国家重点基础研究发展计划(2002CB513104)
- 作品数：10 被引量：86H指数：6
- 相关作者：顾健人覃文新李锦军万晓桢姚根富更多>>
- 相关机构：上海交通大学复旦大学上海医学院广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 蛋白质棕榈酰化修饰及其研究方法被引量：2
- 2008年
- 蛋白质棕榈酰化是蛋白质翻译后脂质共价修饰的一种重要形式,对象主要是胞质蛋白质,对蛋白质功能产生多重影响。近年来由于相关新技术引入,对蛋白质棕榈酰化主要修饰酶及其对靶蛋白功能调节方面的研究已渐成为新热点。本文主要对近几年来蛋白质棕榈酰化修饰及其研究方法作了综述。
- 秦静于士颜李锦军
- 肝癌细胞中WIF-1的甲基化状态分析被引量：3
- 2007年
- 目的探讨WIF-1基因在肝癌细胞中的甲基化状态及其与蛋白表达的关系,并初步研究了WIF-1与肝癌发生发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)和测序方法分析了9种肝癌细胞系中WIF-1启动子区的甲基化状态,用RT-PCR检测了其mRNA的表达。用去甲基化药物5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理肝癌细胞株并分析其mRNA和蛋白的表达的变化。结果6种肝癌细胞中检测到异常的甲基化,甲基化率为66.7%。在用5-Aza-CdR处理细胞后,WIF-1表达缺失的肝癌细胞系不同程度地恢复了表达。MTT法分析发现WIF-1对SMMC-7721(7721)细胞生长有较为显著的抑制效果。结论推断WIF-1启动子区频繁甲基化的现象可能是它在肝癌中表达沉默的主要机制,并在肝癌的发生发展起作用。
- 程勤金洁于彬万晓桢游海燕舒惠群姚根富覃文新
- 关键词：WNT信号通路WIF-1DNA甲基化肝癌
- LASS2基因抑制HCCLM3肝癌细胞的转移被引量：20
- 2007年
- 目的:探讨LASS2基因对HCCLM3肝癌细胞转移的影响。方法:Northern blot分析高转移潜能肝癌细胞系HCCLM3和低转移潜能肝癌细胞系MHCC97-L中LASS2基因的mRNA水平。构建包含LASS2基因编码框的真核表达载体pCMV-HA2-LASS2,通过脂质体转染HCCLM3细胞,经G418筛选,建立稳定表达LASS2基因的HCCLM3细胞株。通过分析LASS2在HCCLM3中过表达后,HCCLM3细胞在迁移、侵袭等转移能力上的改变,Western blot、明胶酶谱及原位酶谱分析MMP-2合成、分泌、激活的变化。结果:Northern blot显示,HCCLM3细胞中LASS2基因的表达水平低于MHCC97-L细胞。当LASS2基因过表达后,HCCLM3细胞的迁移及侵袭能力受到显著抑制(P<0.001),虽然细胞内MMP-2的合成未改变,但细胞MMP-2的分泌及MMP-2的激活均受抑制。结论:LASS2基因可下调MMP-2的分泌及激活,可使肝癌细胞HCCLM3的转移能力受到明显抑制,提示LASS2基因对肝癌细胞HCCLM3的转移具有抑制作用。
- 谭宁覃文新万晓桢余艳军王植柔顾健人
- 靶向肿瘤酸性微环境的抗肿瘤新策略被引量：12
- 2008年
- 越来越多的体内体外实验及临床检测都证明了肿瘤酸性微环境对肿瘤的发生、发展和迁移起着重要作用。在肿瘤酸性微环境的重要调节因子中,V型ATP酶(V-ATPases)的作用至关重要。这些蛋白能将离子泵出膜外,在正常细胞和肿瘤细胞中都有着多种功能。本文回顾和总结了该领域的最新研究成果:在异种移植人肿瘤细胞的动物模型中,体内实验显示,采用小分子干扰RNA(siRNA)可抑制V-ATPases的功能,加入药物性质子泵抑制剂可显著地抑制人肿瘤细胞的生长。这些结果提示V- ATPases可作为癌症治疗中一个重要的新选择靶标。
