关键词：胰岛素多态现象胰岛素抗药性限制性片段长度串联重复序列
