福建省自然科学基金(2009D002)
- 作品数：13 被引量：45H指数：4
- 相关作者：王占祥陈玉英谭国伟沈上杭刘希尧更多>>
- 相关机构：厦门大学重庆邮电大学福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金厦门市科技计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制Pygo2表达对U251细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法针对Pygo2 cDNA序列设计并合成一对特异性的含有"短发卡"的寡核苷酸序列及其随机对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体。经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染脑胶质瘤U251细胞,采用RT-PCR和Western blot检测Pygo2 shRNA对U251细胞Pygo2 mRNA和蛋白的干扰效果,应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,BrdU掺入法检测DNA合成。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确;Pygo2 shRNA显著抑制了其mRNA和蛋白的表达,MTT分析其细胞增殖也被显著抑制(P<0.01)。与scr shRNA组的克隆形成数(78.9±6.8)%相比,Pygo2 shRNA组克隆数(55.4±5.2)%显著减少(P<0.05)。与对照组的BrdU掺入率(20.96±2.19)%相比,Pygo2 shRNA组的BrdU掺入率(8.81±0.56)%显著减少(P<0.05),而scr shRNA组的BrdU掺入率是(20.35±1.73)%无显著变化。而且,Pygo2 shRNA使U251细胞处于S期百分比显著减少、G1期显著增加(P<0.01),致细胞周期阻滞于G1期。结论成功构建了抑制Pygo2表达的重组载体,下调Pygo2表达能有效地抑制脑胶质瘤U251细胞DNA合成,使细胞阻滞于G1期,抑制细胞增殖。
- 陈玉英王海东王占祥谭国伟刘希尧沈上杭
- 关键词：PYGO2胶质瘤细胞增殖短发夹RNA
- 交通性脑积水纤维化发生机制及抗纤维化研究现状被引量：3
- 2011年
- 交通性脑积水可自发于老年人、新生儿或作为脑外伤、颅内出血和脑膜炎等疾病的并发症。血液、炎症因子等局部刺激引起蛛网膜、蛛网膜下腔、蛛网膜绒毛、软脑膜以及神经根周围间隙等部位的纤维增生、粘连，甚至发生闭塞，引起脑脊液（CSF）回流和吸收障碍。
- 张绍林王占祥陈玉英
- 关键词：交通性脑积水抗纤维化蛛网膜下腔颅内出血炎症因子
- Pygo2在脑胶质瘤组织和细胞的表达及临床意义被引量：3
- 2011年
- 目的:检测Pygo2在脑胶质瘤组织和细胞中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用RT-PCR检测5种胶质瘤细胞株Pygo2 mRNA表达,Real-time PCR检测67例Ⅱ～Ⅳ级脑胶质瘤组织中Pygo2 mRNA表达,免疫组织化学SP法检测80例脑胶质瘤组织中Pygo2的蛋白表达。结果:Pygo2 mRNA在5种胶质瘤细胞株中均有表达,其中U251细胞中最高,C6细胞中最低。Pygo2mRNA在正常脑组织中表达极低,而在脑胶质瘤Ⅱ～Ⅳ级表达显著增高,且Pygo2 mRNA表达随肿瘤分级的增高而显著增强(P<0.05)。Pygo2在脑胶质瘤组织细胞中定位于胞核,在正常脑组织中表达呈阴性,而在脑胶质瘤组织中约有65.0%阳性表达,两者差异显著(P<0.01)。Pygo2表达Ⅱ级(WHOⅡ)中低,Ⅳ级(WHOⅣ)中高。Pygo2在脑胶质瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级中表达阳性率分别是5/13(38.5%)、12/26(46.2%)、15/19(78.9%)、20/22(90.9%),Pygo2蛋白表达与肿瘤分级密切相关(P<0.01)。此外,Pygo2蛋白表达水平与患者的性别、年龄均无显著性差异(P>0.05)。结论:Pygo2在正常脑组织中呈阴性,在脑胶质瘤组织和细胞中均高表达,且在组织中其表达随胶质瘤级别增高而显著增强,提示Pygo2可能在脑胶质瘤的发生、恶性演进中起了重要作用。