- 沈秋瑾覃文新
- 关键词：质子泵抑制剂细胞外基质抗肿瘤药物
- 人肝癌中SLIT2基因表达及启动子甲基化分析
- 2007年
- 目的研究SLIT2在肝癌组织中表达和沉默的机制。方法32个肝癌病人的癌组织及癌旁肝组织、3例正常肝组织及8个肝癌细胞系样本DNA和RNA抽提后,半定量RT-PCR检测SLIT2的表达。亚硫酸氢钠处理DNA,用MSP和测序法检测SLIT2启动子甲基化状态。结果SLIT2启动子在肝癌组织中的甲基化率为84.3%,在相对应的癌旁肝组织中甲基化率为56.3%。肝癌细胞系的甲基化率为75%。而在正常肝组织中无甲基化。SLIT2启动子甲基化与肝癌的临床病理指标无相关性,但和患者的年龄有关。在用甲基化酶抑制剂5-aza-dC处理细胞后,SLIT2表达缺失的肝癌细胞系恢复了mRNA的表达。结论SLIT2启动子甲基化是肝癌发生过程中的早期事件,可能是SLIT2在肝癌中表达沉默的主要机制。
- 金洁游海燕余艳军黄明辉舒惠群姚根富杨胜利覃文新
- 关键词：肝癌SLIT2DNA甲基化抑癌基因
- ANGPTL4基因及缺失突变体对肝癌细胞生长的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨ANGPTL4基因及其缺失突变体对肝癌细胞SMMC-7721生长的影响。方法:构建ANGPTL4基因全长及其功能结构域缺失突变体的融合表达载体,即ANGPTL4-GFP-N1、ANGPTL4-del1-GFP-N1、ANGPTL4-del2-GFP-N1、ANGPTL4-del3-GFP-N1,脂质体法将EGFP-N1空载体、ANGPTL4基因及其缺失突变体分别转染肝癌细胞SMMC-7721,G418筛选,建立稳定细胞系,用MTT试验法、细胞集落形成试验检测细胞体外生长活性和增殖能力;流式细胞仪检测ANGPTL4基因对细胞凋亡的影响;裸鼠移植瘤试验检测转染细胞的体内成瘤特性。结果:ANGPTL4基因及其缺失突变体体外对肝癌细胞SMMC-7721的生长、集落形成具有明显的抑制作用(均为P<0.01);ANGPTL4全长基因及其缺失突变体ANGPTL4-del1-GFP-N1和ANGPTL4-del2-GFP-N1均对SMMC-7721细胞体内成瘤有明显抑制作用(均为P<0.01)。但转染ANGPTL4全长基因及其缺失突变体的SMMC-7721细胞的细胞凋亡发生率与转染空载体组相比没有明显差别(均为P>0.05)。结论:ANGPTL4基因及其缺失突变体对肝癌SMMC-7721细胞体内、外生长均具有明显抑制作用,但该抑制作用不是通过促进细胞凋亡实现的。
- 王春艳李锦军张锋锐葛超万大方顾健人
- 关键词：肝细胞癌突变SMMC-7721细胞
- CTHRC1基因在人肝癌中高表达并促进MHCC97L肝癌细胞的转移被引量：9
- 2007年
