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米诺环素对大鼠原代神经元和海马脑片缺氧缺糖及NMDA损伤的保护作用被引量：9: 2004年; 目的 :建立神经元和海马脑片缺氧缺糖 ( OGD)及 N-甲基 - D-门冬氨酸 ( NMDA)损伤模型 ,观察抗炎药米诺环素的神经元保护作用及其特点。方法 :体外培养大鼠脑皮层神经元 ,以 OGD和 NMDA( 5 0μmol/L)处理 ,观察损伤前后神经元形态变化 ,并以 MTT检测神经元活性 ;以透光法检测 OGD和 NMDA处理引起的大鼠海马脑片透光度 ( L T)改变 ;在上述模型中同时观察米诺环素及 NMDA受体拮抗剂 MK- 80 1的作用。结果 :在 OGD过程中米诺环素 1、10μmol/L能浓度依赖地提高神经元的活性 ,改善神经元形态改变 ;米诺环素 10、10 0μmol/L对NMDA损伤有保护作用 ;MK- 80 11μmol/L对两种损伤模型均有保护作用。米诺环素 1或 10μmol/L对 OGD和NMDA引起的海马脑片 LT增加无明显影响 ;MK- 80 11μmol/L则能显著抑制 LT增加。结论 :米诺环素对神经元OGD损伤具有保护作用 ,可能是通过对 NMDA受体介导的兴奋性毒性的间接抑制 ;但对海马脑片 OGD和; 何巍魏尔清王梦令刘路英陈忠; 关键词：N-甲基-D-门冬氨酸透光度

黄芩苷对小鼠脑片和大鼠皮质神经元缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用被引量：7: 2006年; 目的在离体水平，探讨黄芩苷对缺氧缺糖／再灌注（OGD／RP）诱导的脑片及神经元损伤的保护作用及机制。方法小鼠离体脑片OGD／RP模型中，以2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TFC）产物白腊评价脑片活性；原代培养大鼠皮层神经元OGD／RP模型中，以噻唑蓝（MTT）还原和乳酸脱氢酶（IDH）活性测定神经元活性变化，用2，7一二氯荧光素二乙酸盐（DCF-DA）测定细胞内自由基水平。观察不同时间给予黄芩苷对损伤的保护作用。结果在脑片，全程给药和OGD时给予黄芩苷0.01—1μmol·L^-1，再灌注时给予黄芩苷0．1～1μmol·L^-1，可显著减轻损伤。在神经元，全程给予黄芩苷0．1～1μmol·L^-1可减轻神经元损伤，并降低神经元内自由基水平升高。结论黄芩苷对OGD／RP损伤有浓度依赖性保护作用，再灌注时给药亦有效，其作用至少部分与抗自由基有关。; 陈科达葛求富王梦令钱晓东魏尔清; 关键词：黄芩苷脑缺血脑片神经元

评价小鼠脑片缺血性损伤及药物保护作用定量方法的改进被引量：6: 2003年; 目的 :通过改进和完善脑片孵育装置、脑片缺血性损伤的定量指标 ,建立一种简单、准确评价小鼠脑片缺血性损伤及药物神经保护作用的新方法。方法 :设计和制作脑片孵育装置 ,并验证其适用性。以 TTC为底物在小鼠脑片生物合成 formazan标准品 ,并作分离、纯化和鉴定。以缺氧缺糖 (OGD)方法诱导小鼠脑片损伤 ,用分光光度法在 4 90 nm处测量皮质和纹状体 formazan量 ,并观察依达拉奉和 ONO- 10 78的保护作用。结果 :脑片孵育装置具有良好的平行性和可操作性。获得了纯度为 99.3%的 formazan对照品 ,在 0 .0 5～ 1mg/ml间与 4 90 nm的吸收度有良好的线性关系 (r=0 .9997)。随 OGD时间延长 ,脑片皮质和纹状体 formazan量逐渐减少 ;依达拉奉对此有显著保护作用 ,而 ONO- 10 78无效。结论 :脑片孵育新装置及 formazan定量方法效率高、定量准确、简单易行 ,可用于缺血性脑损伤保护药物的筛选。; 葛求富魏尔清彭国平于丽芬; 关键词：脑缺血染色法缺氧缺糖依达拉奉

