国家自然科学基金(30600798)
- 作品数：11 被引量：80H指数：6
- 相关作者：陈蔚文郭文峰高小玲李茹柳羊燕群更多>>
- 相关机构：广州中医药大学上海中医药大学中国中医科学院更多>>
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- 脾阳虚大鼠模型尿木糖、尿淀粉酶及整体状况变化的观察被引量：6
- 2008年
- 羊燕群郭文峰李茹柳陈蔚文
- 关键词：脾阳虚证大鼠模型尿淀粉酶
- 人参皂苷Rg1对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响被引量：1
- 2011年
- 【目的】观察人参皂苷Rg1对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽化合物的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。【方法】Caco-2细胞长满瓶底后继续培养28 d,然后给予人参皂苷Rg1(终浓度为50 mmol/L)处理,并设立空白对照组及cAMP抑制剂(Rp-8-Br-cAMP)对照组,采用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞对二肽化合物Glycyl-Sarcosine的转运能力,采用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。【结果】人参皂苷Rg1处理组Caco-2细胞15、30、60、120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量均显著高于空白对照组对应时点的量(P<0.05或P<0.01),人参皂苷Rg1与Rp-8-Br-cAMP合用组15、30、60、120 min时点均显著低于相应时点单用人参皂苷Rg1组(P<0.05或P<0.01),人参皂苷Rg1处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达显著增加(P<0.05);荧光定量PCR结果显示:人参皂苷Rg1能显著下调SLC15A1表达(P<0.05)。【结论】人参皂苷Rg1具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰胡灿温鹏高小玲李茹柳陈蔚文
- 关键词：基因表达调控转运功能细胞培养
- 理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能影响的比较被引量：2
- 2011年
- 目的:观察比较理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28d后分别给予理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用westernblot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:理中汤、人参皂苷Rg1及6-姜酚均在不同程度上表现为促进Caco-2细胞转运Glycyl-Sarcosine的作用;Caco-2细胞经理中汤/人参皂苷Rg1/6-姜酚处理24h后,细胞膜PepT1蛋白表达水平均明显增高。6-姜酚能明显上调Caco-2细胞SLC15A1表达,人参皂苷对Caco-2细胞SLC15A1表达的作用表现为下调,理中汤对Caco-2细胞SLC15A1表达作用不明显。且理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚三者作用各有特点。结论:理中汤及其成分人参皂苷Rg1、6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰胡灿刘佳高小玲陈蔚文
- 关键词：理中汤人参皂苷RG16-姜酚环磷酸腺苷
- 脾阳虚大鼠小肠黏膜病理学改变及理中汤治疗作用观察被引量：12
- 2009年
- 目的:观察脾阳虚大鼠小肠黏膜上皮细胞形态学变化,探讨脾阳虚证胃肠功能改变的组织病理学基础,并观察温阳健脾代表方理中汤的治疗作用。方法:复合因素合利血平注射法建立脾阳虚大鼠模型;通过小肠黏膜组织石蜡切片HE染色光镜检查、透射电镜观察等方法,对造模及治疗后大鼠小肠黏膜进行组织病理学观察。结果:光镜观察未见脾阳虚大鼠小肠黏膜上皮细胞有明显病理学改变;但透射电镜下小肠黏膜上皮细胞超微结构可见明显改变:上皮细胞间隙紧密连接变宽;粗面内质网间隙增宽;线粒体肿胀,嵴断裂、减少或结构模糊,甚至空泡化。理中汤治疗后上述病变有明显改善。结论:观察到脾阳虚大鼠小肠上皮细胞内细胞器的形态改变,从一个侧面反映脾阳虚证组织病理学基础;理中汤对脾阳虚证的治疗作用机制可能与改善上述表现有关。
- 羊燕群郭文峰李茹柳高小玲潘怀耿林传权陈蔚文
- 关键词：脾阳虚证组织病理学理中汤
- 理中汤对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:观察理中汤对Caco-2细胞肽转运载体(PepT1)转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予理中汤处理,并设立空白及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:理中汤处理组Caco-2细胞15,30,60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(4.52±0.57),(6.34±0.57),(7.29±0.64),(8.23±0.67)μmol/孔,高于空白对照组(P<0.05),后者分别为(2.42±0.68),(3.15±0.76),(5.62±0.20),(6.54±0.54)μmol/孔;理中汤与Rp-8-Br-cAMP合用组15,30,120 min时点分别为(2.68±0.46),(4.13±0.46),(6.73±0.43)μmol/孔,明显低于相应时点单用理中汤组(P<0.05);理中汤处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值理中汤组为(0.326±0.031),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);理中汤对Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达未见明显作用,但与cAMP抑制剂合用,理中汤能逆转Rp-8-Br-cAMP下调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达的作用。结论:理中汤具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰杨伟鹏王怡薇王彦礼胡灿温鹏高小玲陈蔚文
