国家自然科学基金(30170945) 作品数:32 被引量:306 H指数:9 相关作者: 杨述华 杨操 李进 王锐英 叶哲伟 更多>> 相关机构: 华中科技大学 中国辐射防护研究院 贵阳医学院附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科学技术基金 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中血管内皮生长因子的表达及分析 被引量:20 2006年 傅德皓 杨述华 邵增务 李鲲 宁旭 袁永辉关键词:骨形态发生蛋白-2 成骨过程 成纤维细胞生长因子 骨生长因子 诱导成骨 Vertebral plate regeneration induced by radiation-sterilized allogeneic bone sheets in sheep 被引量:7 2007年 唐欣 杨述华 许伟华 李进 杨操 叶哲伟 傅德皓 李鲲 李宝兴 孙世荃 余从年关键词:椎板切除术 关节疾病 椎板成形术 数字减影血管造影评价股骨头坏死模型 被引量:7 2007年 目的:用数字减影血管造影评价骨膜剥离加髓腔破坏法建立股骨头坏死动物模型的效果。方法:实验于2005-07/2006-01在武汉协和医院中心试验室完成。随机选用成年杂种狗12只,采用骨膜剥离加髓腔破坏法破坏实验动物左侧股骨头的血供,制造股骨头坏死模型,对侧为正常对照。分别于术后1,4,8,16周获取股骨头标本(每个时间点3只动物),制备病理切片进行苏木精-伊红染色观察组织学情况。实验第4周及第16周麻醉后MRI扫描观察股骨头坏死情况。实验动物术前及处死前麻醉后股动脉数字减影血管造影技术检测,比较手术前后股骨头局部的血液循环变化。结果:12只杂种狗均进入结果分析。①病理切片证实全部实验侧标本均出现不同程度股骨头坏死表现,且第16周股骨头标本呈轻度塌陷外观。②狗正常股骨头T1,T2像表现为中低信号影;实验第4周时,造模侧股骨头内表现出散在高信号;第16周时,这些高信号影进一步加大,头下区小片中低信号区。③数字减影血管造影图像显示手术后16周手术区局部出现多量新生血管从股骨颈、髓内等处再生长入有坏死的股骨头内的征象。结论:骨膜剥离加髓腔破坏法能成功建立股骨头坏死模型,且在该模型中存在坏死和重建并存的现象,符合股骨头坏死的病理变化,是一种比较理想的造模方式。 王锐英 毛小军 张其亮 杨述华关键词:股骨头坏死 动物模型 数字减影血管造影 骨膜剥离加髓腔破坏建立股骨头坏死模型的可行性研究 被引量:3 2005年 目的探讨骨膜剥离加髓腔破坏建立股骨头坏死(ONFH)动物模型的可行性.方法成年杂种狗12只(13~17kg),手术剥离其左侧股骨近端约4cm范围内的全部骨膜及周围组织,并于股骨颈中下1/3处用直径1mm的钻头钻孔,破坏此处髓腔松质骨成分,皮质骨保持完整;右侧做正常对照.采用股动脉数字减影血管造影(DSA)技术检测、比较手术前后股骨头局部的血液循环变化,并分别于术后1、4、8和16周获取股骨头标本,行病理切片检查.结果术后DSA图像显示髋关节局部出现多量新生血管由股骨颈、髓内等处再生进入有坏死改变的股骨头内.四组实验侧股骨头均出现不同程度ONFH表现,第16周股骨头标本示轮廓改变,轻度塌陷外观.结论骨膜剥离加髓腔破坏法能成功建立ONFH模型,可用于ONFH的发生、发展机制及治疗的研究. 王锐英 杨述华 马德彰 杨操关键词:股骨头坏死 塌陷 数字减影血管造影 转染血管内皮生长因子165基因的狗骨髓基质细胞超微结构变化及成骨能力 2006年 目的:探讨转染血管内皮生长因子165基因的狗骨髓基质细胞体外生物学特性。方法:实验于2002-05/2005-06在华中科技大学同济医学院协和医院骨科完成。