湖南省自然科学基金(07JJ6043)
- 作品数:3 被引量:11H指数:3
- 相关作者:陈静黄进华鲁建云康健欧阳泽辉更多>>
- 相关机构:中南大学湘雅三医院湖北中医药高等专科学校南京医科大学更多>>
- 发文基金:湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 光老化成纤维细胞分泌的细胞外基质对HaCAT细胞增殖影响及FAK/PI3-K/Akt信号途径的作用机制研究被引量:3
- 2010年
- 目的探寻UVB诱导的衰老(UVB-SIPS)成纤维细胞分泌的细胞外基质(ECM)对HaCAT细胞增殖的影响以及FAK和PI3-K/Akt信号途径在其中所起的作用。方法连续亚细胞毒剂量UVB辐照诱导皮肤成纤维细胞衰老,制备由衰老成纤维细胞分泌的ECM,接种HaCAT细胞至ECM包被的平皿,观察空白ECM、未衰老的ECM和光老化的ECM对HaCAT增殖、凋亡等功能的影响。免疫印迹法检测细胞内FAK和Akt磷酸化水平的时相性变化。在干预研究中,采用细胞松弛素D和渥曼青霉素阻断FAK和PI3-K/Akt信号通路,对比观察对细胞功能和信号的影响。结果①3组均可见Akt轻度但无显著差异的磷酸化的增加;但U-VB-SIPS组的FAK信号发生最快最明显的增加。②2μM细胞松弛素D可明显抑制FAK和Akt磷酸化;同时,细胞的凋亡率也显著增加。③以400nM渥曼青霉素预处理细胞,明显抑制Akt磷酸化,同时3组的凋亡水平分别达15.8%、23.4%和21.8%。④细胞松弛素D和渥曼青霉素均明显抑制了光老化的ECM促细胞增殖效应。结论在本系统中FAK/PI3-K/Akt信号途径发挥抑制细胞凋亡的作用,阻断该信号通路可完全破坏UVB-SIPS成纤维细胞分泌的细胞外基质对HaCAT的促增殖作用。
- 杨盛波黄进华陈静鲁建云郑蓉康健毕志刚
- 关键词:光老化细胞外基质黏着斑激酶
- ERK信号通路及转化生长因子-β1在强脉冲光对成纤维细胞增殖影响中的作用被引量:5
- 2010年
- 目的:探讨强脉冲光对体外培养人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其相关机制。方法:分离培养人正常皮肤成纤维细胞,采用不同能量强脉冲光照射细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况,蛋白质免疫印迹法测定磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)变化,ELISA法检测转化生长因子(TGF)-β1分泌变化。在抑制剂干预研究中,应用ERK抑制剂PD98059、强脉冲光+PD98059分别处理成纤维细胞,观察细胞增殖及磷酸化ERK的变化。结果:与未照射组比较,10、18、27、36 J/cm^2的强脉冲光对成纤维细胞增殖无影响(P>0.05),当能量为72J/cm^2时,成纤维细胞的增殖活性明显增强(P<0.05),磷酸化ERK表达明显减少,TGF-β1分泌显著增加(P<0.05);ERK抑制剂PD98059能明显抑制成纤维细胞的增殖和降低磷酸化ERK水平。结论:72J/cm^2强脉冲光可促进成纤维细胞增殖,其机制是通过促进TGF-β1分泌,而不是通过ERK信号通路。
- 耿雪瑞黄进华康健欧阳泽辉于小峰鲁建云陈静谭丽娜
- 关键词:强脉冲光成纤维细胞细胞增殖ERK信号通路转化生长因子-Β1
- 强脉冲光照射对成纤维细胞分泌TGF-β_1的影响及信号机制研究被引量:4
- 2010年
- 目的研究强脉冲光(intense pulsed light,IPL)照射对皮肤成纤维细胞分泌TGF-β1的影响及信号机制。方法分离培养皮肤原代成纤维细胞,分为两组:一组为IPL治疗组,IPL照射能量密度分别为0、10、18、27、36和36J/cm2×2(36J/cm2的IPL重复治疗2次),采用Elisa法检测细胞培养上清液中TGF-β1的含量,Western印迹法检测JNK和P38的磷酸化;另一组为IPL+抑制剂组,包括IPL对照,IPL+SP600125(JNK抑制剂),IPL+SB203580(P38抑制剂),在加入抑制剂2h后,36J/cm2的IPL照射,48h后检测培养上清液中TGF-β1的含量。结果 IPL照射后,IPL治疗组的TGF-β1的浓度在10、18、27和36J/cm2时分别与阴性对照组相比较均减少,而在36J/cm2×2时与阴性对照相比较增高;IPL治疗组中JNK和P38可被激活,随剂量增加,先增强后减弱,都在10J/cm2表达最强。IPL+抑制剂组上清液中TGF-β1的含量,IPL+SP600125与对照相比较减少(P<0.05);IPL+SB203580与对照相比有明显增多(P<0.05)。结论强脉冲光在较低能量密度(≤36J/cm2)时抑制皮肤成纤维细胞TGF-β1的分泌,较高能量密度(36J/cm2×2)时能促进TGF-β1的分泌;蛋白激酶JNK、P38在IPL影响TGF-β1的分泌过程中可能起着重要作用,其中JNK促进其分泌,而P38抑制其分泌。
- 鲁建云于小峰黄进华欧阳泽辉耿雪瑞陈静左成忻向亚平杨盛波谭丽娜康健
- 关键词:强脉冲光成纤维细胞JNKP38TGF-Β1