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MGMT基因启动子甲基化与膀胱尿路上皮癌生物学行为关系的研究被引量：1: 2010年; 目的检测膀胱尿路上皮癌组织中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因启动子甲基化状态,探讨MGMT甲基化与其蛋白表达水平以及肿瘤生物学行为之间的关系.方法应用免疫组织化学SP法和甲基化特异性PCR（MSP）分别检测60例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱黏膜组织中MGMT蛋白表达情况和MGMT基因启动子甲基化状态.结果膀胱癌组织中MGMT蛋白阳性表达率为35.0 %（21/60）,低于正常膀胱组织（86.7 %,13/15,P〈0.01）.膀胱癌组织中MGMT甲基化阳性率为45.0 %（27/60）,明显高于正常膀胱组织（0.0 %,0/15,P〈0.01）;MGMT启动子甲基化与其蛋白表达呈负相关（r = -0.453,P〈0.01）;并且高级别膀胱癌中MGMT甲基化阳性率（70.6 %,12/17）要比低级别膀胱癌高（34.9 %,15/43）,（P〈0.05）,而MGMT甲基化与膀胱癌临床分期无明显关系.结论 MGMT启动子甲基化可能参与了膀胱尿路上皮癌的发生和肿瘤分化,MGMT启动子甲基化有望成为预判膀胱癌预后的重要标记.; 吴准闫永吉李俊刘双林马鑫李宏召王保军史涛坪张旭; 关键词：膀胱癌 MGMT基因基因表达与调控

醛固酮瘤中CYP11B2／B1基因多态性与CYP11B2基因mRNA表达的相关性研究被引量：2: 2010年; 目的:探讨醛固酮瘤中CYP11B2,CYP11B1基因多态性与CYP11B2基因mRNA表达及术前血浆醛固酮浓度、收缩压、舒张压等临床表型的关系。方法:20例正常肾上腺和69例醛固酮瘤组织标本,分别取自2006年5月～2007年11月在华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科行肾癌根治术和肾上腺手术切除的患者。采用Taqman探针法检测DNA多态性,包括CYP11B2基因的rs1799998、rs4539及CYP11B1基因的rs6410和rs6387;采用两对独立的PCR检测CYP11B2基因intron2多态性(野生型/转位型)。采用syb greenReal time RT-PCR检测CYP11B2基因mRNA表达。在Rstatistics program 2.7.0程序包中使用SNPassoc 1.5-3和Haplo.stats 1.3.8分析CYP11B2和CYP11B1基因多态性及单体型与CYP11B2基因表达量和血浆醛固酮浓度、收缩压、舒张压等临床表型的关系。结果:单体型分型中,Global Score统计显示:CYP11B2-CYP11B1单体型与CYP11B2mRNA表达量增加相关(global-stat=16.175,df=8,P=0.04),与血清醛固酮水平相关(global-stat=20.407,df=8,P=0.009)。但与收缩压和舒张压不相关(分别P=0.34,P=0.54);多元回归分析中发现单体型H1(AGAConvT)和H3(AGAWtC)与CYP11B2基因mRNA的表达上调相关(经过Bonferroni校正后分别P=0.002;P=0.003),而H6(AGGWtT)、H10(AAAWtT)和H16(GAAWtT)与过多的醛固酮分泌相关(经过Bonferroni校正后分别P<0.0005;P=0.002;P=0.0015);但未见有单体型与收缩压和舒张压相关(均P>0.05)。结论:CYP11B2和CYP11B1基因多态性可能通过上调CYP11B2的表达,导致醛固酮瘤患者血清醛固酮水平的升高。; 李宏召王保军马鑫史涛坪欧阳金芝张国玺邓西元闫永吉吴准李俊张旭; 关键词：CYP11B2 MRNA 临床表型

经脐单孔腹腔镜肾切除术2例报告被引量：59: 2009年; 目的:初步探讨经脐单孔腹腔镜肾切除术的临床可行性和安全性。方法:2009年6～7月,对2例患者行经脐入路单孔腹腔镜肾切除术,1例右肾癌患者行单孔腹腔镜右肾根治性切除术,1例左侧积水性无功能肾患者行单孔腹腔镜单纯左肾切除术。患者取45°健侧卧位,作2.5 cm绕脐"Z"形皮肤小切口,Hasson法制备经腹腔入路单孔腹腔镜工作通道切口,置入单孔三通道腹腔镜操作通道。从单孔通道分别置入5 mm腹腔镜和手术器械,按照标准的腹腔镜根治性肾切除术和单纯肾切除术的手术操作步骤完成手术,切除标本均从脐部切口取出。结果:2例手术均顺利完成,手术时间分别为210 min和90 min,估计出血量分别为100ml和20 ml,无中转开放及标准三孔腹腔镜手术,术中无并发症发生,短期随访无术后并发症发生。结论:小样本的临床研究结果初步显示了单孔腹腔镜肾切除术良好的安全性和可行性。然而,该术式的临床治疗效果尚需大样本中远期随访和对照研究予以证实。; 张旭马鑫朱捷董隽蔡伟高江平史涛坪王保军徐阿祥李宏召; 关键词：单孔腹腔镜肾切除术