实验分为血管内皮生长因子基因转染组与对照组。从3只成人杂交犬髂骨取骨髓进行骨髓基质细胞分离培养,将重组的血管内皮生长因子165基因用脂质体介导转染狗骨髓基质细胞,用反转录聚合酶链反应方法检测血管内皮生长因子的表达;通过四唑盐、对硝基苯磷酸盐检测细胞增殖与碱性磷酸酶的活性;考马斯亮蓝法检测蛋白质含量;透射电镜观察细胞超微结构。结果:①重组质粒pcDNA3-人血管内皮生长因子165转染骨髓基质细胞后第7,14天,反转录聚合酶链反应方法检测有血管内皮生长因子mRNA表达。②骨髓基质细胞转染基因后,细胞的增殖能力无明显影响。③培养后第6,8,10,12天,转染血管内皮生长因子基因骨髓基质细胞与对照组细胞比较,碱性磷酸酶活性增高,蛋白质合成增多[转染组碱性磷酸酶为(428.09±26.67),(565.11±24.17),(562.94±39.17),(596.45±30.17)nkat,对照组碱性磷酸酶为(363.57±20.67),(536.44±11.42),(537.11±26.83),(548.10±22.34)nkat;转染组细胞蛋白合成为1.41±0.23,1.46±0.24,1.59±0.33,1.74±0.26;对照组细胞蛋白合成为0.82±0.11,0.83±0.09,0.85±0.06,0.91±0.09]。④透射电镜可见转基因细胞内质网增多,线粒体致密,而糖原溶解与脂肪空泡则减少。结论:血管内皮生长因子基因转染可促进骨髓基质细胞的成骨分化。 刘日光 杨述华 刘建湘 易诚青关键词:血管内皮生长因子 基因 骨髓 血管内皮生长因子基因稳定转染兔骨髓基质干细胞的研究 被引量:3 2009年 目的检测人血管内皮生长因子(VEGF)基因稳定转染对兔骨髓基质干细胞(BM—SC)VEGF表达的影响。方法分离并培养兔骨髓基质干细胞,利用脂质体介导pcDNA3.1-VEGF165转染兔BMSC,G418筛选稳定表达pcDNA3.1-VEGF165的细胞克隆,RT—PCR、Westernblot法检测转染前后细胞中VEGFl65mRNA和蛋白的表达。结果通过筛选获得了稳定表达pcDNA3.1-VEGF165的细胞克隆。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot结果显示:稳定转染组BMSC中可检测到VEGF165mRNA和蛋白的表达,空白和空载体组未见VEGF表达。结论pcDNA3.1-VEGF165载体转染的兔BMSC可稳定表达外源性VEGF165mRNA和蛋白,可作为治疗骨缺损和骨缺血性坏死研究的种子细胞。 马德彰 张其亮 王锐英 傅德皓 杨述华关键词:骨髓基质干细胞 血管内皮生长因子 转染 同种异体骨支撑架结合自体骨和DBM治疗股骨头坏死的生物力学研究 被引量:11 2007年 [目的]研究同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM)植入治疗股骨头坏死生物力学变化。[方法]建立羊双侧股骨头坏死模型,4周后分为4组:单纯行髓芯减压组(A组)、髓芯减压后植入自体松质骨和OSTEOSET(2DBM组(B组)、髓芯减压后植入同种异体骨支撑架/自体松质骨OSTEOSE(2DBM组(C组)和正常对照组。术后分别于5、10、20周对股骨头行影像学、组织学观察和生物力学测定。[结果]影像学和组织学检查结果显示C组在髓芯减压区骨缺损修复及成骨方面较B组略高,B、C两组都较同时期的A组明显增强。生物力学测试结果表明,术后5、10、20周时C组力学强度较A、B两组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),在10、20周时C组股骨头生物力学强度和正常股骨头己无明显差异。