国家科技支撑计划(2006BAD06A03)
- 作品数:73 被引量:369H指数:11
- 相关作者:刘湘涛仇华吉孙元常惠芸郑海学更多>>
- 相关机构:中国农业科学院兰州兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所扬州大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 2006~2008年华东地区新城疫病毒HN基因序列分析被引量:2
- 2010年
- 为研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的HN(血凝素-神经氨酸酶,hemagglutinin—neuraminidase)基因分子流行病学规律,利用RT—PCR扩增了2006~2008年间分离自我国华东地区的43株NDV的HN基因片段。基因序列分析显示,分离株中基因Ⅰ型2株,基因Ⅱ型3株,基因Ⅵ型1株,其它37株都属于基因Ⅶd亚型。根据遗传发生进化树可将基因Ⅶd亚型进一步分为Ⅶd1和Ⅶd2两个亚型,基因Ⅶd1亚型HN蛋白的第102、118、443位氨基酸分别为T,A和T,而基因Ⅶd2亚型则分别为I,E和M。另外,研究表明HN蛋白线性表位发生E347K突变的变异株的分离率在我国呈上升趋势。
- 吴双胡增磊王伟伟王晓泉胡顺林刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒变异株
- FMDV整联蛋白受体β1亚基的克隆及其配体黏附区多抗的制备被引量:2
- 2008年
- 采用RT-PCR技术从牛气管组织扩增出2400bp的β1基因,回收纯化连入PGEM-T载体,测序。用Expasy软件对β1基因的抗原性进行分析,选取胞外区334-861bp的配体结合区与6×His融合,在大肠杆菌中大规模诱导表达,并经Ni2+亲和柱层析纯化。通过SDS-PAGE鉴定后,应用纯化蛋白免疫新西兰家兔,获得效价在1:12800以上的多抗,Western blotting鉴定表明此抗体可特异性的与表达的融合蛋白作用。
- 杜平尚佑军马军武贺延玉孙晓林刘湘涛
- 关键词:口蹄疫病毒整联蛋白Β1亚基多克隆抗体
- 几种中国鸡传染性支气管炎致弱毒株对流行毒株CK/CH/LDL/97Ⅰ保护作用的评价被引量:1
- 2009年
- 选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110、tl/CH/LDT3/03 F120和1株同种毒株CK/CH/LDL97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,研究了CK/CH/LDL97Ⅰ与其他病毒的基因型关系。结果显示,CK/CH/LDL97Ⅰ属于有别于其他IBV毒株的一个独立的基因群。在此基础上,通过血清抗体检测、攻毒后发病率、死亡率、临床症状、病理变化观察以及气管和肾脏中病毒分离等方面研究了同种致弱毒株和异种致弱毒株对CK/CH/LDL97Ⅰ的免疫效力。结果显示,同种致弱毒株对CK/CH/LDL97Ⅰ强毒的攻击可提供100%的临床和病毒分泌的保护性。异种毒株tl/CH/LDT3/03 F120可提供100%的临床保护,但呼吸道病毒检出率达50%,表明对呼吸系统的保护效果不好。异种毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110免疫组临床发病率为50%,气管样品病毒检出率为100%,可见临床和对病毒分泌的保护效果均较差。
- 张晓楠王滨李成仁王钰刘乔然韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒S1基因异种
- 猪瘟病毒急性感染后病毒载量的动态分布规律研究
- 针对猪瘟病毒(CSFV)和猪看家基因(ACTB)分别设计了一对引物和一条探针,建立了一套特异强、灵敏度高的CSFV相对荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。对CSFV SM株感染的16头60日龄长白猪体内各主要组织器官...
