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国家科技支撑计划(2006BAD06A04)

作品数：17 被引量：129H指数：6
相关作者：岳城冉多良翟少伦龙进学袁世山更多>>
相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所新疆农业大学南京农业大学更多>>
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文献类型

  • 17篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 17篇农业科学
  • 4篇生物学

主题

  • 16篇病毒
  • 8篇猪繁殖
  • 8篇猪繁殖与呼吸...
  • 8篇猪繁殖与呼吸...
  • 8篇呼吸综合征
  • 8篇呼吸综合征病...
  • 8篇繁殖
  • 8篇繁殖与呼吸综...
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  • 2篇血清
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  • 2篇猪圆环病毒
  • 2篇猪圆环病毒2...
  • 2篇细胞

机构

  • 7篇中国农业科学...
  • 5篇新疆农业大学
  • 3篇华中农业大学
  • 3篇南京农业大学
  • 3篇中国科学院
  • 3篇中国农业科学...
  • 3篇中国农业科学...
  • 2篇黑龙江省农业...
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  • 1篇四川大学
  • 1篇浙江大学
  • 1篇四川农业大学
  • 1篇西昌学院
  • 1篇中国农业大学
  • 1篇中国兽医药品...
  • 1篇江苏出入境检...

作者

  • 5篇龙进学
  • 4篇翟少伦
  • 3篇袁世山
  • 3篇贾红
  • 3篇侯绍华
  • 3篇鑫婷
  • 3篇朱鸿飞
  • 3篇丁敏
  • 3篇陈焕春
  • 3篇冉多良
  • 3篇岳城
  • 2篇彭金美
  • 2篇贝为成
  • 2篇田志军
  • 2篇姜平
  • 2篇安同庆
  • 2篇韦祖樟
  • 2篇杨利敏
  • 2篇郭晓宇
  • 2篇周艳君

