国家自然科学基金(30571767)
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学上海市免疫学研究所更多>>
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- FTY720联合共刺激信号阻断剂体外诱导免疫调节细胞被引量：1
- 2008年
- 目的大剂量FTY720联合应用共刺激信号阻断剂(抗-CD154单抗+抗-CD80单抗,简称Cos.Blockades),在小鼠混合淋巴细胞反应体系(MLR)中诱导免疫调节细胞。方法将FTY720与Cos.Blockades同时加入由BALB/c和C57BL/6J小鼠脾细胞组成的MLR中,培养5 d,分别采用MTT法和流式细胞仪,检测在不同终浓度FTY720(0、100、200、400、800和1 600 ng/mL)联合Cos.Blockades(均为10μg/mL)作用下,MLR中淋巴细胞的增殖情况和细胞表型。通过以上方法诱导产生的细胞,与相同数量的C57BL/6J脾细胞再培养4 d,比较其在有或无外源性IL-2参与时的细胞增殖差异;同时采用615小鼠脾淋巴细胞作为第三方刺激抗原,检测这些细胞对再次MLR抑制作用的抗原特异性。结果联合用药组(FTY720+Cos.Blockades)对初次MLR的抑制作用和上调CD4+CD25+调节性T细胞比例的作用均呈剂量依赖性。当FTY720终浓度为1 600 ng/mL时,联合用药组与Cos.Blockades组(FTY720为0 ng/mL)相比,初次MLR中淋巴细胞的增殖受到显著抑制(0.299vs0.391,P<0.05);当FTY720终浓度为800和1 600 ng/mL时,联合用药组与Cos.Blockades组相比,诱导的细胞中CD4+CD25+调节性T细胞的比例显著增高(分别为5.44%vs3.47%和6.91%vs3.47%,P<0.05);当FTY720的终浓度为1 600 ng/mL时,联合用药组和Cos.Blockades组诱导的免疫细胞具有免疫无能细胞的特性,而单独FTY720组诱导的细胞却无此特性;各组诱导的免疫调节细胞均对再次MLR具有抗原特异性的抑制作用。结论FTY720与Cos.Blockades具有协同作用,可在体外诱导和扩增免疫调节细胞;这些调节细胞具有抗原特异性的下调免疫应答的功能。
- 王慧周佩军施国海王祥慧徐达陈皓施敏敏
- 关键词：FTY720调节性T细胞免疫抑制免疫应答
- CD4^＋CD25^＋T细胞的扩增方法与临床应用被引量：1
- 2008年
- CD4^＋CD25^＋T细胞是最重要的一类调节性T细胞（Tr）。体内固有CD4^＋CD25^＋T细胞的自然扩增率极低，不能满足临床治疗的需要。通过采用FoxP3基因转染技术、阻断细胞活化信号、DC诱导、加入细胞因子等方法，对CD4^＋CD25^＋T细胞的数量和功能进行扩增，使其在器官移植、自身免疫性疾病和肿瘤免疫等领域具有广泛的临床应用前景。
- 王慧周佩军
- 关键词：调节性T细胞免疫耐受
- 混合培养的供、受者骨髓细胞过继回输延长小鼠移植心脏存活时间
- 2009年
- 目的将供、受者骨髓细胞经混合培养后过继回输，以观察其对同种异体移植心脏存活时间和受者免疫功能的影响。方法取Balb／c小鼠和C57BL／6J小鼠的骨髓细胞，进行混合培养。配制含Balb／c小鼠和C57BL／6J小鼠脾淋巴细胞的混合淋巴细胞反应体系（MLR）以及含Balb／c小鼠和C3H小鼠脾淋巴细胞的MLR，分别加入混合培养的骨髓细胞，观察其对MLR中细胞增殖的影响。以C57BL／6J小鼠为供者，Balb／c小鼠为受者行腹腔异位心脏移植，实验分为4组：（1）移植对照组，受者仅进行心脏移植，不作其他处理；（2）实验对照组，心脏移植后给予西罗莫司灌胃；（3）实验组，移植手术结束前注射混合培养的骨髓细胞1×10^7个，术后给予西罗莫司；（4）第三方对照纽，受者接受C3H小鼠的移植心脏，手术结束前注射混合培养的骨髓细胞1×10^7个，术后给予西罗莫司。记录移植心脏存活时间；移植心脏停跳当日，取受者外周血，检测CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞的比例及供者来源的H-2K“细胞的比例。结果加入混合培养的骨髓细胞后，Balb／c和C57BL／6J的MLR的淋巴细胞增殖率低于Balb／c和C3H的MLR。实验组移植心脏的存活时间长于其他3组（P〈0．05）。实验组CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞的百分率高于其他3组（P〈0．05）。实验组外周血中H2K^6细胞的比例高于其他3组（P〈0．05）。结论受者输注混合培养的供、受者骨髓细胞可在一定程度上调节免疫应答，延长小鼠移植心脏的存活时间，该作用具有供者抗原特异性。
- 王慧杨能周佩军邵琨赵菊平徐达王祥慧沈周俊路丽明刘世雄
- 关键词：骨髓移植调节性T细胞
- 器官移植受者免疫状态的监测
- 2009年
- 张明明周佩军
- 关键词：器官移植免疫监测
- FTY720对体外混合培养淋巴细胞增殖和凋亡的影响被引量：6
- 2007年
- 目的观察FTY720对体外混合培养小鼠脾脏淋巴细胞的增殖、分化和凋亡的影响。方法将C57BL/6J小鼠与BALB/c小鼠的脾脏淋巴细胞体外混合培养5 d,培养液中加入不同浓度的FTY720。分别运用MTT法和流式细胞仪检测在不同浓度FTY720作用下,混合培养淋巴细胞的增殖状况、细胞表型和凋亡率。结果当FTY720为400 ng/mL时,体外混合培养淋巴细胞的增殖即受到明显抑制,抑制率为47.6%(P<0.05);当FTY720为3 200 ng/mL时,其抑制率达到为51.6%,呈剂量依赖性。FTY720为1 600 ng/mL时,混合培养淋巴细胞中的CD4+CD25+T细胞比例显著增加(P<0.05)。FTY720在200 ng/mL时,混合培养淋巴细胞的细胞凋亡率即显著增加(P<0.05)。结论在小鼠混合淋巴细胞培养体系中加入高浓度的FTY720,能显著抑制淋巴细胞增殖能力,增加调节性细胞的比例并促进细胞凋亡。
- 施国海周佩军王祥慧徐达施敏敏陈皓
- 关键词：FTY720增殖调节性T细胞凋亡混合淋巴细胞培养
