您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(30600752)

作品数：2 被引量：0H指数：0
相关作者：张敏敏李兆申杨骅江静娴邹多武更多>>
相关机构：第二军医大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇腺病
  • 2篇腺病毒
  • 2篇基因
  • 2篇MHC
  • 1篇胰腺
  • 1篇胰腺肿瘤
  • 1篇体外
  • 1篇体外研究
  • 1篇肿瘤
  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇主要组织相容...
  • 1篇主要组织相容...
  • 1篇组织相容性
  • 1篇腺肿瘤
  • 1篇疗法
  • 1篇类分子
  • 1篇基因调控
  • 1篇基因疗法
  • 1篇分子
  • 1篇复合物

机构

  • 2篇第二军医大学

作者

  • 2篇杨骅
  • 2篇李兆申
  • 2篇张敏敏
  • 1篇吴红玉
  • 1篇金晶
  • 1篇吴洪玉
  • 1篇邹多武
  • 1篇江静娴

传媒

  • 2篇中华胰腺病杂...

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2009
共 2 条 记 录，以下是 1-2
全选 清除 导出
排序方式：
MHCⅡ类转激活因子基因的重组腺病毒载体的构建
2009年
目的构建含有主要组织相容性复合物（major histocompatibility complex，MHC）Ⅱ类分子激活物（CⅡTA）基因的重组腺病毒载体。方法回收CⅡTA的PCR产物插入pUC57中，用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切，U—Gene凝胶回收纯化3300bp目的基因片段。用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切质粒载体pShuttle—GFP—CMV，用T4DNA连接酶将上述目的基因片段与pShunle—GFP—CMV片段连接，得到穿梭质粒pShuttle—GFP—CMV—CⅡTA，并经KpnⅠ单酶切及测序鉴定。Ⅰ—CeuⅠ／Ⅰ—SceⅠ双酶切处理，回收目的片段，将pAdxsi载体片段和插入片段进行酶连接，得到腺病毒质粒pAdxsi—GFP—CⅡTA，经XhoⅠ酶切鉴定后转染HEK293细胞并培养出毒。扩增、纯化重组腺病毒AdCⅡTA，并测定病毒滴度。结果重组穿梭质粒pShuttle—GFP—CMV—CⅡTA经KpnⅠ单酶切及测序分析，证实与GeneBank中公布的小鼠CⅡTA（NM_007575）序列完全相符。重组腺病毒pAdxsi—GFP—CⅡTA构建成功后在HEK293细胞中包装产生的重组腺病毒AdCⅡTA对HEK293细胞有致病作用。经多次重复感染并纯化后，病毒滴度达2．0×10^11PFU／ml。结论含小鼠CⅡTA基因的重组腺病毒已成功构建。
张敏敏杨骅金晶吴红玉李兆申
关键词：胰腺肿瘤基因基因疗法
CⅡTA基因调控胰腺肿瘤细胞MHCⅡ类分子表达的体外研究
2011年
目的研究CUTA基因对人胰腺癌CaPanC-2细胞和小鼠胰腺癌PanC-02细胞主要组织相容性复合物（MHC）Ⅱ类分子表达的影响。方法将携带CIITA基因的腺病毒（Ad-CⅡTA）分别感染人胰腺癌CaPanC-2细胞和小鼠胰腺癌PanC-02细胞，培养24、48、72h。实时PCR法检测感染细胞C11TAmRNA的表达，蛋白质印迹法检测CIITA蛋白表达，流式细胞仪检测MHCⅡ类分子阳性表达细胞百分比。结果CaPanC-2细胞感染后24、48、72h的CⅡTAmRNA表达量分别为对照组的（16769±6455）、（261568±348850）和（834816-4-97783）倍（P〈0．05）；PanC-02细胞为对照组的（548546±87755）、（1242684±624888）和（1401647±726145）倍（P〈0．05）。CaPanC-2和PanC-02细胞均不表达CⅡTA蛋白，感染后48h，CaPanC-2、PanC-02细胞CⅡTA蛋白表达量为0．746±0．499和0．631-4-0．244。感染24、48、72h组CaPanC-2细胞表达MHCⅡ类分子的细胞百分比分别为（8．1±0．3）％、（18．9±0．3）％、（78．5±0．9）％，显著高于对照组的（7．0±0．1）％（P〈0．01）；PanC-02细胞表达MHCII类分子的细胞百分比分别为（5．1±0．2）％、（37．34-2．0）％、（68．8±2．2）％，显著高于对照组的（2．2±0．2）％（P〈0．01）。结论Ad-CⅡTA体外感染胰腺肿瘤细胞可促进cⅡTA基因的表达，从而促进细胞表面MHCⅡ类分子的表达。
江静娴张敏敏杨骅吴洪玉邹多武李兆申
关键词：主要组织相容性复合物腺病毒
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0