- 王海东陈玉英王占祥刘希尧谭国伟沈上杭
- 关键词：REAL-TIME
- 下调Pygo2抑制脑胶质瘤U251细胞增殖、侵袭及其cyclin D1的表达被引量：2
- 2011年
- 目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖、侵袭的影响及其机制。方法针对Pygo2cDNA序列设计并合成一对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其阴性对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体。经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染脑胶质瘤U251细胞,采用实时定量PCR和蛋白质印迹方法检测Pygo2shRNA对U251细胞Pygo2mRNA和蛋白表达的干扰效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期分布,BrdU掺入法检测DNA合成,Transwell检测细胞侵袭。采用蛋白质印迹和免疫荧光法检测Pygo2shRNA对U251细胞cyclin D1、β-catenin蛋白水平和亚细胞定位的影响。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确;Pygo2shRNA显著抑制了U251细胞Pygo2mRNA和蛋白的表达;Pygo2shRNA抑制U251细胞Pygo2表达后,细胞增殖显著降低,细胞更多地阻滞在G1期,且BrdU掺入显著减少,侵袭细胞数显著减少。此外,抑制Pygo2表达可显著下调U251细胞cyclin D1的表达但不改变其亚细胞定位。U251细胞β-catenin表达及其亚细胞定位无明显改变。结论成功构建了抑制Pygo2表达的重组载体。抑制Pygo2表达能有效地抑制脑胶质瘤U251细胞DNA合成,可能通过下调Wnt信号靶基因cyclin D1的表达,使细胞阻滞于G1期而抑制细胞增殖和侵袭。
- 陈玉英王海东王占祥刘希尧谭国伟沈上杭
- 关键词：PYGO2胶质瘤细胞增殖短发夹RNA
- microRNA与胶质瘤侵袭性关系的研究进展被引量：2
- 2011年
- 陈寿仁王占祥陈玉英
- 关键词：MIRNA胶质瘤侵袭性
- 脑出血干预相关因子研究进展被引量：1
- 2011年
- 脑出血是常见的急性脑血管疾病之一,约占全部脑卒中患者死亡人数的15%。脑出血的有害效应主要由原发性损伤和继发性损伤引起,原发性损伤是指血肿直接引起的效应如血肿增大及占位效应,而继发性损伤如脑水肿、神经细胞毒性损伤,则可在脑出血后即刻出现并长期存在,影响患者预后。
- 张飞飞陈玉英王占祥
- 关键词：脑出血血管内皮生长因子类血管生成素-1核转录因子
- 第三脑室造瘘术与脑室腹腔分流术治疗脑积水疗效的系统评价被引量：6
- 2012年
- 目的系统评价第三脑室造瘘术与脑室腹腔分流术治疗脑积水的临床疗效。方法计算机检索2001～2011年期间的PubMed、EMbase、Cochrane图书馆的临床对照试验资料库、CBM、CNKI和WanFang Data数据库,检索语种不限,纳入比较第三脑室造瘘术与脑室腹腔分流术治疗脑积水的随机或非随机对照试验,并观察两种手术方法的总并发症和各期生存率。由2名评价员按纳入排除标准独立选择文献、提取数据并交叉核对,依据Cochrane Handbook 5.0.2推荐的偏倚风险评估工具评价纳入研究的方法学质量,并采用RevMan 5.0软件进行统计分析。结果最终纳入9个试验,共计1 187例患者。Meta分析结果显示:内镜下第三脑室造瘘组和传统脑室腹腔分流术组在术后近期(1、2年)生存率上差异无统计学意义[RR=1.02,95%CI(0.90,1.16),P=0.74;RR=1.14,95%CI(1.00,1.30),P=0.06]。