国家自然科学基金(30271472)
- 作品数：10 被引量：46H指数：4
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- 有丝分裂前期检查点Chfr基因作用的研究进展被引量：3
- 2004年
- 细胞在长期进化过程中发展出了一套保证细胞周期中DNA复制和染色体分配质量的检查机制 ,通常被称为细胞周期检查点 (checkpoint)。有丝分裂前期检查点Chfr(checkpointwithFHAandringfinger)蛋白在正常组织中广泛表达 ,其结构和功能都十分保守 ,许多研究表明Chfr在细胞分裂过程中发挥着重要作用 ,细胞分裂存在有丝分裂应激时 ,Chfr通路激活引起Plk1的泛素化并降解 ,控制Cdc2激酶的活性 ,延迟染色体凝集和中心体分离 ,阻止细胞于有丝分裂前期 ,它的表达增强细胞对应激的生存能力。本文对Chfr基因的结构 ,Chfr蛋白质的作用和功能研究进展作一综述。
- 龚辉
- 关键词：检查点CHFR基因细胞周期
- HL-60及其耐药细胞之间线粒体膜及线粒体中Bid差异研究被引量：2
- 2005年
- 目的 研究线粒体膜及线粒体中Bid参与肿瘤耐药的机制。方法 采用紫外分光光度仪和流式细胞仪检测Ca2+ 诱导下HL- 60及其耐药细胞HL -60/E6线粒体膜通透改变孔道开放和线粒体膜电位的变化,Western blot检测线粒体中Bid表达。结果 Ca2+诱导下HL- 60/E6 细胞线粒体膜电位下降幅度和膜通透改变孔道开放程度明显低于HL -60 细胞。药物AMD作用后线粒体中Bid表达呈时间依赖性,而且在不同时间,HL- 60/E6 细胞线粒体中Bid表达均明显低于HL- 60 细胞。结论 HL -60/E6细胞耐药与Ca2+诱导下线粒体膜电位下降幅度及膜通透改变孔道开放程度的降低有关,还与线粒体上Bid表达降低有关。
- 黄伟张瑶珍李登举周剑锋
- 关键词：线粒体膜电位
- Chfr基因在急性白血病骨髓细胞中表达的研究被引量：2
- 2006年
- 为了探讨急性白血病(AL)患者骨髓细胞中有丝分裂早期检查点Chfr基因的表达及其意义,对46例初诊未治疗的AL患者骨髓单个核细胞,用RT-PCR和免疫组织化学的方法检测Chfr基因mRNA及蛋白的表达,并与正常人骨髓单个核细胞进行对照。结果表明:免疫组织化学和RT-PCR分析显示,28例急性髓细胞白血病(AML)中的15例,18例急性淋巴细胞白血病(ALL)中的13例骨髓单个核细胞Chfr基因mRNA和蛋白的表达与正常对照相比显著下降,同时Chfr基因表达异常病例染色体检查存在核型异常。结论:急性白血病骨髓细胞有丝分裂检查点Chfr基因表达受损,可能在白血病发病中具有重要作用。
- 龚辉刘文励周剑峰冉丹徐慧珍
- 关键词：急性白血病CHFR基因骨髓细胞
- 急性白血病患者骨髓细胞CHFR基因表达及其临床意义被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨成人急性白血病(AL)患者骨髓细胞中有丝分裂早期稽查点CHFR基因的。方法 采用流式细胞术检测HL 60细胞的细胞周期,逆转录聚合酶链反应对65例初治(45例)及复发(20例)的AL患者进行CHFR基因mRNA水平的检测,对其中32例AL患者,用免疫印迹法检测CHFR蛋白表达水平。8名正常人作为对照。结果 (1)CHFR蛋白表达水平与S期细胞所占比例相关。