贵州省科学技术基金(J[2013]2110)
- 作品数：44 被引量：134H指数：6
- 相关作者：汤德元曾智勇李达韦冠东王洪光更多>>
- 相关机构：贵州大学贵州省动物疫病预防控制中心更多>>
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- 多重PCR快速鉴别伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒的研究
- 根据GenBank中相关的基因序列,设计了3对引物分别用于扩增PRVTK、gB、gE基因的部分片段。对样品中的PRVDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,PRV野毒得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为282...
- 郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰刘建王洪光
- 关键词：PRV多重PCR
- 贵州黑山羊坏死杆菌病的诊治被引量：1
- 2014年
- 坏死杆菌病是由坏死梭杆菌引起的可侵害家畜、家禽和野生动物的一种传染病,多为慢性且呈散发或地方性流行,在山羊临床上表现为腐蹄病、坏死性皮炎、坏死性肝炎、坏死性口炎（白喉）、坏死性乳房炎等多种病征,贵州本地黑山羊坏死杆菌感染病例少见报道。2013年11月6日,贵州某本地山羊养殖基地饲养的黑山羊发生以蹄冠部及体表皮肤化脓、坏死、流出的黄黑色坏死组织分泌物有突出臭味,
- 李达汤德元李春燕曾智勇郝飞刘建王洪光
- 关键词：坏死杆菌病坏死性皮炎诊治坏死性乳房炎坏死梭杆菌坏死性肝炎
- PRV、PCV2与PPV三重PCR检测方法的建立与初步应用被引量：5
- 2015年
- 为建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)与猪细小病毒(PPV)的三重PCR方法,根据Gen Bank登录的病毒相关基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上3种病毒的PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192 bp(PRV)、255 bp(PCV2)和759 bp(PPV)。对PRV、PCV2和PPV的核酸检测最低浓度分别为:2.5×10-2,2.2×10-3和3.7×10-2ng,证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性。应用该方法对56份临床样品进行检测发现,PRV、PCV2和PPV的阳性率分别为16.1%、50.0%和19.6%,二重感染率为12.5%,三重感染阳性率为3.6%。该方法的成功建立为快速高效地检测以上3种病毒提供了有效手段。
- 王洪光李绍洪汤德元曾智勇李春燕郝飞刘建李达韦冠东
- 关键词：猪伪狂犬病毒猪细小病毒三重PCR
- 某规模化猪场猪繁殖障碍性疫病ELISA及六重PCR的检测分析
- 2015年
- 为了解贵州省某规模化猪场6种繁殖障碍性疫病的感染状况,试验采用ELISA试剂盒对送检的血清样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒(PCV-2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)抗体水平的检测,同时对送检的组织病料进行六重PCR检测。结果表明:CSFV、PRRSV、PCV-2、JEV、PRV和PPV的抗体阳性率分别为93.2%、52.7%、49.4%、83.8%、87.3%和78.8%,其中PRRSV免疫效果较差;另外,该猪场未免疫PCV-2疫苗,但是其抗体阳性率相当高,血清学检测结果显示,该猪场很可能存在PRRSV和PCV-2感染;送检的组织病料经六重PCR检测结果显示,该猪场存在PRRSV和PCV-2野毒感染。说明该猪场应加强猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病的预防工作。
- 罗险峰张华汤德元马萍李春燕曾智勇刘建郝飞李达
- 关键词：规模化猪场繁殖障碍性疫病ELISA抗体水平
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立被引量：6
- 2014年
