上海市卫生局青年科研基金(2009Y132)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 慢病毒介导的miRNA-197-3p-siRNA对喉癌细胞系Hep-2生物学行为的影响被引量：3
- 2013年
- 目的通过构建慢病毒介导(lentivirus,LV)的miRNA-197-3p-siRNA,探讨下调miRNA-197-3p对喉癌细胞系Hep-2生物学行为的影响。方法针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体,将重组miRNA-197-3p-RNAi-LV3转染喉鳞状细胞癌Hep-2。Hep-2细胞设为干扰组(miRNA-197-3p-siRNA,MI组)、阴性对照组(negative control,NC组)和空白对照组(blank,B组);分别采用聚合酶链反应方法检测miRNA-197-3p的表达情况;用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭情况。结果 miRNA-197-3p-RNAi-LV3可显著降低miRNA-197-3p的表达。CCK8实验显示细胞增殖能力显著降低(P<0.05)。Transwell实验显示细胞侵袭能力明显减弱(P<0.05)。流式细胞仪检测表明转染后对Hep-2细胞周期及细胞凋亡均无明显影响(P>0.05)。结论 miRNA-197-3p-siRNA通过下调miRNA-197-3p的表达,可以抑制Hep-2细胞增殖,并降低其侵袭能力。
- 李俊王建中白广平周雷黄新生
- 关键词：慢病毒载体喉癌
- RNAi沉默miRNA-224-5p对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的通过慢病毒载体介导的RNA干扰技术,来探讨沉默miRNA-224-5p对人喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体,将重组miRNA-224-5p-RNAi-LV3转染喉鳞癌Hep-2。设为干扰组(miRNA-224-5p-siRNA,SI组)、阴性对照组(NC组)和空白对照组(BC组),分别采用聚合酶链反应方法检测miRNA-224-5p的表达情况,用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况、Transwell侵袭实验检测细胞侵袭情况。结果 miRNA-224-5p-RNAi-LV3可显著降低miRNA-224-5p的表达,转染后Hep-2细胞增殖能力显著降低,细胞侵袭能力明显减弱,细胞周期及细胞凋亡均未见明显影响。结论 RNAi沉默miRNA-224-5p可以抑制Hep-2细胞增殖,并降低其侵袭能力。
- 李俊王建中黄新生白广平童华周雷刘建平
- 关键词：微RNAS慢病毒载体
- 喉鳞癌中microRNA-197表达水平的研究被引量：3
- 2013年
- 目的:检测喉鳞癌细胞株Hep-2中microRNAs(miRNAs)的表达谱,并测定喉鳞癌组织中miRNA-197(miR-197)的表达水平。方法:采用miRNAs芯片技术检测喉鳞癌细胞株Hep-2、正常人支气管上皮细胞株HBEAs-2B中miRNAs的表达,得到miRNAs表达谱。根据miRNAs芯片结果,挑选Hep-2中表达显著上调的miR-197,并采用实时定量逆转录聚合酶链反应(realtime quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)验证miR-197在20例喉鳞癌组织及10例癌旁正常组织中的表达。结果:miRNAs芯片结果表明,Hep-2细胞株中有166个miRNAs上调,如miR-197、miR-133b等;47个miRNAs下调,如miR-519d、miR-20b等。RT-PCR检测结果显示,miR-197在喉鳞癌组织中表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。结论:miR-197在喉鳞癌中表达显著上调,可能作为喉鳞癌的特异性miRNA在喉鳞癌的发生发展过程中有重要作用。
- 李俊王建中黄新生白广平童华
- 关键词：MICRORNAS喉鳞癌芯片
