北京市教委科技发展计划(KZ200610025013)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 相关作者：贺俊崎杨晓梅熊英陈鹏张松更多>>
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- 发文基金：北京市教委科技发展计划国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 血管紧张素(1-7)的受体MAS与PSD-95的相互作用被引量：1
- 2007年
- 经过对蛋白质MAS的氨基酸序列进行分析、比对发现,其羧基末端含有一段高度保守的PDZ结合模序.据此推测,MAS通过此模序可能会与某些PDZ蛋白质发生相互作用.将MAS羧基末端27个氨基酸所对应的DNA序列,克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-MAS-CT.将重组质粒转入大肠杆菌BL21内,经IPTG诱导,并用glutathione-Sepharose 4B纯化,得到纯化的融合蛋白GST-MAS-CT.以GST-MAS-CT为饵蛋白,利用GST pull down方法,在兔脑组织中筛选与MAS特异结合的蛋白质.结果表明,在兔脑组织中有多种蛋白质可以与MAS-CT特异结合,经Western印迹检验其中之一为突触后致密物质-95(postsynaptic density protein95,PSD-95).PSD-95与MAS的相互作用的研究结果,为研究完整的MAS与PSD-95的相互作用以及这种相互作用对MAS受体的功能的影响奠定了基础.
- 李积凤熊英李延华杨晓梅陈鹏江琪安云庆贺俊崎
- 关键词：MAS血管紧张素PSD-95G蛋白偶联受体PDZ蛋白
- PTEN与NHERF-1相互作用被引量：6
- 2007年
- 目的筛选与PTEN结合的含PDZ结构域的蛋白,并利用蛋白质组学方法对筛选出的蛋白质的相互作用予以鉴定。方法利用PDZ蛋白质芯片筛选PTEN的结合蛋白。对所发现的PTEN与NHERF-1的相互作用,应用GST融合蛋白沉降和免疫共沉淀实验等多种方法予以鉴定。结果发现了几种新的与PTEN结合的含PDZ结构域的蛋白质。并对PTEN/NHERF-1的相互作用进行了进一步研究,发现PTEN的羧基端可与NHERF-1的第一个PDZ结构域(PDZ1)结合。将PTEN羧基最末端的4个氨基酸(I-T-K-V)中任何一个突变为丙氨酸,都明显抑制PTEN与NHERF-1的结合。免疫共沉淀结果显示,在细胞内完整的蛋白质分子PTEN与NHERF-1也可以结合。结论PTEN与NHERF-1之间存在相互作用,该相互作用是由PTEN的羧基末端与NHERF-1的PDZ1结构域结合而实现的,PTEN羧基最末端的4个氨基酸对于维持它们之间的结合有十分重要的作用。
- 陈鹏杨晓梅熊英迟锦玉张松杨慧贺俊崎
- 关键词：PTEN蛋白质相互作用
