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慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织表达蛋白质组的变化被引量：2: 2011年; 目的:比较慢性间歇性缺氧大鼠与正常大鼠肾脏组织蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织中的差异表达蛋白。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和慢性间歇性缺氧大鼠的肾脏组织蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinum v5.0软件分析,选取4个差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与慢性间歇性缺氧相关的差异表达蛋白斑点112个;经质谱鉴定出2个有意义的差异表达的蛋白斑点,慢性间歇性缺氧组表达量下调的差异蛋白质点1个,即线粒体ATP合成酶δ亚基;上调的差异蛋白质点1个,即脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1。结论:初步鉴定了与大鼠肾脏组织慢性间歇性缺氧损伤相关的差异蛋白,其表达的变化可能通过多种途经影响肾脏功能,该结果为慢性间歇性缺氧导致肾功能损害的发病机制研究提出了新的思路。; 张春燕杨烨陈燕李洪赵春玲; 关键词：慢性间歇性缺氧肾脏双向凝胶电泳

慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织蛋白质组表达变化的初步研究: 2011年; 目的比较慢性间歇性缺氧（CIH）大鼠与正常大鼠肾脏组织蛋白质双向电泳图谱，寻找和鉴定CIH大鼠肾脏组织中的差异蛋白表达谱。方法以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）为第二向，分别对正常对照大鼠（n=5）和CIH大鼠（n=5）肾脏组织蛋白质样品进行二维分离。二维电泳（2-DE）图谱经ImageMaster 2D Platinum 5．0软件分析，选取CIH组4个差异蛋白点，用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）进行鉴定。结果通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析，与CIH相关的差异表达蛋白斑点为112个。3个蛋白斑点经质谱鉴定为有意义的差异表达，下调的差异点1个，即线粒体ATP合成酶8亚基；上调的差异点2个，分别为儿茶酚-O-甲基转移酶、脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶。结论初步鉴定了与大鼠肾脏组织CIH损伤相关的差异蛋白，其表达的变化可能通过多种途经影响肾脏功能，这为CIH导致肾功能损害的发病机制研究提供了新的思路。; 张春燕杨烨陈燕李洪赵春玲; 关键词：蛋白质组学蛋白质组慢性间歇性缺氧肾脏双向凝胶电泳

大鼠肾脏组织蛋白质组双向电泳分离体系的建立被引量：1: 2012年; 目的:建立大鼠肾脏组织蛋白质组双向电泳分离体系。方法:提取大鼠肾脏组织的样品蛋白,按标准条件对蛋白质进行双向电泳分离,并对各个关键因素进行优化。结果:最终选择的裂解液配方是1%TBP,4%CHAPS,0.2%Bio-Lyte,40mmol/LTris,8mol/L尿素,2mol/L硫脲;使用pH 4～7的IPG胶条进行被动水化上样,等电聚焦采用缓慢升压模式,电泳参数根据Bio-Rad公司的预设方案进行调整;改良硝酸银法进行蛋白质斑点染色。从而获得了满意的蛋白质组双向电泳图谱。结论:成功建立具有较高分辨率和重复性的大鼠肾脏组织蛋白质组双向电泳分离体系,为后续实验研究提供有力的技术保障。; 张春燕刘寒杨烨陈燕邬丽莎赵春玲; 关键词：双向电泳蛋白质组肾脏组织

慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织蛋白质组的变化被引量：1: 2010年; 目的:比较慢性间歇性缺氧大鼠与正常大鼠肾脏组织蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织中的差异蛋白表达谱。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和慢性间歇性缺氧大鼠的肾脏组织蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析,选取4个差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与慢性间歇性缺氧相关的差异表达蛋白斑点为112个;经质谱鉴定的4个差异表达的蛋白斑点,慢性间歇性缺氧组量下调的差异点1个,即线粒体ATP合成酶δ亚基;上调的差异点3个,分别为己糖激酶、儿茶酚-O-甲基转移酶、脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1。结论:大鼠肾脏组织慢性间歇性缺氧损伤相关的差异蛋白表达变化可能通过多种途经影响肾脏功能。; 张春燕杨烨李洪陈燕赵春玲; 关键词：慢性间歇性缺氧双向凝胶电泳蛋白质组

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四川省教育厅资助科研项目(2007ZC027)