(2) 60 .0% ( 27 /45 )的AL患者CHFR基因mRNA表达水平和40. 6% ( 13 /32)的AL患者CHFR的蛋白表达水平明显低于正常对照相。( 3 )复发组急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者的CHFR蛋白中位表达水平(0 .71)明显高于初治组(0 38),差异有统计学意义(t=2. 54,P=0. 017)。(4)CHFR的蛋白或mRNA高表达患者完全缓解率(分别为30. 2%, 42 .4% )明显低于CHFR蛋白或mRNA低表达患者(分别为88. 6%, 85. 4% ),差异有统计学意义(均P<0. 05 )。结论 在AL患者骨髓单个核细胞中CHFR基因高表达是一个耐药标志,是影响患者对化疗敏感性的因素,其低表达可能是AL患者对化疗敏感的指标之一。
- 龚辉刘文励周剑峰徐慧珍
- 关键词：骨髓细胞急性白血病患者基因MRNA表达成人急性白血病
- 长春新碱对K562细胞plk1和γ-微管蛋白表达影响的研究被引量：14
- 2005年
- 目的研究长春新碱对K562细胞周期及plk1和γ微管蛋白影响。方法分析长春新碱处理后K562细胞周期变化,检测长春新碱及plk1反义寡核苷酸处理后plk1andγ微管蛋白表达。结果长春新碱诱导K562细胞G2/M期阻滞。长春新碱影响plk1的聚集和γ微管蛋白形成中心体,plk1反义寡核苷酸同样可影响γ微管蛋白形成中心体。结论长春新碱诱导K562细胞G2/M期阻滞的机制可能是通过抑制plk1的聚集和γ微管蛋白形成中心体来实现的。
- 黄伟张瑶珍周剑锋刘文励
- 关键词：PLK1Γ-微管蛋白长春新碱K562
- 顺铂和阿霉素对K562细胞周期及凋亡影响的研究被引量：9
- 2005年
- 目的 :观察化疗药物顺铂 (DDP)和阿霉素 (ADM)对细胞周期及凋亡的影响。方法 :以不同剂量的药物处理细胞 ,用流式细胞仪检测处理后不同时间细胞周期变化。结果 :10 μmol/L的DDP作用 36h及 1 36 μmol/L的ADM作用 4 8h ,K5 6 2细胞以S期阻滞最明显。 2 0 μmol/L的DDP作用 2 4h出现G1期阻滞 ,0 17μmol/L的ADM作用下以G2 /M期阻滞为主。在 10 μmol/L的DDP和 1 36 μmol/L的ADM作用下 ,随作用时间延长 ,阻滞的细胞释放 ,部分进入凋亡导致凋亡增加。结论 :不同剂量的DDP或ADM作用不同时间导致不同的细胞周期检测点激活 ,从而使细胞周期变化呈现不同的规律。
- 黄伟张瑶珍周剑锋刘文励
- 关键词：K562细胞顺铂多柔比星细胞周期
- 用共聚焦显微镜研究plk1在秋水仙胺和长春新碱抗肿瘤效应中的作用
- 2005年
- 目的:研究plk1在秋水仙胺和长春新碱抗肿瘤效应中的作用。方法:采用Westernblotting和共聚焦显微镜检测秋水仙胺、长春新碱及plk1反义寡核苷酸(Asodn)处理对K5 6 2细胞plk1及γ微管蛋白表达的影响。结果:Westernblotting检测结果提示秋水仙胺和长春新碱不影响plk1和γ微管蛋白的表达量,但共聚焦显微镜观察发现秋水仙胺和长春新碱影响plk1在分裂期聚集和中心体形成。plk1Asodn处理不仅可明显降低plk1蛋白表达,而且影响γ微管蛋白聚合形成中心体。结论:秋水仙胺和长春新碱抗肿瘤效应可能是通过plk1介导的抑制γ微管蛋白聚合形成中心体来实现的,plk1具有作为肿瘤治疗靶点的可能性。
