国家高技术研究发展计划(2006AA020902)
- 作品数：13 被引量：85H指数：5
- 相关作者：瞿良王惠萱程罕松朱振宇彭焕玉更多>>
- 相关机构：中山大学成都军区昆明总医院云南大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌的基因芯片检测研究被引量：6
- 2010年
- 目的用基因芯片对临床标本进行金黄色葡萄球菌快速检测。方法抽取180例临床标本,其中160例常规细菌培养鉴定疑似金黄色葡萄球菌感染和20例非金黄色葡萄球菌感染,金黄色葡萄球菌质控菌株(ATCC25923)、大肠埃希菌(ATCC25922)采用研究制备出金黄色葡萄球菌筛查的基因芯片进行测定,同时进行比对分析。结果金黄色葡萄球菌检出符合率为100%,基因芯片检测的标本需求量少,检验时间短,敏感性、特异性、准确性更高。结论针对细菌培养的临床标本特点,采用高效的基因芯片检测方法,具有现实的临床意义。
- 瞿良王惠萱谭德勇程罕松
- 关键词：寡核苷酸序列分析
- 临床痰检验存在的问题调查分析被引量：5
- 2010年
- 分析临床痰液检验工作中存在的问题,提高检验报告的真实性和有效性。结合《全国临床检验操作规程》(3版)痰液相关检验内容,对日常工作中痰液标本前处理方法存在的问题进行比较和总结。因为痰标本的处理没有更好的办法,所以严重地影响了痰检验的质量和准确性。临床与检验之间常因检验结果与临床症状不附发生分歧或纠纷。咳痰培养存在太多的不合格痰标本,其结果很不准确,甚至出现错误,会给医生以误导。只有临床与检验加强联系和更好地沟通,才能把存在的问题降低到最小。
- 瞿良王惠萱李雪梅滕毅佘文婕李云李丽娇周琴
- 关键词：数据收集
- 基因芯片的循证检验医学观点
- 2009年
- 近年来，基因芯片成为国内外研究与开发的热潮，许多科学家和企业家将基因芯片同当年的PCR相提并论，认为它将带来巨大的技术、社会和经济效益，正如电子管电路向晶体管电路和集成电路发展所经历的那样，核酸杂交技术的集成化也已经和正在使分子生物学技术发生着一场革命。但是，基因芯片能否成为临床疾病诊断的“有力武器”，仍然需要用循证检验医学观点进行研究。当今，循证检验医学是按照临床检验医学“以当前最佳证据为基础”的原则，用临床流行病学的方法学规范检验医学的研究设计和文献评价，用当前最好的检验技术和质量控制体系对检验结果进行的质量控制和评价，并且为临床诊断，疗效观察，病情转归提供最有效、最实用、最经济检验项目的一门科学。科学性、有效性、实用性是循证检验医学在实施过程中的评价标准。
- 瞿良王惠萱程军松
- 关键词：循证检验医学基因芯片临床检验医学分子生物学技术集成电路
- 汉坦病毒及其检测方法的研究进展被引量：2
- 2011年
- 今年9月份在河南等地发生蜱虫叮咬致多人死亡事件，中国疾控中心有关部门从患者身上分离出一种新型布尼亚病毒。布尼亚病毒（bunyavirus）自然感染见于许多脊椎动物（鼠、兔等）和节肢动物（蚊、蜱、白蛉等），感染人类后可引起多种急性出血热，如立夫特谷热和克里米亚一刚果出血热。汉坦病毒（hantavirus，HV）是引起肾综合征出血热（HFRS）和汉坦病毒肺综合征（HPS）的病原体，属于布尼亚病毒科汉坦病毒属．汉坦病毒在全球范围内都有分布．
- 高云陈嘉昌彭焕玉朱振宇
- 关键词：汉坦病毒肺综合征布尼亚病毒肾综合征出血热汉坦病毒属
- 锁核酸探针实时荧光定量PCR检测HBV基因变异被引量：3
- 2011年
- 目的描述并评价锁核酸(locked nucleic acid,LNA)探针实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)204位基因突变的方法及特点。方法分别用直接测序法、LNA探针实时荧光定量PCR检测109例接受拉米夫定(LAM)治疗6个月以上的慢性乙型肝炎患者的血清样本。结果 LNA探针实时荧光定量PCR能检测HBV野生型YMDD和其突变型YVDD、YIDD,而且这种方法还可以检测HBV野生型和变异型的混合。LNA探针相比普通探针在检测野生型和突变型混合样本方面更敏感,区分度更好。结论 LNA探针实时荧光定量PCR检测YMDD变异具有快速、灵敏等特点,可以用于大量临床样本的快速筛查,在监测拉米夫定治疗疗效及发现新耐药突变型等方面具有广泛的应用前景。
- 江洁丁渭陈华云何琼何蕴
- 关键词：荧光定量PCRYMDD乙型肝炎病毒
- 厌氧菌基因诊断标本的前处理研究被引量：1
- 2009年