- 刘俊王琴范学政徐璐汤波陈蕾黄伟
- 关键词:CSFV病毒载量FQ-PCR
- 文献传递
- 不同基因型新城疫病毒对美国白羽王鸽的致病性研究被引量:7
- 2010年
- 为比较鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒(NDV)与其它不同基因型NDV对鸽的致病性差异,本研究选取JS-7-05-Ch(基因Ⅲ型)、WX-10-07-Pi(基因Ⅵb型)、JS-5-05-Go(基因Ⅶd型)和F48E8(基因Ⅸ型)4个病毒株,分别人工感染2月龄实验鸽。接种后,观察实验鸽临床症状、病理剖解变化、同时检测HI抗体水平变化、喉气管和泄殖腔排毒以及病毒在组织分布情况。4株NDV均能导致接种鸽的发病,但死亡率分别为0、0、100%、50%。WX-10-07-Pi接种组鸽泄殖腔排毒时间最长、而且病毒检出率比其它组高。另外,在接种组鸽的多种组织器官中均可检测出病毒。实验结果表明,不同基因型NDV对鸽均有致病性,但致病力强弱与NDV毒株特性有关;基因Ⅵb型NDV在鸽体内可长期的带毒与排毒,与其它基因型NDV相比更易在鸽群中传播。
- 吴双王伟伟曹军平胡顺林王晓泉刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒排毒
- 用原位杂交技术对牛组织中FMDV RNA检测和定位
- 2007年
- 采用原位杂交技术对6头试验牛易感染组织中的FMDVRNA进行了检测和定位。结果显示,接毒后7~28d4头牛舌上皮组织、7~21d的喉咽部有强阳性染色;接毒后35d的牛及正常对照牛舌上皮没有阳性染色;接毒牛及对照牛的扁桃体、淋巴结和蹄叉等其他组织中均没有阳性染色,表明牛舌上皮和喉咽部上皮组织中感染了FMDV,本研究为进一步阐明FMDV在宿主体内的持续感染机理提供极有价值的线索。
- 邵军军常惠芸林彤丛国正独军政谢庆阁
- 关键词:FMDV原位杂交
- 茯苓多糖对流感灭活疫苗的免疫增强作用被引量:25
- 2009年
- 探讨茯苓多糖作为流感病毒灭活疫苗佐剂的免疫增强作用.将不同剂量(200μg或1 000μg)的茯苓多糖分别与低剂量(0.015μg)或高剂量(1.5μg)流感病毒(A/PR/8)灭活疫苗共同免疫小鼠,以相应剂量灭活疫苗的单独免疫组、灭活疫苗与氢氧化铝(100μg)共同免疫组、PBS免疫组作为对照组.一次免疫后3周收集血清,ELISA检测血清中IgG、IgG1和IgG2a的抗体水平;并用致死量(40×LD50)流感病毒(A/PR/8)攻击小鼠,通过观察小鼠的体重丢失率、肺部病毒量、存活率来反映佐剂的免疫增强效果和疫苗的保护作用.结果显示,茯苓多糖能显著增加血清抗体水平,并提高小鼠抗致死量流感病毒攻击的能力,其免疫增强效果与氢氧化铝相当.茯苓多糖可作为一种新型的流感病毒灭活疫苗的免疫佐剂.
- 谢国秀王芙艳杨忠东王绍彬张风华陈则方芳
- 关键词:茯苓多糖流感灭活疫苗佐剂
- 流感病毒基质蛋白DNA疫苗的免疫保护作用研究被引量:2
- 2009年
- 流感病毒基质蛋白(matrix protein,M)在病毒复制和毒力方面有重要作用.编码基质蛋白的M1基因和M2基因胞外域序列是A型流感病毒的保守序列,是研究具有交叉保护能力流感疫苗的候选基因.我们构建了真核表达质粒pCAGGSP7/M1和pCAGGSP7/M2,用质粒DNA免疫小鼠以观察其免疫原性.分别在M1 DNA免疫2、3、4、5、6次或M2 DNA免疫4、5、6次7d后,用致死量同源流感病毒A/PR/8攻击小鼠,通过检测小鼠血清抗体滴度、肺部病毒量和小鼠存活率来观察质粒DNA的保护效果.结果表明,随着免疫次数增加,M1 DNA免疫组在病毒攻击后小鼠存活率增高,而M2 DNA免疫组小鼠攻毒后全部死亡.说明M1 DNA多次免疫后能提供抗流感病毒的部分保护,M2 DNA没有免疫保护作用.
- 匡海门王芙艳杨忠东常海艳李小曼陈则方芳
- 关键词:流感病毒基质蛋白DNA疫苗
- CSFV感染后宿主凋亡相关基因表达变化研究
- 利用基因表达谱分析感染CSFV后猪基因组转录水平表达差异.对CSF抗体及病毒RNA检测阴性约60日龄长白仔猪颈部肌肉注射10TCIDCSFV石门株血毒,以攻毒前和攻毒后猪自体PBWC作为样品,提取白细胞基因组RNA,用A...
- 史子学孙金福郭焕成涂长春
- 关键词:猪瘟病毒基因芯片
- 文献传递
- 牛口蹄疫病毒受体β6亚基的基因克隆和分子特征被引量:3
- 2008年
- 从口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)感染康复牛的舌皮组织中克隆到了β6亚基基因并对其核苷酸序列和推导的氨基酸进行了比较分析。牛β6基因的编码区含有2367个核苷酸,编码788个氨基酸残基,其中信号肽由26个氨基酸组成(1~26aa);胞外域由681个氨基酸组成,含有10个潜在的糖基化位点(NXT/NXS)和51个半胱氨酸(Cys)残基;跨膜区由29个氨基酸组成(708~736aa);胞浆域由52个氨基酸组成,含有1个NPLY核心基序,该基因在GenBank中的登录号为DQ867017。牛β6基因与羊、猪、人、小鼠、挪威大鼠β6基因的核苷酸序列同源性分别为97.0%、91.6%、88.6%、82.5%和82.7%,推导的氨基酸序列同源性分别为97.1%、93.7%、93.0%、89.2%和89.2%。口蹄疫病毒自然宿主(牛、羊、猪)的β6亲缘关系较近,提示β6亚基可能与口蹄疫病毒的宿主范围有关。
- 独军政常惠芸丛国正邵军军林彤刘在新刘湘涛才学鹏谢庆阁
- 关键词:口蹄疫病毒分子特征