醛固酮对大鼠主动脉bax基因表达的影响被引量：1: 2010年; 目的研究醛固酮对大鼠主动脉bax基因表达的影响。方法32只SD大鼠随机分为空白对照组、腺瘤组、腺瘤＋依普利酮组和腺瘤＋肼苯哒嗪组。在每只大鼠皮下埋植的微量渗透泵内注入空白溶剂或醛固酮。8周后通过免疫组化、RT—PCR和Western印迹检测主动脉bax基因的表达。结果与对照组相比，腺瘤组大鼠主动脉bax mRNA和蛋白表达都显著上调（P〈0．05）；依普利酮能够抑制醛固酮对bax基因的诱导作用（P〈0．05）；而肼苯哒嗪虽然可以使大鼠收缩压下降，但不能阻止醛固酮对bax基因的作用。结论醛固酮通过诱导bax基因表达，调节血管平滑肌细胞凋亡和干预细胞周期进程，可能是其导致血管重构的机制之一。; 闫永吉王超吴准李俊马鑫李宏召王保军史涛坪龚道静倪栋张旭; 关键词：醛固酮 BAX基因依普利酮肼苯哒嗪基因表达与调控

后腹腔镜保留肾单位手术切除较大肾脏错构瘤被引量：10: 2010年; 目的:探讨后腹腔镜保留肾单位手术切除较大肾脏错构瘤的病例选择、手术方法和临床效果。方法:共15例确诊为肾脏错构瘤患者,其中男6例,女9例,年龄26～59岁,平均39岁。左侧6例,右侧9例。肿瘤直径5 cm×7 cm～1 6 cm×1 2 cm,最大直径平均8 cm。所有患者均行后腹腔镜保留肾单位手术。观察手术时间、术中出血量、术后住院天数和术中术后并发症及手术效果。结果:1 5例手术全部成功。平均手术时间为70(55～95)min,平均热缺血时间24(13～35)min。平均出血量35(20～60)ml。平均术后住院时间为7(6～9)天。围手术期无并发症。结论:后腹腔镜肾保留肾单位手术对一些较大的肾错构瘤患者仍然安全可行,创伤小,患者恢复快,值得选择性地推广使用。; 李宏召张旭马鑫陈光富蔡伟宋涛董隽杨勇王保军史涛坪艾星闫永吉胡东亮; 关键词：腹腔镜保留肾单位手术肾脏错构瘤

后腹腔镜下根治性肾切除术及其应用解剖学研究被引量：25: 2008年; 目的总结后腹腔镜下根治性肾切除术，并对镜下肾周区域相关解剖结构进行研究。方法2006年1月至2008年3月行后腹腔镜下根治性肾切除术85例。肿瘤位于左肾38例，右肾47例；肿瘤直径2．5～10．5cm，平均（5．5±1．7）cm；T1N0M0 74例，T2N0M0 11例。根据肾筋膜外切除原则，在“两个间隙、上下两极间”分离切除患肾，腹侧为肾旁前间隙（后腹膜与肾前筋膜之间），背侧为腰肌前间隙（肾后筋膜与腰肌筋膜之间），上极达膈下，下方到髂窝。术中辨认重要的解剖结构：后腹膜及其返折、肾前筋膜、侧锥筋膜、肾后筋膜、腰大肌及重要血管。结果除1例因与周围粘连严重中转开放手术外，其余均获得成功。手术时间50～165min，中位数65min。估计失血量25～600ml，中位数58ml。术中腹膜破裂5例，肾蒂周围小血管损伤出血6例，无重要脏器及大血管损伤。术后平均随访10（2～25）个月，均无瘤生存，无局部复发或发生穿刺通道种植转移。结论后腹腔镜下根治性肾切除术时，熟悉重要的镜下解剖结构有利于提高手术安全性、减少副损伤。; 张旭王超马鑫李宏召张国玺居正华王保军史涛坪艾星闫永吉吴准李俊; 关键词：后腹腔镜肾肿瘤根治性肾切除术

肾上腺醛固酮腺瘤大鼠模型的建立: 2012年; 目的构建肾上腺醛固酮腺瘤大鼠模型.方法 16只SD大鼠随机分对照组和醛固酮腺瘤组,在ALZET 2004微量渗透泵储药仓内分别注入醛固酮溶液或空白溶剂,然后将其埋于大鼠背部皮下.ALZET 2004微量渗透泵可以持续灌注4周,为使醛固酮作用时间达到8周,4周后更换渗透泵1次,同时尾套法测量大鼠尾动脉收缩压;8周后,放免法检测血浆醛固酮浓度和肾素活性.结果 3周后,与对照组大鼠相比,腺瘤组大鼠收缩压开始升高,第7周达到顶峰,之后维持在高水平;腺瘤组大鼠血浆醛固酮的浓度显著升高(P<0.01),肾素活性被抑制(P<0.01).结论大鼠皮下埋植微量渗透泵灌注醛固酮,可以成功构建大鼠醛固酮腺瘤模型.; 闫永吉陆义芹王保军史涛坪王光张海燕; 关键词：醛固酮腺瘤动物模型