- 目的探索疑似感染厌氧菌基因诊断标本采集、运送、保存的方法,提高厌氧菌标本前处理的有效性。方法对临床标本、土壤样本进行疱肉增菌、厌氧血平板、硫乙醇酸钠培养,分纯、鉴定出厌氧菌产气荚膜梭菌和破伤风梭菌,对此两种菌株用PCR方法进行体外基因扩增、测序、比对验证,用于基因芯片诊断研究。结果两种厌氧菌的成功培养鉴定离不开样本前处理的有效方法,为基因芯片诊断研究的标本前处理提供了参考。结论针对厌氧菌培养鉴定的难度,尽可能减少厌氧菌感染性疾病的漏诊、误诊,提高临床诊断、救治速度,基因芯片诊断将具有重要的临床意义。
- 瞿良王惠萱程罕松张悦李云李忠涛权彤彤
- 关键词：基因
- 醇类沉淀法提取尿液蛋白的优化策略被引量：4
- 2012年
- 目的研究提取条件,探讨提取尿液蛋白的优化策略。方法收集健康志愿者的混合尿液标本,采用甲醇、乙醇、异丙醇沉淀法在不同的条件下提取尿蛋白,这些条件包括:醇类试剂的种类、醇类试剂的比例、醇类试剂与尿液作用的不同温度及作用时间、不同的温度处理程序等。然后测定提取的蛋白浓度,评价蛋白回收量;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)评价总蛋白条带;蛋白免疫印迹评价在不同条件下提取的目的蛋白条带。结果孵育条件固定为4℃30 min时,溶剂为75%乙醇可提取蛋白最多为(649.03±28.33)μg;SDS-PAGE和免疫印迹结果显示,在不同醇类溶剂条件下提取的总蛋白条带和目的蛋白条带呈趋势变化。提取试剂条件固定为75%乙醇时,改变孵育的温度方案,显示先4℃孵育30 min后,再-20℃过夜提取的总蛋白最多为(599.93±42.20)μg;SDS-PAGE和免疫印迹结果都显示,孵育温度方案不同,所提取的总蛋白条带和目的蛋白条带无明显差异。结论 75%乙醇,在4℃孵育30 min后,-20℃过夜条件下,可高效提取尿中胰淀粉酶(AMY),用于尿AMY定性定量检测。醇类溶剂的比例对提取的总蛋白量影响很大,且对不同分子量蛋白有选择性;孵育温度条件主要影响总蛋白量。
- 周慧雷婷张曼
- 关键词：醇类沉淀法尿蛋白
- 液相芯片技术在人乳头瘤病毒分型检测中的应用被引量：2
- 2011年
- 目的构建人乳头瘤病毒(HPV)基因分型的液相芯片,针对中国常见的23种型别的HPV进行分型检测,并探讨其在临床应用中的特异性和敏感性。方法采用HPV通用型引物MY09/11以及一条简并引物对临床样本进行PCR扩增;针对HPV不同型别设计分型探针,并偶联到Luminex微球上,通过LuminexTM平台对PCR产物进行分型检测。同时以测序法作为验证标准,对液相芯片法(Luminex法)检测结果进行评价。结果以测序法作为验证标准,Luminex法对314例HPV样本的分型检测结果为灵敏度98.10%,特异性98.08%,符合率98.09%。Kappa一致性检验结果为0.962。结论 Luminex法用于HPV感染样本中的分型检测具有高灵敏度和特异性,可以用于临床HPV诊断。
- 彭春梅邓先连林斌胡守旺陈晓光
- 关键词：液相芯片人乳头瘤病毒分型检测测序
- FISH检测石蜡包埋组织切片的理想消化时间被引量：9
- 2010年
- 目的探讨石蜡包埋组织切片进行荧光原位杂交(FISH)检测前合适的酶消化时间。方法62例乳腺癌石蜡包埋组织切片,将其中的21张石蜡包埋的组织切片进行间隔5min的梯度时间酶消化,然后光镜下及加入DAPI后荧光显微镜观察。随后对剩余的41张切片继续杂交过程,对杂交信号进行观察。结果15～20min是一个比较理想的消化时间,背景干净,杂交信号理想,能够很好地进行判读。对剩余的41张石蜡包埋切片进行15～20min的消化后均获得了满意的杂交信号。结论15～20min是石蜡包埋切片理想的消化时间。不同组织标本及实验室间略有差异。故建议不同实验室甚至不同批次的标本在进行FISH技术杂交检测之前,应首先对酶消化时间进行调整。
- 王静章钧章钧张宏李娟
- 关键词：FISH酶消化
- Y染色体微缺失及其检测方法被引量：8
- 2011年
- 全世界大约有15%的夫妇不育,其中男性不育约占50%。Y染色体长臂上的AZF缺失是导致男性不育的重要因素。AZF进一步分为AZFa、AZFb和AZFc3个区域,不同区域的微缺失引起不同程度的精子发生障碍。因此Y染色体微缺失的检测对男性不育的诊治有很重要的指导意义。目前Y染色体微缺失常用的检测方法有多重定性PCR法、实时荧光PCR法、基因芯片法和荧光原位杂交法。
- 高云陈嘉昌彭焕玉朱振宇
- 关键词：Y染色体微缺失男性不育AZF
