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西藏小型猪胰岛细胞体外分离和纯化方法: 2013年; 的确定成体西藏小型猪胰岛细胞体外分离、纯化的理想条件，为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛细胞。方法对比不同质量浓度的胶原酶（1mg／ml，2mg／ml，3mg／ml，4mg／m1）和同一质量浓度不同时间点（0min，15min，30min，45min，60min，75min，90min）分离获得胰岛细胞的数量和效果；使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心和静置4种方法纯化胰岛细胞悬液，比较最终收集到的胰岛细胞数量和效果；用DTZ染色计算胰岛细胞的纯度；用AO／PI染色计算胰岛细胞存活率。结果确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛细胞的最佳时间，胶原酶lmg／ml和2mg／ml组为45min，3mg／ml和4mg／ml组为30min，各组在最佳时间点获得胰岛细胞的数量最多的为1mg／ml组，胰岛细胞形态完整；4种纯化方法中，收集的胰岛细胞数量由多到少依次为静置组〉Ficoll400密度梯度离心组〉离心组〉淋巴分离液离心组。经AO／PI染色后检测胰岛细胞的存活率为95．00％以上。结论在组织块剪碎消化的情况下，胶原酶质量浓度lmg／ml、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛细胞，Ficoll400密度梯度离心的纯化手段收集到的胰岛细胞效果最好。; 戚文军汪亦男胡强唐华那顺巴雅尔顾为望; 关键词：西藏小型猪胰岛细胞纯化

免疫瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白对SD大鼠脂肪沉积的影响被引量：2: 2013年; 目的原核表达瘦素受体（OBR）近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验，观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响。方法设计1对带有BamHI和Hindlll酶切位点特异性引物，扩增OBR胞外近跨膜区基因片段（1705～2364bp），经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamHI和HindⅢ两酶切位点之间，构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E．coli BL21（DE3）中表达，SDS．PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物。随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠，观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响。结果SDS．PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示，在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27600左右的融合蛋白。对SD大鼠免疫0BR胞外近跨膜区重组融合蛋白后，体质量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异，而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小。结论成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白，免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积。; 刘闻吴丽红徐名衬郭日红顾为望施振旦袁进; 关键词：瘦素受体原核表达重组融合蛋白脂肪沉积

帕金森病实验动物模型研究进展: 目的帕金森病(Parkinson's disease PD)是最常见的中枢神经病变之一，临床症状有震颤、强直、运动迟缓、共济失调。目前，在60岁以上人群中其发病率达1％[1]。随着老龄化社会的到来。其发病率呈上...; 田雨光顾为望; 关键词：帕金森病动物模型

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广东省科技计划工业攻关项目(2010A030400001)

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