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上海市卫生局青年科研基金(2009Y113)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
陶炯
蒋雯婷
肖冰
孙维
周雅
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相关机构:
上海交通大学医学院附属新华医院
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发文基金:
上海市卫生局青年科研基金
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2011
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优化PCR体系结合毛细管电泳技术检测FMR1基因前突变与全突变
被引量:4
2011年
目的通过优化PCR并结合毛细管电泳,建立高扩增效率、高分辨率的FMR1基因CGG重复序列异常扩增检测体系。方法选择标准样本和经Southern印迹技术确定(CGG)n的正常、前突变、全突变男性和女性样本15例,进行PCR检测体系的优化。优化的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳等多种方法进行结果比较。结果经优化的PCR体系可以检测出(CGG)n大于260个拷贝的全突变男性和(CGG)n达到183个拷贝的前突变女性。毛细管电泳能够清晰分辨出相差1个CGG的两个等位基因,结果具有良好的可重复性。结论该PCR检测体系大幅度提高了普通PCR方法的扩增效率和分辨率,明显降低了对于Southern印迹技术的依赖,可以作为临床筛查FMR1基因突变的首选方法。
周雅
孙维
肖冰
韩旭
龙飞
蒋雯婷
季星
陶炯
关键词:
脆性X综合征
FMR1基因
聚合酶链反应
毛细管电泳
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