血管紧张素Ⅱ受体在肾上腺产醛固酮腺瘤中的表达研究被引量：1: 2010年; 目的:研究血管紧张素Ⅱ受体AT_1R和AT_2R在肾上腺产醛固酮腺瘤(APA)中的表达。方法:通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例APA及瘤旁组织和12例正常肾上腺组织中AT_1R和AT_2R mRNA表达,采用免疫组织化学染色方法检测组织石蜡切片中AT_1R和AT_2R蛋白表达情况。结果:AT_1R在腺瘤、瘤旁及正常肾上腺组织中的表达无明显差异。AT_2R在APA组织中的表达低于正常肾上腺组织(P<0.05)。将AT_2R mRNA表达量与患者临床数据作相关性分析,提示AT_2R的表达与患者血浆醛固酮浓度负相关(r=-0.467,P<0.05),与血浆肾素活性正相关(r=0.604,P<0.05)。结论:AT_2R表达下调可能与肾上腺产醛固酮腺瘤原发性醛固酮增多症的发病相关。; 倪栋吴准王保军张国玺闫永吉龚道静李俊欧阳金枝张旭; 关键词：原发性醛固酮增多症肾上腺皮质腺瘤

5-氮杂脱氧胞苷与曲古抑菌素A对膀胱癌细胞株ALDHla2基因表达及凋亡的影响被引量：3: 2010年; 目的探讨5-氮杂脱氧胞苷（5-Aza—dC）与曲古抑菌素A（TSA）对膀胱癌细胞中抑癌基因ALDHla2启动子甲基化状态和基因表达及细胞凋亡的影响。方法使用5-Aza—dC、TSA处理RT-4、253J、5637、BIU-87和T24后，应用甲基化特异性PCR（MSP）法、逆转录PCR（RT—PCR）法、Western blot法分别检测这5株膀胱癌细胞经药物干预前后ALDHla2甲基化状态及基因表达情况，应用流式细胞学检测干预前后5株膀胱癌细胞株的凋亡情况。结果在5株膀胱癌细胞中，ALDHla2基因表现为高甲基化表达受到抑制，TSA不影响甲基化状态，5-Aza—dC可逆转高甲基化状态并恢复基因表达，联合给予5-Aza—dC和TSA的作用和单独给予5-Aza．dC相似；TSA和5-Aza—dC均可诱导膀胱癌细胞株凋亡，早期凋亡是膀胱癌细胞株死亡的主要方式，5-Aza—dC和TSA有协同作用，3个实验组与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论在5株膀胱癌细胞株中，ALDHla2基因启动子甲基化可能是导致其基因失活的主要原因；5-Aza．dC单独作用和5-Aza—dC及TSA联合应用效果相似，均能恢复基因重新表达进而诱导膀胱癌细胞株的早期凋亡。; 居正华应敏刚艾星史涛坪王保军王超张国玺张旭; 关键词：膀胱肿瘤 5-氮杂脱氧胞苷曲古抑菌素A

醛固酮及其受体拮抗剂对大鼠主动脉平滑肌TGF-β1表达的影响被引量：2: 2009年; 目的观察醛固酮及其受体拈抗剂对大鼠主动脉平滑肌转化生长因子-β1（TGF—β1）表达的影响，初步探讨原发性醛固酮增多症发生血管重构的可能机制。方法采用皮下给药的方法建立醛固酮增多症模型，其中醛固酮组经微量渗透泵持续释放醛固酮（1ug／h）；拮抗组除给予等量醛固酮外，每13行螺内酯灌胃100mg／（kg·d）；对照组仅泵空白溶剂。尾套法检测大鼠血压，4周后处死所有大鼠，测定血钾、钠、醛固酮浓度及血浆肾素活性。分别采用RT—PCR、Western印迹检测主动脉平滑肌TGF-β1基因的表达。结果①醛固酮组大鼠血压明显升高，血钾下降，血浆肾素活性降低，与对照组相比差异具统计学意义（P〈0．01）；②醛固酮组主动脉平滑肌TGF-β1基因的表达水平明显高于对照组（P〈0．01）。螺内酯可抑制醛固酮的上述作用（P〈0．01）。结论醛固酮及其受体拮抗剂螺内酯可能通过调节血管平滑肌TGF—β1的表达，从而影响血管重构的发生。; 王超欧阳金芝闫永吉马鸣居正华王保军史涛坪张国玺马鑫李宏召吴准徐华张旭; 关键词：醛固酮螺内酯血管平滑肌

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