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吉林省科技发展计划基金(200505123)
作品数:
2
被引量:6
H指数:1
相关作者:
白云深
孙红辉
王东生
杨有庚
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相关机构:
吉林大学第二医院
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发文基金:
吉林省科技发展计划基金
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相关领域:
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白云深
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PCR法扩增NOGO基因RNA干涉小发夹和体外效应研究
2006年
目的通过PCR方法获得带有U6启动子的NOGO基因RNA干涉小发夹。方法设计特异性引物,人工合成U6启动子的上游引物和带有NOGO-66反相互补序列的下游引物。PCR扩增带有U6启动子的小发夹,PCR产物与载体连接。酶切产物以1%琼脂糖凝胶进行电泳分析,释放出430bp基因片段的质粒初步确定为阳性重组质粒,并测序。结果成功地扩增了靶向NOGO基因RNAi的带有U6启动子的小发夹。结论PCR方法可快速简单、廉价地获得shRNA。
孙红辉
白云深
王东生
杨有庚
关键词:
脊髓损伤
RNA干涉
基因治疗
聚合酶链式反应
小发夹RNA抑制Nogo基因表达促进脊髓损伤修复的实验研究
被引量:6
2007年
目的 利用RNA干涉(RNAi)技术使特定的基因(Nogo)沉默,探索脊髓损伤的治疗方法。方法 设计有小发夹结构的两条DNA序列,PCR扩增带有U6启动子的小发夹,腺病毒包装重组体,转染少突胶质细胞,采用Westernblot法分析Nogo-66的蛋白表达水平。结果成功地构建了靶向Nogo基因RNAi的带有U6启动子的小发夹重组体,Nogo-66蛋白表达水平明显下降。结论 靶向RNAi小发夹重组体经腺病毒包装后,成功转染少突胶质细胞并能有效抑制Nogo-66基因的表达。
孙红辉
杨有庚
王东生
白云深
关键词:
脊髓损伤
RNA干涉
轴突再生
基因治疗
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