河北省教育厅项目(2004107)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- 人工伴侣辅助溶菌酶复性的影响因素
- 2010年
- 为了获得人工伴侣辅助蛋白质复性方法的广泛应用,本文以二硫苏糖醇还原、盐酸胍变性的溶菌酶为目标蛋白质,优化复性过程中的一些条件。首先确定了溶菌酶浓度为0.06mg/mL时,复性的最佳氧化还原体系GSSG/GSH均为3 mmol/L;然后证明了要达到较高的复性收率,在水浴环境下,需要较长的时间和较大的β-CD浓度(24 h,CTAB/β-CD为1.2mmol/L:14.4 mmol/L),收率可达90%以上。而在摇床环境下,利用较短时间和较低的β-CD浓度(1 h,CTAB/β-CD为1.2 mmol/L:4.8 mmol/L)就可以达到一定的复性收率(70%以上);进一步实验证明,若想在1 h内达到理想的复性效果,可以选用1.2 mmol/L:4.8 mmol/L的CTAB/β-CD,摇动10 min,然后保持静止,可达到70%以上的收率。
- 贾长虹唐红梅常丽新张一江
- 关键词:蛋白质复性溶菌酶人工伴侣