脑表面大体摄影评价小鼠局灶性脑缺血后脑水肿变化被引量：3: 2003年; 目的 :建立脑表面大体摄影评价小鼠局灶性脑缺血后脑水肿变化的新方法。方法 :采用大脑中动脉阻塞法诱导小鼠持续性局灶性脑缺血 ,于缺血后 10、30 m in,1、3、6、12、2 4 h取脑 ,用数码相机作脑顶面及侧面摄影 ;然后切成 6片 1m m厚的脑片进行摄影 ;最后 ,恒温烤干脑组织测定脑含水量。以 Med Brain- 2软件计算脑表面及脑片面积 ,评估脑水肿程度。结果 :脑表面摄影测定面积的方法显示小鼠局灶性缺血后 1h开始 ,缺血侧的脑面积明显增加 ,与脑含水量的结果一致。该方法测量脑水肿与脑含水量及脑片体积测量有较好的相关性。结论 :脑表面大体摄影法是客观、定量评价局灶性脑缺血后脑水肿变化方法的一种补充 ,具有简便、敏感、不需前处理等优点。; 徐慧敏魏尔清张世红朱朝阳余国良张琦储利胜; 关键词：脑缺血脑水肿大脑中动脉阻塞

图像分析定量测量脑片体积方法的改良被引量：11: 2003年; 目的 :改良计算机图像分析法测量大鼠和小鼠脑片的方法 ,并验证与经典方法的相关性以及在评价局灶性脑缺血中的应用。方法 :分别采用测重法、密度法精确测出大鼠、小鼠的脑片体积 ;以图像分析测定脑片面积 ,乘以校正后的脑片厚度 ,得到脑片两侧及左右侧体积数据 ;另对局灶性脑缺血小鼠脑片体积变化 ,以图像分析法测定左右侧脑体积。结果 :图像分析法对测量不同大小的面积有良好的线性 (r=1.0 0 0 ) ;脑片精确测量值 (密度法 )与图像分析测量值之间有良好的相关性 ,在大鼠 r=0 .80 9(n=4 5 ,P<0 .0 0 1) ,在小鼠 r=0 .84 4(n=74 ,P<0 .0 0 1) ;小鼠脑缺血 6、2 4 h后缺血侧体积明显增加。结论 :改良的计算机图像分析法可较为准确地反映脑片体积。; 梁泽华魏尔清朱朝阳张世红徐慧敏; 关键词：脑缺血脑片图像处理计算机辅助技术局灶性脑缺血小鼠

依达拉奉、米诺环素及ONO-1078对缺氧缺糖诱导大鼠海马脑片电生理改变的作用被引量：6: 2004年; 目的　建立离体海马脑片缺氧缺糖 (OGD)电生理变化模型 ,观察依达拉奉、米诺环素和ONO 10 78{pranlukast,4 氧 8 [对 (4 苯丁氧基 )苯甲酰氨基 ] 2 (5 四氮基 ) 4H 1 苯并吡喃半水化合物 }的神经保护作用。方法大鼠海马脑片以无氧无糖处理 ,记录脑片群峰电位 (PS) ,部分实验以TTC染色观察脑片活性。结果　OGD处理 4min为最佳损伤条件 ,1h后可恢复至基础水平的 (2 9± 6) %。自由基清除剂依达拉奉 (1和 10 μmol·L- 1)明显增强PS波的恢复 ;抗炎药米诺环素 (10 μmol·L- 1)和白三烯受体拮抗剂ONO 10 78(1μmol·L- 1)无显著恢复作用 ;阳性对照药氯胺酮也浓度依赖性促进PS恢复。结论　 4minOGD为离体海马脑片缺血电生理变化的可行模型 ;依达拉奉对OGD脑片损伤有浓度依赖性保护作用 ,而米诺环素和ONO 10; 李伟魏尔清王梦令刘路英; 关键词：依达拉奉米诺环素 ONO-1078 海马脑片缺氧缺糖

