上海市卫生局青年科研基金(2009Y127)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：张玉娜王国玉倪晶叶蓓鸿袁羡更多>>
- 相关机构：上海市普陀区人民医院中国人民解放军第201医院上海市徐汇区中心医院更多>>
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- 端粒酶逆转录酶小干扰RNA对结肠癌SW480细胞体外抑制作用的观察被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨RNA干扰(RNAi)对结肠癌SW480细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的抑制效应。方法:化学合成靶向于hTERT基因的4个小分子干扰RNA(siRNA)序列,用阳离子脂质体为载体转染SW480细胞,分为siRNA1～4、siRNA阴性对照和空白对照6组。通过RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测结肠癌细胞转染后细胞hTERT mRNA和蛋白水平,并用MTS法检测细胞生长增殖。结果:siRNA1～4组hTERT mRNA相对表达量分别为0.54±0.18、0.56±0.19、0.46±0.10和0.84±0.18,端粒酶相对活性分别为0.57±0.18、0.56±0.19、0.09±0.08和0.70±0.19,siRNA1～4组hTERT蛋白相对表达量分别为0.41±0.18、0.45±0.17、0.08±0.07和0.82±0.16,其中siR-NA1～3组的hTERT mRNA表达量、端粒酶活性和蛋白表达量与空白对照组的差异有统计学意义,P<0.05。SW480细胞在转染后48h时的细胞增长平均抑制率分别为42.14%、39.12%、48.05%和35.85%。提示不同siRNA序列对SW480的转染效率不同,其中siRNA3组能显著下调hTERT mRNA和蛋白的表达水平,并能抑制端粒酶活性和促进SW480细胞凋亡,与空白对照组比较均差异有统计学意义,P<0.01。结论:靶向hTERT的RNAi能明显抑制SW480的增殖,hTERT可作为结肠癌基因治疗的靶点。
- 王国玉夏伟张玉娜李艳朱雪萍王瑛倪晶
- 关键词：结肠肿瘤
- 特异性hTERT-siRNA介导RNAi在Hela细胞中的实验研究被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨RNA干扰对宫颈癌Hela细胞人端粒酶逆转录酶基因的抑制效应。方法:化学合成靶向于hTERT基因的4个siRNA片段和1个阴性对照小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)片段,分siRNA 1-4、control siRNA和空白对照组共6个组,分别用阳离子脂质体转染法将其导入Hela细胞内,通过RT-PCR和WesternBlot方法分别检测宫颈癌细胞转染后细胞hTERT mRNA和蛋白水平,MTS法检测细胞生长增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:siRNA-3组端粒酶活性明显下降,hTERT mRNA表达水平明显下降,hTERT蛋白表达明显下降,细胞凋亡率明显升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向于hTERT的siRNA能特异性抑制宫颈癌Hela细胞hTERT基因,下调hTERT mRNA及蛋白表达水平,抑制癌细胞生长增殖,促进宫颈癌细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗研究提供实验依据。
- 袁羡王国玉倪晶张玉娜叶蓓鸿
- 关键词：人端粒酶逆转录酶HELA小干扰RNA