传媒

  • 4篇中国预防兽医...
  • 3篇畜牧兽医学报
  • 2篇生物工程学报
  • 2篇中国畜牧兽医
  • 2篇中国动物传染...
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇微生物学报
  • 1篇微生物学通报
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 5篇2010
  • 6篇2009
  • 5篇2008
  • 4篇2007
共 17 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
致弱过程中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株部分生物学特性的研究被引量：2
2009年
为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代。该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其病毒滴度达到最高并保持稳定;电镜观察发现低代次病毒粒子形态以棒状为主,高代次病毒粒子形态以球形为主;蚀斑形态比较发现低代次病毒形成的蚀斑大小不一,而高代次病毒形成的蚀斑大小均一;序列分析和病毒抗原性分析表明HuN4株传代过程中GP5蛋白羧基端1个主要抗原表位(196QWGRL200)发生突变即196Q突变为196R,针对该表位的单克隆抗体只与HuN4株低代次病毒反应而不与高代次病毒反应。以上结果表明:在Marc-145细胞上经蚀斑克隆和连续传代致使HP-PRRSVHuN4株部分生物学特性发生改变,这些特性的改变在病毒弱化过程中的作用还有待进一步的研究。
田志军安同庆周艳君彭金美陈谨王瑜童光志刘娣
关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒生物学特性
猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白B细胞抗原表位的鉴定被引量：8
2009年
本研究去除了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株M蛋白基因部分疏水性区域后,克隆于原核表达载体pGEX-6P-1中进行表达,并利用表达的M蛋白(rtM)为抗原,免疫BALB/c小鼠制备了1株抗M蛋白的单克隆抗体(McAb)M2B3,IFA试验表明该McAb能够识别PRRSVCH-1a株。同时将M蛋白基因进行一系列的氨基酸截短表达,证实M蛋白的117aa～129aa是McAbM2B3的抗原表位;对该抗原表位进行western blot分析,结果显示该表位能被PRRSV感染猪的血清特异性识别。本研究结果为进一步深入了解M蛋白的抗原特性奠定了基础。
周艳君田志军刘金霞安同庆彭金美薛强蔡雪辉于海李国新刘娣童光志王云峰王玫
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体抗原表位
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响被引量：11
2007年
采用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染后不同时相猪肺泡巨噬细胞(PAM)中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DRI、i链和SLA-DM分子及共刺激分子CD40、CD80、CD86的mRNA转录动态进行了定量检测。结果表明,PRRSV感染后PAM的SLA-DR mRNA转录水平在3、7和14 d下调,低于对照组;感染后3 d,Ii链、SLA-DM和CD40的mRNA转录水平极显著下调(P<0.01);CD80和CD86mRNA转录水平也在感染后3 d明显下调(P<0.05)。用流式细胞术检测PAM表面的SLA-DR抗原的结果表明,在感染后3 d短暂上升,7 d之后一直低于对照组。由此说明,PRRSV感染早期对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能产生显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降,进而影响机体的体液免疫应答。
磨美兰杨汉春郭鑫吕艳丽周双海陈艳红查振林
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪肺泡巨噬细胞共刺激分子
猪Ⅰ型与Ⅱ型干扰素的克隆、表达及抗病毒活性比较被引量：13
2009年
干扰素(IFN)是由多种细胞受病毒感染或其他生物诱导剂刺激而产生的天然蛋白质,主要功能为抗病毒增殖、调节免疫反应和激活免疫细胞等。本研究克隆并测序了猪干扰素(PoIFN)α、γ、αγ及ω基因。构建原核表达载体pET-His/PoIFN-α、pET-His/PoIFN-γ、pET-His/PoIFN-αγ和pET-His/PoIFN-ω,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行表达,经纯化、复性得到具有生物学活性的蛋白。用细胞病变抑制法在Marc-145/PRRSV、Marc-145/VSV、PK-15/VSV、Vero/VSV、MDBK/VSV系统上进行抗病毒活性测定,结果表明猪α和αγ融合干扰素有较为显著的抗病毒活性,抗PRRSV活性高达108U/mg;猪γ干扰素活性效价约为α干扰素的1/2到1/3;猪ω干扰素几乎未检测到抗病毒活性,需进一步验证。本研究对干扰素在抗病毒、提高机体免疫方面的应用提供了理论依据。
陈雪梅薛清华祝荣格付显华杨利敏孙蕾刘文军
关键词：抗病毒活性病毒感染免疫细胞
PCV2a与PCV2b鉴别诊断PCR方法的优化及应用被引量：6
2010年
猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是严重危害养猪业的重要病原之一,根据基因组大小可分为2个基因型:PCV2a和PCV2b。为更好地掌握PCV2a和PCV2b在我国猪场的流行情况,本研究对先前的鉴别PCR诊断方法(涉及到引物、PCR体系及程序)进行优化,并应用优化的鉴别PCR方法对118份PCV2阳性样品进行检测,结果显示PCV2a占30.5%(36/118),PCV2b占37.3%(44/118),共感染占32.2%(38/118),与常规PCR检测结果符合率为100%,此外,对30份临床送检组织和血清样品也有很高的检出率。部分鉴别PCR扩增的目的产物进行测序及序列进化树分析,表明扩增序列为PCV2a与PCV2b的特征序列。经本研究优化后的鉴别PCR方法易操作、特异性强、敏感性好,可广泛用于临床样品中PCV2a和PCV2b的快速检测。
翟少伦张建武韦祖樟袁世山岳城冉多良龙进学
关键词：猪圆环病毒2型PCR
猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：22
2010年
【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSVN基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10000倍,在对50份猪血液样本RNA的检测中,该方法与传统的RT-PCR检测方法具有很好的统一性(κ=0.83)。【结论】RT-LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测PRRSV,并适用基层和现场检测。
鑫婷侯绍华贾红郭晓宇丁家波李延鹏丁敏朱鸿飞
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP
三黄鸡CD154基因的克隆、序列分析与表达
2007年
CD154在抗原特异的T淋巴细胞和抗原提呈细胞的相互作用中发挥非常重要的作用。利用RT—PCR方法从三黄鸡的外周血单核细胞（PBMC）中克隆了鸡CD154基因全长cDNA，序列分析显示该基因cDNA全长819bp，可编码272个氨基酸。将克隆的鸡CD154全长cDNA克隆到原核表达载体pET-28a中获得表达质粒pET-28a—CD154，转化BL21（DE3）后未检测到特异性表达蛋白。进一步通过PCR获得去除信号肽（1～22aa）和跨膜区（23～46aa）的CD154基因片段（CD154d），并将其克隆到pQE80的6×His下游，在大肠杆菌中成功表达，获得分子量约27ku的融合表达蛋白6×His—CD154d。Western—blot试验证实表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。同时，将CD154基因全长cDNA插入真核表达载体pEGFP-C1的EGFP基因下游，获得真核表达质粒pEGFP—CD154，转染Hela细胞，荧光显微镜观察发现EGFP—CD154融合蛋白表达在细胞膜上，证实了鸡CD154的膜定位特性。本研究为进一步研究鸡CD154的结构与功能及其免疫佐剂效应奠定了基础。
方亮肖少波江云波袁明涛马朝志李彬方六荣陈焕春
关键词：CD154克隆
中国猪群中TTV1和TTV2感染的检测与流行现状研究
引言/目的:Torque teno virus（TTV）是近年来发现的一种新型人畜共患DNA病毒,广泛存在于人类、家畜、野生动物及一些伴侣动物体内,先前已有多个国家报道其流行情况,相关研究证明其与PCV2共感染可以促进仔...
翟少伦龙进学岳城袁世山
关键词：分子检测
文献传递
猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学分析被引量：4
2009年
为研究中国猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因变异情况,对GenBank中公布的中国不同时间和地区分离的53株PRRSV毒株的N、GP5基因序列分别进行了遗传变异分析。根据N基因构建的遗传进化树分析表明,所有的中国大陆分离株均属于美洲型(NA),中国的PRRSV分离株可分为4个亚群,亚群1中的毒株主要分布在中国东南部地区,其GP5主要中和抗原表位基因高度变异;亚群2主要为以CH1a株为代表的毒株;亚群3中的毒株与疫苗株MLV和VR2332高度一致;而台湾地区的分离株与大陆地区的分离株差异较大,单独归属于亚群4。这些研究结果对了解中国流行的PRRSV毒株的分子流行病学具有重要意义,也可部分解释MLV或灭活的CH1a疫苗对亚群1病毒感染猪保护力较低的原因,为今后制定PRRS的防控措施提供科学依据。
鑫婷侯绍华贾红丁敏郭晓宇朱鸿飞
关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒N基因GP5基因分子流行病学
猪圆环病毒2型新疆株全基因组的滚环扩增与序列分析被引量：7
2010年
滚环扩增技术是一种体外恒温DNA扩增方法,特异性好,敏感性强,已广泛应用于微生物学领域。首先采用鉴别PCR对来自新疆某地区的5份猪病料进行猪圆环病毒2型的检测,接着对检出的2份猪圆环病毒2型阳性DNA样品进行滚环扩增。滚环扩增产物经单一限制性内切酶(SacⅡ)酶切及琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示2份样品都出现了猪圆环病毒2型基因组大小的条带。对目的条带进行回收、克隆与测序,结果表明2株新疆株猪圆环病毒2型的全基因组大小皆为1768bp。遗传进化分析显示2株的基因型为PCV2a和PCV2e。
翟少伦岳城冉多良龙进学袁世山
关键词：猪圆环病毒2型滚环扩增
全选 清除 导出
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