- 黄伟张瑶珍周剑锋刘文励
- 关键词：K562细胞长春新碱
- 细胞周期检测点激酶Chk1和Chk2在急性白血病骨髓单个核细胞中表达的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨细胞周期检测点激酶 1,2 (Chk1,2 )在急性白血病中表达的意义。方法 用RT PCR方法、免疫组织化学方法及共聚焦显微镜检测Chk1和Chk2的mRNA和蛋白在白血病细胞株K5 6 2及急性白血病骨髓单个核细胞中的表达。结果 Chk1和Chk2的mRNA水平在急性白血病与增生性贫血之间无显著差异 ,Chk1和Chk2在K5 6 2细胞及白血病骨髓单个核细胞的细胞质和细胞核中均有表达 ,Chk1蛋白在初治及骨髓幼稚细胞大于 30 %的复治白血病的骨髓单个核细胞中核表达显著增高 ,Chk2蛋白在白血病骨髓单个核细胞中核表达与增生性贫血相比无显著差异。结论 Chk1和Chk2的mRNA水平与白血病发生无关 ,但Chk1蛋白表达水平与白血病发生有一定的相关性 ,Chk1有作为白血病治疗靶点的可能性 ,Chk2蛋白表达水平与白血病发生无关。
- 周剑锋黄伟张瑶珍刘文励
- 关键词：细胞周期检测点激酶白血病骨髓单个核细胞RT-PCR
- Ch1/2对肿瘤细胞凋亡的调节作用被引量：3
- 2004年
- 目的:观察顺铂作用下K562细胞及白血病骨髓单个核细胞(BMMNC)的细胞周期变化和转染Chk1／2反义寡核 苷酸对顺铂诱导下K562细胞及白血病BMMNC凋亡的影响。方法:用流式细胞仪检测顺铂作用下。K562细胞及白血病 BMMNC的细胞周期变化。转染Chk1和Chk2反义寡核苷酸于K562细胞及白血病BMMNC,检测顺铂作用下转染细胞的凋亡 率。结果:10μmol／L顺铂作用下K562细胞和白血病BMMNC均出现S期阻滞,转染Chk1／2反义寡核苷酸可明显增加顺铂 诱导下K562细胞凋亡,转染Chk1反义寡核苷酸可明显增加顺铂诱导下白血病BMMNC的凋亡率,但转染Chk2反义寡核苷酸 未增加白血病BMMNC的凋亡率。结论:Chk1在肿瘤细胞凋亡中有重要调节作用,可作为肿瘤增敏治疗的有效靶点,Chk2在 肿瘤细胞凋亡中的作用需进一步研究。
- 黄伟张瑶珍周剑锋刘文励
- 关键词：K562细胞白血病CHK1CHK2凋亡
- HL-60细胞株经顺铂和电离辐射作用后细胞周期阻滞变化被引量：7
- 2006年
- 目的:观察HL-60细胞株经顺铂作用和60Co照射后其细胞周期阻滞的动态变化。方法:用60Co分别以6,10Gy的吸收剂量照射HL-60肿瘤细胞株,并于照射后6、12、24及60h测量其细胞周期变化,同样使用化疗药物顺铂分别以10μmol/L,20μmol/L浓度梯度作用HL-60细胞株,并于作用后4、8、12及24h测量其细胞周期变化。结果:HL-60细胞株在受到小剂量外界作用后,如6Gy60Co照射和10μmol/L顺铂作用,表现有G2/M期崩溃现象,而在大剂量外界作用后,如10Gy60Co照射和20μmol/L顺铂作用,未表现G2/M期崩溃现象,而是表现持续的细胞周期阻滞现象。结论:在一定范围的外界剂量作用下,HL-60细胞株的细胞周期阻滞现象即自我保护机制呈剂量依赖性增强。小剂量外界刺激可导致其凋亡增加,而大剂量反而使其表现较强的细胞周期阻滞现象。
- 汤屹奚玲周剑锋刘文励吴剑宏
- 关键词：细胞周期