- 为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪流感病毒(SIV)二重RT-PCR方法,研究根据GenBank登录的相关病毒基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上2种病毒的RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为364 bp(PRRSV)和981 bp(SIV)。通过实验证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性,对PRRSV和SIV的核酸检测最低浓度分别为3.2×10-3 ng和2.7×10-3 ng。应用该方法对32份临床样品进行检测发现,PRRSV阳性率为43.8%,SIV阳性率为31.3%,二重感染率为9.4%。该方法的成功建立为快速高效地检测以上2种病毒提供了有力手段。
- 王洪光汤德元曾智勇罗险峰李春燕郝飞刘建李达
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪流感病毒
- 伪狂犬病病毒Guizhou-DY株的分离鉴定及致病性研究被引量：37
- 2013年
- 通过采集疑似猪伪狂犬病流产胎儿病料，采用细胞接毒分离培养、病毒蚀斑纯化、病毒的形态结构观察、易感动物接种试验和病毒核酸鉴定分离到1株伪狂犬病病毒（PRV），命名为PRVGuizhou—DY株（GenBank登录号为JX417716）；为了摸清其理化特性，进一步对Guizhou—DY分离株进行了耐热、耐酸及脂溶性敏感性试验、核酸类型鉴定及病毒毒价测定，同时进行病毒致病性试验。分离鉴定结果表明：病料接种Vero细胞盲传至第2代时产生明显CPE，盲传至第4代可出现稳定的CPE；病毒粒子在电镜下呈椭圆形、有囊膜、直径为120～180nm，核内可见呈晶格状排列的病毒包涵体；病毒悬液接种家兔能引起家兔奇痒、麻痹死亡；理化特性研究表明：该病毒是一种耐热不耐酸且对氯仿敏感的DNA病毒，gE全基因序列与PRVGZ—Z1株、Fa株及Ea株的相似性分别为97．60A、98．9％和99．4％，其TCID50为10-9.71·100μL-1，PFu为109·mL-1. 攻毒组猪体温升高，临床症状较为明显，在攻毒后第5天开始出现中和抗体，第21天达到最高。该研究可为PRV病原学研究提供参考。
- 郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰甘振磊刘建王洪光
- 关键词：伪狂犬病病毒
- 贵州某动物园羊驼坏死梭杆菌感染的诊治被引量：2
- 2017年
- 2016年1月29日,贵州某动物园有羊驼4只,4~5岁,其中3只羊驼出现跛行,检查发现：发病羊驼跖关节部体表皮肤发生化脓、坏死,伴有明显臭味。根据临床症状和实验室诊断,确诊为坏死梭杆菌感染所引起的羊驼皮肤溃疡。诊治结果报告如下。
- 胡玲玲汤德元曾智勇黄涛李达韦冠东龙冬梅
- 关键词：坏死梭杆菌动物园羊驼诊治皮肤溃疡
- 1例牛传染性支原体肺炎的诊断
- 2015年
- 2014年9月,贵州省桐梓县某养牛场发生刚引进犊牛的相继死亡现象,该牛场本次从山东某牛场共引进犊牛31头,引进后的第一个月内发生6头牛的相继死亡,主要症状表现为精神沉郁,卧地不愿站立;食欲下降,咳嗽;部分牛只继发关节炎,表现跛行、关节脓肿等;发病初期体温升高至41℃,后期体温略偏高.确诊为牛传染性支原体肺炎感染.
- 李达李绍洪汤德元曾智勇王洪光韦冠东王伟丞代振江
- 关键词：支原体肺炎传染性犊牛养牛场症状表现食欲下降
- 伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究
- 2013年
- 根据GenBank公布的伪狂犬病病毒GDSH株(EF552427)的gE基因序列设计1对特异引物,对伪狂犬病病毒Guizhou-DY分离株的gE基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-TgE636,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将gE基因主要抗原表位区亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建原核表达质粒pET-32a(+)-gE636,并将其转化至BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约42.7 ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定的抗体,该研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰甘振磊刘建王洪光
- 关键词：伪狂犬病病毒GE基因原核表达免疫原性
- 某牛场牛支原体肺炎的诊治被引量：1
- 2016年
- 1发病情况
贵州省某牛场存栏数4 000余头,2015年12月初开始出现个别牛发病现象,主要表现为精神沉郁、食欲减退,体温升高（41℃~42.5℃）,并伴有咳嗽、流涕,个别牛口腔、鼻镜等部位出现水泡。起初怀疑是天气变冷感冒所致,通过加强饲养管理并与抗生素拌料饲喂,病情没有好转,
- 龙冬梅汤德元曾智勇黄涛李达韦冠东胡玲玲
- 关键词：食欲减退鼻镜口蹄疫病毒病理剖检变化