- 目的:分析CTHRC1基因在人肝癌组织和肝癌细胞株中的表达情况及其对MHCC97L肝癌细胞转移能力的影响。方法:采用northern blot、RT-PCR和荧光定量PCR分析人肝癌组织和肝癌细胞株中CTHRC1 mRNA水平。构建包含CTHRC1基因编码框的真核表达载体pCMV-3Tag-CTHRC1,通过体外实验分析CTHRC1在MHCC97L细胞中过表达对MHCC97L细胞迁移、侵袭等转移能力的影响。结果:Northern blot、RT-PCR和荧光定量PCR结果显示,14例肝癌患者中11例存在癌组织CTHRCI mRNA表达水平高于癌旁组织,8种肝癌细胞株中5种肝癌细胞株存在着CTHRC1的高表达。当CTHRC1过表达后,MHCC97L细胞的迁移及侵袭能力显著增强(P<0.001)。结论:CTHRC1基因在人肝癌组织和人肝癌细胞株中存在着高表达,同时该基因可使肝癌细胞MHCC97L的转移能力明显增强,提示CTHRC1基因可能在肿瘤转移中起重要作用。
- 万晓桢覃文新谭宁姚根富谭玉婷况文祥顾健人
- 关键词：肿瘤转移基因表达细胞运动
- 受体酪氨酸激酶c-kit及其配体SCF在正常肝及肝癌组织中的共表达被引量：6
- 2006年
- 目的:观察受体酪氨酸激酶ckit及其配体干细胞因子(stemcellfactor,SCF)在人正常肝、肝硬化、癌旁肝及肝癌组织中的共表达。方法:用免疫组化/免疫荧光染色方法和组织芯片检测受体酪氨酸激酶ckit及其配体在166例肝癌和配对癌旁肝、16例肝硬化及10例正常肝组织中的表达差异及其共表达状况。结果:免疫组化检测ckit在肝癌、癌旁肝、硬化肝和正常肝组织中的阳性率分别为47.59%,95.78%,93.75%和100%,其中强阳性(≥++)率分别为27.71%,77.71%,87.53%和100%,ckit蛋白在肝癌组织中明显低表达;而SCF在肝癌、癌旁肝、硬化肝和正常肝组织中的阳性率分别为68.07%,100%,100%和100%,其中强阳性(≥++)率分别为35.54%,94.58%,93.75%和100%,SCF在肝癌组织中也呈现低表达;但SCF在各种组织中的表达均高于ckit。免疫荧光检测受体酪氨酸激酶ckit及其配体SCF在各种组织中均有不同程度的共表达,且均定位于肝癌细胞和肝细胞的细胞质中,其中在肝癌、癌旁肝、硬化肝和正常肝组织中的共表达率分别为51.20%,100%,100%和100%,而肝癌组织的强阳性共表达(≥++)率仅为25.30%,其他组织均高于95%。结论:与正常肝、硬化肝、癌旁肝组织相比,肝癌组织中ckit和SCF均呈低表达,但SCF在相应组织中的表达稍高于ckit;正常肝、硬化肝、癌旁肝组织中ckit/SCF共表达远高于肝癌组织。
- 殷胜勇胡晨李锦军葛超郑树森顾健人
- 关键词：干细胞因子
- 癌干细胞研究进展被引量：26
- 2006年
- 关于肿瘤发生及发展的机制人们已探索多年,但由于肿瘤病因本身的复杂性、研究技术和知识积累不足等各种原因,研究进展缓慢。近些年来,癌干细胞的发现、确认和特性研究为肿瘤发病机制的揭示,乃至新型高效治疗策略的制定提出了新线索。许多研究成果显示,癌干细胞因具有自我更新和潜在的强增殖能力,在肿瘤发生发展、复发转移中均发挥着很重要的作用;肿瘤化疗的失败与肿瘤组织中癌干细胞的耐药性可能存在密切关系。本文就癌干细胞在这方面的研究进展及存在的问题作一综述。
- 李锦军顾健人
- 关键词：干细胞癌干细胞自我更新耐药性肿瘤发生
- DLK1在干细胞和肿瘤中的作用被引量：6
- 2006年
- DLK1是EGF家族成员之一,是一个父源表达母源沉默的印记基因产物,其表达受等位基因差异性甲基化区(DMR)的调控。Dlk1是细胞分化的重要调节基因,可抑制脂肪前体细胞向脂肪细胞分化。DLK1通过和Notch1相互作用,在Notch通路中起负调控作用。DLK1在肝干细胞中表达,提示可以作为肝干细胞分离的标记物。此外,DLK1在多种分泌性肿瘤细胞中高表达,提示DLK1可能与这些肿瘤的形成密切相关。
- 于峰李锦军
- 关键词：DLK1干细胞肿瘤