- 关键词：理中汤转运功能环磷酸腺苷
- 脾阳虚大鼠模型建立及理中汤疗效观察被引量：22
- 2009年
- 目的建立适用于中医"证"研究及中药药理学研究的脾阳虚大鼠模型。方法给予大鼠每日游泳、隔日注射利血平、隔日灌胃番泻叶3周,以建立脾阳虚模型,第4周～第6周灌胃温阳健脾方药理中汤,以其治疗结果验证造模效果。结果造模期间模型大鼠出现活动减少、嗜卧、畏冷蜷缩、便溏,毛色枯槁不荣等脾阳虚症状,与正常大鼠相比,体温、体重、摄食量、尿D-木糖排泄率等均有显著性差异,但病理切片未发现明显差异;6周后理中汤组与正常组比较各指标差异无显著性,但自然恢复组与正常组比较差异有显著性。结论利血平合劳倦过度/寒凉泄下法建立的脾阳虚大鼠模型一般症状和生化指标都与脾阳虚患者临床表现基本相符,用此法建立的脾阳虚大鼠模型可为脾阳虚"证"本质研究及相关方药研究提供参考。
- 羊燕群郭文峰李茹柳高小玲王静林传权徐颂芬陈蔚文
- 关键词：脾阳虚证动物模型D-木糖排泄率理中汤
- 利血平致大鼠脾虚模型尿D-木糖排泄率与肠黏膜三磷酸腺苷水平的研究被引量：22
- 2008年
- [目的]观察利血平致脾虚大鼠的病理改变情况,为在该模型上观察益气健脾方药的作用提供参考。[方法]模型组以利血平注射造模15 d,停药后再观察30 d,实验周期共45 d;另设正常组观察45 d。观察大鼠一般状态、体重、尿D-木糖排泄率、小肠黏膜三磷酸腺苷(ATP)水平、胃肠黏膜病理组织学、脏器系数等指标。[结果]模型大鼠体重和尿D-木糖排泄率与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),持续至45 d;小肠黏膜ATP水平比正常组略为降低;尿D-木糖排泄率改变与小肠黏膜ATP水平改变呈正相关;胃肠黏膜病理组织学检查未见明显改变;肝和胸腺脏器系数降低。[结论]利血平所致脾虚大鼠病变状态可持续较长时间,与益气健脾方药缓慢起效的特点相符;有肠道消化吸收功能降低的改变,并伴随肠黏膜ATP水平的降低。该动物模型可用于观察益气健脾方药改善消化吸收功能等作用。
- 郭文峰高小玲李茹柳陈蔚文
- 关键词：脾虚证
- 6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响
- 2011年
- 目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:6-姜酚处理组Caco-2细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常对照组(P<0.05),后者分别为(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/孔;6-姜酚与Rp-8-Br-cAMP合用组120 min时点为(6.92±0.67)μmol/孔,明显低于相应时点单用6-姜酚组(P<0.05);6-姜酚处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值6-姜酚组为(0.317±0.022),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);荧光定量PCR结果,6-姜酚能上调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达,但与cAMP抑制剂合用后该抑制作用被阻断。结论:6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰杨伟鹏王怡薇王彦礼胡灿温鹏高小玲陈蔚文
- 关键词：6-姜酚转运功能环磷酸腺苷
- 理中汤对脾阳虚大鼠模型PepT1及其转运功能的影响被引量：7
- 2011年
- 目的观察理中汤对脾阳虚模型大鼠小肠上皮肽转运载体蛋白1对二肽转运功能改变、肽转运载体PepT1及其mRNA表达变化的影响。方法采用利血平复合因素造模法建立脾阳虚大鼠模型,以头孢氨苄做为PepT1的转运底物,通过反相高效液相法(RP-HPLC)测定其血药浓度来反映脾阳虚大鼠小肠上皮细胞PepT1的吸收转运功能,RT-PCR测定大鼠小肠黏膜PepT1 mRNA表达,免疫组织化学方法观察大鼠小肠PepT1蛋白表达情况,同时用酶联免疫法测定小肠黏膜组织cAMP含量。结果模型组大鼠血清中cefalexin浓度明显高于正常组,经理中汤治疗后,大鼠cefalexin血药浓度与正常对照组比较无显著性差异;模型组大鼠PepT1蛋白表达明显上调(P<0.05),理中汤治疗组大鼠的PepT1蛋白表达与正常组比较未见明显差异;脾阳虚模型大鼠PepT1 mRNA表达水平较正常组明显下调(P<0.05),经理中汤治疗后,其下调趋势被逆转,与正常组比较未见明显差异;模型组大鼠小肠黏膜cAMP浓度较之于正常组,明显降低,经过理中汤治疗恢复接近正常组水平。结论脾阳虚模型大鼠小肠黏膜PepT1转运功能增强,蛋白表达上调,理中汤治疗可逆向调节这种改变。
- 郭文峰羊燕群潘怀耿刘佳李茹柳陈蔚文
- 关键词：理中汤脾阳虚证
- 脾阳虚大鼠肽转运载体蛋白表达及转运功能的改变被引量：7
- 2010年
- 目的观察脾阳虚模型大鼠小肠黏膜肽转运载体1(PepT1)的表达及其转运功能的变化。方法采用劳倦泄下合利血平复合因素造模法建立脾阳虚大鼠模型,RP-HPLC法测定cefalexin血药浓度以评价小肠黏膜PepT1的转运吸收功能,免疫组化方法观察脾阳虚大鼠肠上皮PepT1蛋白表达情况。结果十二指肠给药120min后,RP-HPLC法测定模型大鼠血清cefalexin浓度为(5.23±2.10)μg/ml,高于正常对照组的(2.52±0.47)μg/ml(P<0.01);模型大鼠小肠黏膜上PepT1蛋白表达较正常对照大鼠表达升高。结论脾阳虚证模型大鼠小肠黏膜肽转运载体PepT1表达及对cefalexin的转运能力增强。
- 郭文峰羊燕群高小玲李茹柳陈蔚文
- 关键词：脾阳虚证动物模型
