温州市科技局资助项目(Y20100012)
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 相关作者：梅劲林贤丰邵培刚王辉张建色更多>>
- 相关机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：温州市科技局资助项目浙江省教育厅科研计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 灌注法制备离体大鼠心脏脱细胞基质被引量：5
- 2012年
- 目的探索制备离体大鼠心脏脱细胞生物支架材料的新方法,为心脏组织工程研究提供三维立体天然支架。方法取30只成年SD大鼠心脏,运用冻融加化学萃取的组织工程学方法(胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠和曲拉通X-100)处理离体大鼠心脏,同时观察心脏大体形态及颜色变化,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析;HE染色,免疫荧光法,扫描和透射电镜进一步检测鉴定脱细胞支架的生物学特征。结果心脏脱细胞支架外观透明,包膜完整,维持心脏三维立体结构,肉眼可见心脏内脉管系统;脱细胞支架DNA残留量不及对照组的3%;HE染色、扫描和透射电镜结果显示,心脏脱细胞生物支架去细胞彻底,细胞外基质网状结构保留完整;免疫荧光结果表明,胶原、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留。结论运用冻融加化学萃取法所制备的离体心脏脱细胞生物支架去细胞彻底,细胞外基质保留较完整,是较为理想的心脏三维立体生物支架材料。
- 彭蒙蒙林贤丰邵培刚王辉张建色王志斌梅劲
- 关键词：脱细胞细胞外基质免疫荧光
- 去细胞全肾生物支架的制备与鉴定被引量：13
- 2012年
- 目的通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。方法健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液、0.05%胰蛋白酶溶液、1%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、1%Trition X-100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分,进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肾内血管分布情况。结果去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示去细胞组血管较稀疏,分支完整、清晰。结论联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组织工程肾生物支架的方法。
- 张建色王辉邵培刚林贤丰彭蒙蒙薛向阳梅劲
- 关键词：去细胞细胞外基质血管铸型免疫荧光
- 器官脱细胞化的研究进展被引量：1
- 2012年
- 异体器官移植是彻底治疗器官衰竭的有效方法。然而，人们对移植器官的需求量远远大于器官的供给量，其在一定程度上迫使研究者们加快对脱细胞技术领域的研究。近几年，随着脱细胞技术从组织水平过渡到器官水平，在组织工程／再生医学领域出现一个具有发展前途的器官功能置换方式。2008年，Ott等学者利用Langendorff装置成功地对心脏进行了脱细胞化，且通过心肌细胞再植入使人造心脏产生搏动。随后，有不少学者对各器官进行脱细胞化技术探索。由于各器官的组织结构不相同，其脱细胞方法也不相同，本文就器官脱细胞化的研究动态及其处理方法综述如下。
- 彭蒙蒙梅劲
- 关键词：器官衰竭脱细胞LANGENDORFF人造心脏
- 离体大鼠胰腺去细胞生物支架的制备与鉴定被引量：6
- 2012年
- 目的通过离体灌注加浸泡的方法制备大鼠胰腺去细胞生物支架(PDBC),为胰岛和胰腺的组织工程研究提供新型天然生物支架。方法健康成年大鼠20只,以物理冻融及灌注洗脱法(脱氧胆酸钠+DNAase),采用胆管、胰管联合逆向在体灌流法获取胰腺去细胞生物支架。并通过基因组DNA定量定性分析,组织化学染色、免疫荧光组织化学染色、荧光积分吸光度分析、透射电镜观察等进一步测定细胞残留以及观察去细胞支架,如胶原IV、纤维连接蛋白和层黏连蛋白等成分的保留。结果 DNA定性分析显示,实验组未见明显DNA条带,对照组DNA条带可达100bp,定量检测实验组DNA残留不足对照组的5%;组织化学染色和透射电镜观察均表明,去细胞支架无细胞残留,细胞外支架连续性完好,脉管支架保存完整;免疫荧光结果表明,胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留。结论运用冻融加浸泡灌注制备的胰腺去细胞生物支架,细胞去除彻底,细胞外支架保留完好。
- 林贤丰邵营宽王辉邵培刚严夏霖陈杨金可可张建色梅劲
- 关键词：去细胞胰腺细胞外基质免疫荧光染色