[结论]应用同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质治疗股骨头坏死,能有效加强股骨头的力学结构,促进坏死骨的修复,防止股骨头关节面的塌陷。 梅荣成 杨述华 杨操 李宝兴 苏成忠 李进 邹利军 徐亮 郑东 汪岚关键词:股骨头坏死 自体骨 脱钙骨基质 生物力学 钛合金支撑架植入治疗股骨头缺血性坏死的动物实验研究 被引量:9 2007年 [目的]通过动物模型,观察支撑架置入治疗狗股骨头缺血性坏死的疗效。[方法]本研究设计一种中空多孔圆柱状带螺纹的钛合金支撑架,选用成年杂种狗15只,用液氮冷冻法制造股骨头坏死模型,通过中心减压钻隧道至股骨头坏死区软骨下骨,然后沿隧道拧入支撑架。术后分期处死,取标本观察相关指标。[结果]术后无1例发生股骨头塌陷,X线片显示支撑架位置良好,组织学观察显示术后坏死股骨头得以逐步重建,再生的松质骨小梁能够长入支撑架中并改建、修复、替代股骨头内坏死的骨组织,形成穿越支撑架网孔的网状松质骨结构。[结论]利用多孔中空支撑架给股骨头坏死区软骨下骨板提供支撑,防止股骨头塌陷。多孔网状结构容许松质骨的长入和爬行替代,对治疗狗股骨头坏死有明显疗效。提示钛合金支撑架可用于股骨头坏死的治疗。 王锐英 张其亮 傅德皓 吴强 杨述华 孙元关键词:股骨头缺血性坏死 合金 支撑架 细胞因子与椎间盘退行性变的关系 被引量:35 2003年 在椎间盘退行性变过程中,细胞因子如白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等发挥着重要的作用。IL-1、TNF-α可以诱导基质金属蛋白酶(MMPs)的高水平表达,抑制金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的合成,从两方面加重椎间盘退行性变。相反,IL-6则促进TIMPs合成。转化生长因子β1(TGF-β1)与bFGF有协同作用,在椎间盘退行性变早期,促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖的合成,可使早期椎间盘退行性变程度减轻;但在椎间盘退行性变的晚期,由于成纤维细胞数量增加,受TGF-βl与bFGF刺激产生大量Ⅰ、Ⅲ型胶原,从而加重了椎间盘退行性变。此外,细胞因子与椎间盘内外炎症反应关系密切。IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α等炎性细胞因子具有明显的致痛觉过敏作用,它们极有可能参与盘源性腰腿痛和神经根痛的发生过程。IL-l的刺激还可能是脊神经根失能的原因之一。 李进 杨述华 邵增务关键词:细胞因子 椎间盘退行性变 白细胞介素-1 白细胞介素-6 腰腿痛 神经根痛 低氧对人骨髓间充质干细胞HIF-1α、SDF-1、VEGF mRNA表达的影响 被引量:4 2008年 目的观察低氧对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法分别在1%O2及20%O2条件下培养hBMSCs,定量RT-PCR技术检测其HIF-1α、SDF-1及VEGF mRNA。结果在1%O2条件下,hBMSCs的HIF-1α、SDF-1、VEGF mRNA表达水平明显增高(P<0.01)。HIF-1αmRNA与SDF-1 mRNA及VEGF mRNA的表达密切相关(r分别为0.488、0.644,P均<0.01),但SDF-1 mRNA与VEGF mRNA的表达无明显关系(r=0.077,P>0.05)。结论低氧可促进hBMSCs的HIF-1α表达,并使SDF-1、VEGF mRNA表达增加。 王庆德 杨述华 杨操 胡勇 赵继军 张景辉关键词:骨髓间充质干细胞 缺氧 缺氧诱导因子 血管内皮细胞生长因子