但在总并发症发生率、术后3年生存率、5年生存率方面,差异有统计学意义[分别为RR=0.70,95%CI(0.57,0.89),P=0.001;RR=1.23,95%CI(1.07,1.41),P=0.004;RR=1.14,95%CI(1.29,1.66),P=0.05],表明内镜下第三脑室造瘘在控制总并发症发生率和延长远期生存率上具有优势。结论本研究结果提示内镜下第三脑室造瘘术在降低总并发症发生率和术后长期生存率方面优于脑室腹腔分流术,而在近期并发症方面,两者没有差异。对于各种具体原因引起的脑积水患者,两种手术的疗效需要更多高质量的多中心随机双盲对照试验进一步证实。
- 徐昊王占祥张绍林张飞飞
- 关键词：脑室腹腔分流术随机对照试验
- 可调压分流管置入治疗脑积水疗效的系统评价被引量：17
- 2013年
- 目的系统评价可调压分流管置入治疗脑积水的疗效和安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane图书馆、EMbase、CNKI、CBM、VIP和WanFang Data,收集可调压分流管与常规非可调压分流管置入比较治疗脑积水的随机对照试验或非随机的同期对照试验,检索时限从1992年1月至2012年1月。由2名研究者按照纳入标准独立筛选文献、提取资料、评价质量并交叉核对后,采用RevMan5.0软件进行Meta分析。结果纳入11个非随机的同期对照试验,共1 485例患者。Meta分析结果显示:可调压分流管在总体有效率[RR=1.14,95%CI(1.03,1.27),P=0.01]、2年生存率[RR=1.25,95%CI(1.04,1.51),P=0.02]、二次手术换管率[RR=0.53,95%CI(0.39,0.73),P<0.001]、总并发症发生率[RR=0.62,95%CI(0.51,0.76),P<0.001]和分流过度或不足发生率[RR=0.42,95%CI(0.21,0.83),P=0.01]方面均优于常规非可调压分流管,其差异有统计学意义;但在1年生存率[RR=1.04,95%CI(0.91,1.19),P=0.55]、术后感染率[RR=1.08,95%CI(0.73,1.60),P=0.71]和分流管相关并发症[RR=0.80,95%CI(0.56,1.21),P=0.20]方面,两组差异无统计学意义。结论现有证据提示可调压分流管在增加分流有效率、减少分流并发症和延长患者远期生存率方面存在优势。受纳入研究数量和质量限制,还需要开展更多高质量的多中心随机双盲对照试验进一步验证其能否作为分流手术首选在临床推广。
- 徐昊王占祥陈东汉张绍林郭剑锋谭国伟陈四方朱宏伟
- 关键词：脑积水脑室腹腔分流术可调压分流管META分析
- miR-126下调MMP-2抑制人脑胶质瘤细胞侵袭被引量：4
- 2012年
- 目的初步探讨miR-126抑制人胶质瘤细胞侵袭的可能机制。方法化学合成miR-126,脂质体转染人脑胶质瘤U87细胞,应用RT-PCR、Western blot检测MMP-2基因和蛋白的表达情况,并应用Transwell小室检测转染前后细胞侵袭力的变化。结果 miR-126上调后U87细胞的MMP-2基因和蛋白表达降低,并且细胞侵袭力明显降低。结论化学合成的miR-126在抑制人胶质瘤细胞侵袭过程中发挥重要作用,可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点。
- 陈寿仁王占祥沈上杭谭国伟刘希尧朱宏伟
- 关键词：MIR-126胶质瘤基质金属蛋白酶-2
- Pygo2、cyclinD1在胶质瘤中的表达及Pygo2对C6细胞增殖的作用
- ＜正＞Pygopus2（Pygo2）蛋白是Wnt信号系统新成员,参与调控基因的转录,与恶性肿瘤的发生密切相关,具有促进乳腺癌增殖的作用。cyclinD1是Wnt通路下游的关键的靶基因,在多种肿瘤发生发展及浸润转移中扮演重...
- 王占祥王海东陈玉英谭国伟刘希尧马永会沈上杭
- 关键词：胶质瘤PYGO2细胞增殖
- 文献传递
