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1999~2013年山东H9N2亚型禽流感病毒HA基因的演化和HI抗原性差异分析被引量：9: 2015年; 利用生物信息学方法和血凝交叉抑制（HI）试验比较研究了山东地区低致病性禽流感H9N2亚型病毒的分子遗传变异和抗原性变化.对1999~2013年在山东地区分离并鉴定的35株H9N2病毒进行了HA基因测序和同源性分析,绘制了系统发育树.同源性比较显示,同一时期的毒株同源性较高,而不同年代的H9N2流行毒相差较大,如2010~2013年的H9N2流行毒之间核苷酸（氨基酸）同源性为94.5%~100%（96.1%~100%）,但与疫苗株SD-6的核苷酸（氨基酸）同源性已降至90.0%~92.5%（91.8%~95.0%）.系统发育树显示,35株H9N2病毒均属欧亚谱系,其中28株属于S2-like亚群,表明该类型毒株是山东地区最主要的流行株.重要氨基酸位点分析表明,2010年以后的H9N2流行毒,其HA蛋白裂解位点基序为PSRSSR↓GL,334位点均由原来的A变为S;与受体结合位点相关的234位点,则由Q变为L.选择不同亚群的H9N2代表毒株制备单因子血清,进行HI交叉抑制实验,结果发现,H9N2不同毒株之间均可发生一定的交叉反应,但相关指数最低已降至0.31,表明病毒已出现明显的抗原性变化.本研究证实,山东H9N2亚型禽流感病毒在分子和抗原水平上均已发生一定程度的变异.; 张伟徐怀英孟芳马秀丽刘霞黄迪海秦卓明刘金华赵鹏; 关键词：H9N2 HA基因

新城疫病毒非编码序列的遗传演化趋势被引量：1: 2014年; 【目的】探讨新城疫病毒全基因序列中非编码序列的分子演化规律。【方法】结合本研究室2012年自产蛋下降鸭群中分离测序的一株鸭源新城疫病毒全序列,从GenBank下载35株不同基因型新城疫病毒全长cDNA序列,获取非编码序列,分别绘制引导序列、尾随序列、F-HN及HN-L基因间隔序列(IGS)的遗传进化树,比较编码基因内5’及3’UTR序列核苷酸序列替代特点。【结果】非编码序列的长度及位置高度保守,而其核苷酸基因序列在不断发生变异,且变异趋势与编码基因序列相一致。【结论】新城疫病毒在整个基因组上编码和非编码序列同步发生变异。; 徐怀英秦卓明亓丽红张伟王友令刘金华; 关键词：新城疫基因组非编码序列

家禽大肠杆菌分型方法研究进展被引量：4: 2011年; 大肠杆菌感染是家禽在集约化养殖下经常爆发并迅速传播的一种疾病。该病能引起家禽局部或全身性感染,给广大养殖户带来巨大的经济损失。大肠杆菌既是家禽体内的正常菌群又是致病菌,不同类型的大肠杆菌其致病力不同。论文回顾了大肠杆菌目前常用的分型方法,包括常规的血清学分型,生化分型、药敏实验分型以及近年来随着生物学发展新兴的质粒图谱分型和脉冲场分型等,并就大肠杆菌现有的分型方法做一简要阐述,希望能为更好地研究和预防该病的发生,为确定不同菌株之间的关联性、细菌传染源的追踪和寻找传播途径提供更好、更合适的方法做参考。; 张玉霞徐怀英; 关键词：家禽大肠杆菌

1株鸭坦布苏病毒人工感染雏鸭的病理学研究被引量：10: 2013年; 7日龄雏鸭经肌肉接种坦布苏病毒BZ株1周后,发病率100%,死亡率为80%。接种鸭全身多数器官出现充血、出血、坏死等症状,病理学变化主要表现在肝实质严重变性、坏死;脾淋巴细胞局部减少;肾小管上皮细胞肿胀;肺淤血,内有大量细胞渗出;胰腺中可见凝固性坏死灶;大脑软脑膜充血、水肿,小脑脑膜上炎性细胞浸润。鸭接种该病毒后,攻毒组的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、谷氨酰胺转移酶、乳酸脱氢酶水平和血清尿酸的浓度较对照组明显升高。结果表明:坦布苏病毒BZ株可造成全身多器官的病理性损伤以及主要血液生化指标的显著变化,这可能是该病毒致病性的重要机制之一。; 王友令袁小远杨金兴于可响徐怀英张玉霞艾武秦卓明李玉峰; 关键词：病理学研究血清酶

1株鸽新城疫病毒F和HN蛋白的潜在抗原表位分析被引量：5: 2011年; 从亲水性、抗原性、可塑性、表面可能性、二级结构等5项参数指标来综合预测1株鸽新城疫病毒(Newcastledisease virus,NDV)JN08株F和HN蛋白的潜在B细胞抗原表位,并比较其与疫苗株La Sota抗原表位的差异,同时对F和HN基因序列进行分析。综合预测显示:JN08株F和HN蛋白预测抗原表位分别有21,26处;La Sota F和HN蛋白预测抗原表位分别有19,25处。就F蛋白而言,与La Sota相比JN08毒株在82～87、99～102、411～412aa多出3处抗原表位,而在450～455aa缺失1处抗原表位。其中82～87、99～102aa这2处抗原表位位于裂解位点之前,是否对病毒的抗原性、蛋白水解酶的敏感性、毒力等造成影响还有待于进一步研究。就HN蛋白而言,JN08毒株与La Sota相比在128～132aa多出1处抗原表位,此表位位于HN蛋白的柄状部,该部分存在促进F蛋白融合活性的区域,JN08毒株在此区域多出1处抗原表位可能会对F蛋白的融合活性有一定的影响。; 袁小远王友令徐怀英王金宝艾洪滨; 关键词：鸽新城疫病毒 F蛋白 HN蛋白抗原表位

1株产蛋高峰鸡H9N2的分离鉴定及HA基因序列分析被引量：3: 2013年; 从产蛋率下降的蛋鸡群中分离到1株具有血凝性的病毒，经HI交叉抑制试验证实为H9N2病毒，命名为A／Chieken／Shandong／JN／11，病毒对SPF鸡基本无致病性，IVPI为0。对其HA基因进行克隆测序，HA基因裂解位点的序列为RSSRlGL，与弱毒基序一致；有7个潜在糖基化位点；受体结合位点除198位有变异外，其余均较保守；A／Chicken／Shandong／JN／11分离株分Gen-Bank上发表的近几年来山东参考株HA基因的核苷酸之间的同源性为89．9％-97．4％，氨基酸序列之间的同源性为93．4％～97．5％。系统进化树分析表明，该毒株与近年来国内流行的A／Chicken／zhejiang／ZLB／11禽流感毒株类似。; 张玉霞袁小远徐怀英亓丽红翟荣玲王友令艾武; 关键词：HA基因

用HI和ELISA方法检测SPF鸡血清和蛋黄中ND抗体的比较: 2012年; 分别用血凝抑制试验(HI)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42周和48周SPF鸡血清、以及同期SPF鸡蛋蛋黄中新城疫(ND)抗体。结果表明,两种方法检测的120份血清中均无ND抗体,呈阴性;120枚SPF鸡蛋蛋黄检测,ELISA方法检测结果全为阴性;HI方法检测结果25份阳性,差异较为明显。; 周广驰魏艳华赵成莹袁静孙晓军欧阳文军; 关键词：血凝抑制试验酶联免疫试验新城疫抗体

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山东省科技发展计划项目(2009GG10009006)