国家自然科学基金(30700797)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- Cdc42基因在非甾体抗炎药抑制乳腺癌细胞丝状伪足形成中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的:研究细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)基因在非甾体抗炎药(nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)诱导抑制细胞丝状伪足形成中的作用,探究NSAIDs抑制在肿瘤细胞迁移和侵袭过程中可能的信号转导途径。方法:使用环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,Cox-2)选择性抑制剂NS-398处理乳腺癌MCF-7细胞,同时将针对Cox-2的特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染入MCF-7细胞;利用实时荧光定量-PCR和Western印迹法检测NS-398处理组、Cox-2 siRNA干扰组、干扰阴性对照组和空白对照组细胞中Cox-2和Cdc42的mRNA转录水平以及蛋白表达水平;使用微丝绿色荧光探针观察MCF-7细胞的伪足形态;Transwell小室检测MCF-7细胞的体外侵袭能力。结果:乳腺癌MCF-7细胞经NS-398处理后,细胞丝状伪足消失,体外侵袭能力显著下降(P<0.05);Cox-2mRNA转录及蛋白表达水平均未见明显改变(P>0.05),Cdc42 mRNA及总蛋白表达水平也未见明显改变(P>0.05),但活化态Cdc42含量显著减少(P<0.05)。经siRNA干扰Cox-2表达后,MCF-7细胞的丝状伪足消失,体外侵袭能力显著下降(P<0.05),活化态Cdc42含量显著减少(P<0.05)。结论:NSAIDs在体外抑制肿瘤细胞侵袭的作用可能是通过抑制Cox-2活性,使活化态Cdc42含量减少,最终抑制细胞丝状伪足形成而实现的。
- 江隆昌屈新才张勇
- 关键词：环氧合酶2CDC42肿瘤侵润伪足
- 线粒体融合素基因-2对乳腺癌细胞RECK基因表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨线粒体融合素基因-2(mfn2)对乳腺癌细胞株MCF-7细胞中RECK表达的影响。方法利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFP-mfn2转染MCF-7细胞。RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastern blot法检测mfn2及RECK蛋白的表达。结果转染pEGFP-mfn2质粒的MCF-7细胞可以稳定高表达mfn2,RECK基因在转染空质粒组和未转染组细胞中无表达,转染mfn2基因后RECK基因mRNA转录及蛋白的表达显著升高。结论mfn2基因可激活MCF-7细胞中RECK基因的表达。
- 张勇郑启昌王尧胡文君胡青钢
- 关键词：线粒体融合素基因-2MCF-7RECK
- mitofusin-2对乳腺癌细胞RECK基因表达及MMPs活性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨线粒体融合素基因-2(mitofusin-2)对乳腺癌MCF-7细胞株中RECK表达及MMP-9,MMP-2活性的影响。方法利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFP-mfn2转染MCF-7细胞。RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastern Blot法检测mfn2及RECK蛋白的表达;明胶酶谱试验检测转染前后MMP-9及MMP-2的活性。结果转染pEGFP-mfn2质粒的MCF-7细胞可以稳定高表达Mfn2;RECK基因在转染空质粒组和未转染组细胞中无表达;转染mfn2基因后RECK基因mRNA转录及蛋白的表达显著升高,且MMP-9及MMP-2的活性显著降低(P<0.05)。结论mfn2基因可激活MCF-7细胞中RECK基因的表达,并显著抑制其MMP-9及MMP-2的活性。该途径可能是mfn2基因抗肿瘤作用的新机制。
- 张勇屈新才王尧胡文君胡青钢郑启昌
- 关键词：线粒体融合素基因-2MCF-7细胞株RECKMMP-2
- 细胞分裂周期蛋白42高表达在雌激素诱导的乳腺癌细胞耐药性增强过程中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的观察细胞分裂周期蛋白42（Cdcd2）在雌激素作用下的变化，探讨细胞内物质运输的改变在雌激素引发的乳腺癌细胞耐药中的意义。方法分别以100ng／ml 17β雌二醇（E2）处理MCF-7细胞，以Cdc,42的小干扰RNA（siRNA）Stealth Select RNAi^TM siRNA转染MCF-7细胞。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的药物敏感性，流式细胞术检测细胞内阿霉素（ADM）的蓄积量，实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞的Cdc42 mRNA表达，Western blot法检测细胞活化的Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白表达量。结果E2处理后，ADM对MCF-7细胞的半数抑制浓度（IC50）由（0．098±0．011）μg/ml增高到（0．134±0．130）μg/ml（P〈0．05），细胞内ADM的相对含量则由7．253±0．310下降为3．233±0．313（P〈0．05），而Cdc42 mRNA、活化Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白的表达量均显著增加。（P〈0．05）。Cdc42 siRNA转染后，ADM对MCF-7细胞的IC50下降到（0．057±0．017）μg/ml（P〈0．05），细胞内ADM的相对含量增高为11．217±0．521（P〈0．05），而Cdcd2 mRNA、活化Cdcd2蛋白及总Cdc42蛋白则均有显著下降（P〈0．05）。结论雌激素可以诱导乳腺癌细胞耐药性增强，其机制可能是通过上调Cdc42基因的转录、表达和活化，加速胞内物质运输速度，使得化疗药物无法在细胞内聚集。
- 江隆昌张勇屈新才
- 关键词：乳腺肿瘤MCF-7细胞雌激素多药耐药