ICAM-1、VCAM-1在脑缺血损伤炎症机制中的作用及调控被引量：51: 2005年; 细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在脑缺血损伤炎症过程中起着重要作用。脑缺血后ICAM-1和VCAM-1表达增加;ICAM-1、VCAM-1介导循环中的白细胞与内皮细胞黏附,进而浸润到血管外脑实质,导致缺血后炎症;抑制ICAM-1、VCAM-1表达及作用可减轻脑缺血损伤。; 张丽慧魏尔清; 关键词：脑缺血细胞间黏附分子-1 血管细胞黏附分子-1

米诺环素对大鼠皮质神经元的毒性及N-甲基-D-天冬氨酸损伤的保护作用被引量：4: 2004年; 目的　更全面地了解米诺环素对中枢神经系统的作用。方法　神经元与不同浓度米诺环素和(或 )N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)作不同时间处理后 ,观察细胞形态 ,并以MTT试验评价细胞活性。结果　米诺环素 135 μmol·L- 1处理 2 4h明显降低体外培养 4 ,7,10d神经元的活性 (P <0 .0 1) ,13.5μmol·L- 1以下则无明显影响 ;4 5 ,135 μmol·L- 1米诺环素处理 3h对体外培养 10d神经元活性没有影响 ,处理 2 4h则活性明显下降 (P <0 .0 1)。米诺环素 4 5 ,135 μmol·L- 1可保护 5 0 μmol·L- 1NMDA损伤3h后的神经元活性 ,但对 15 μmol·L- 1NMDA损伤2 4h后无效 ;15 μmol·L- 1米诺环素则仅对 15 μmol·L- 1NMDA损伤 2 4h后有效。结论　米诺环素对大鼠原代皮质神经元有双重作用 ,高浓度长时间处理有毒性作用 ,但高浓度能保护神经元NMDA急性损伤。; 王一奇魏尔清; 关键词：米诺环素神经元毒性 N-甲基-D-天冬氨酸

脑表面大体摄影评价小鼠局灶性脑缺血后24h内血脑屏障通透性变化被引量：4: 2005年; 目的:建立脑表面大体摄影结合图像分析的方法,观察小鼠局灶性脑缺血后24 h内血脑屏障通透性的变化。方法:采用线栓法诱导小鼠局灶性脑缺血,于缺血后10、30 m in和1、3、6、12、24 h取脑,用数码相机拍摄全脑及脑切片照片,观察脑表面和切面的出血和伊文思蓝(EB)渗出,以及血脑屏障通透性变化;并用荧光法测定脑内EB含量,以干湿重法检测脑水分含量。结果:脑表面图像分析显示,缺血后3 h开始出现明显的出血和EB渗出,与脑切片的结果一致,具有较好的相关性;荧光法显示缺血后30 m in缺血侧脑组织EB含量开始增高,缺血后1 h脑水分含量开始增加。结论:脑表面大体摄影结合图像分析,可对局灶性脑缺血后血脑屏障通透性的变化进行半定量评价,还发现脑缺血后早期血脑屏障的通透性就有增加。; 陈丽萍徐慧敏赵炜张世红朱朝阳张琦余国良储利胜魏尔清; 关键词：脑缺血血脑屏障通透性大脑中动脉阻塞

一种测定小鼠长时间自发活动时空特点的新方法被引量：10: 2004年; 目的 :应用计算机视频跟踪技术 ,建立一种测定小鼠长时间开场自发活动的新方法。方法 :应用连续记录 2 2 h内小鼠在开场的自发活动 ,并用我们研制的 Analy Power1.1系统分析活动轨迹 ;以自发活动总路程、各区域活动路程及其占总路程的比例、各区域停留时间及其占总时间比例等指标 ,评价小鼠自发活动的特点。结果 :小鼠在清醒自由状态下 ,2 2 h内的活动表现显著的区域、时间依赖性特点。停留及活动主要集中在生活区 (食物和饮水区 ) ,其次周边区 ,中央区很少。小鼠在进入开场的第 1h内有明显频繁的活动 ,1h后活动明显减少。在活动趋于稳定后 ,小鼠表现出较明显的昼夜活动特点 ,夜间活动增加。结论 :本研究建立的方法 ,可客观、定量、连续测定小鼠自发活动时间、空间规律。; 张琦魏尔清朱朝阳张世红张纬萍俞月萍陈忠; 关键词：图像处理昼夜节律开场生活区小鼠

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国家自然科学基金(30271498)

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