天津市应用基础与前沿技术研究计划(11JCYBJC09400)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：郝晓冉潘皎朱旭东李强牛学良更多>>
- 相关机构：南开大学北京师范大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 球毛壳菌降解天然木质纤维素能力差异及酶系基因分析被引量：5
- 2014年
- 目的:以不同植物中分离到的4株内生球毛壳菌NK102、NK103、NK104和NK105为对象,研究不同生态来源球毛壳菌降解木质素和纤维素的能力。方法:首先采用羧甲基纤维素和纤维素刚果红平板检测各菌株的纤维素降解能力,并利用Bavendamm平板反应检测各菌株的木质素降解能力;将4株菌分别培养在以微晶纤维素、杨树叶和木屑为惟一碳源的液体培养基中,通过检测培养液中纤维素酶和漆酶的酶活力,比较各菌株分解利用天然木质纤维素材料的能力,连续培养12 d后检测培养液中次级代谢产物的合成情况;利用已测序的球毛壳菌CBS148.51的基因组信息,寻找编码木质纤维素降解酶类的基因,为球毛壳菌分解利用木质纤维素提供分子生物学依据。结果:NK102、NK103、NK104和NK105在羧甲基纤维素培养基和纤维素刚果红培养基上都能够生长并形成水解圈;Bavendamm平板反应显示4株菌降解木质素的能力由强到弱依次是NK103、NK102、NK105和NK104。4株菌都能分解利用微晶纤维素、杨树叶和木屑,分泌纤维素酶和漆酶,其中NK102在以木屑为碳源的培养基上纤维素酶活力最强,达到0.76 U/mL发酵液,NK103在以杨树叶为碳源的培养基上漆酶活力最强。与此同时,4株菌在发酵培养过程中都能够稳定地合成球毛壳甲素(ChA),ChA产量受到碳源影响,在以杨树叶为碳源的培养基上,NK104的ChA产量最高,可达到14.88 mg/L发酵液。利用已测序的球毛壳菌CBS148.51的基因组信息,寻找到119个编码纤维素半纤维素酶的基因、8个编码漆酶的基因和2个编码锰过氧化物酶的基因,球毛壳菌具有完整的降解纤维素半纤维素的酶体系,在木质纤维素降解真菌的开发过程中具有重要的研究价值。结论:本研究为球毛壳菌木质纤维素降解过程的研究及该菌种的开发利用奠定了基础。
- 郝晓冉牛学良李强潘皎朱旭东
- 关键词：球毛壳菌木质纤维素漆酶
- 纤维素降解球毛壳菌NK-102的高效遗传转化方法
- 2011年
- 【目的】在球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK-102中,建立菌株特异性转化体系。【方法】构建新的抗性标记pUCATPH-Pgap,转化效率优于pUCATPH和pCM768。建立了PEG-原生质体和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导的两种转化方法。【结果】原生质体转化效率为30-50个转化子/10μg DNA,抗性标记pUCATPH-Pgap效率最高。EHA105介导转化率达到3.2×102转化子/107孢子。Southern blot证明DNA随机整合于基因组中,转化子抗性稳定。【结论】两种转化体系的建立为筛选高效利用纤维素的球毛壳菌突变株奠定了基础。
- 郝晓冉纪元陈煌毕建男潘皎朱旭东
- 关键词：球毛壳菌纤维素根癌农杆菌
- 杀线虫天然产物Chaetoglobosin A合成的表观遗传调控证据被引量：3
- 2014年
- 通过高效液相色谱(HPLC)、高分辨率质谱(HRMS)和~H和^(13)C核磁共振(NMR)证明1株球毛壳菌Chaetomiumglobosum NKl02产生的杀根结线虫(Meloidogyne spp.)成分为球毛壳甲素(Chaetoglobosin A)。C.globosum NK102能够利用微晶纤维素、杨树叶和木屑合成ChA。在12 d发酵液中,3种培养基获得的ChA产量由高到低的顺序为PDA、杨树叶、微晶纤维素和木屑,产量分别为26.49、9.38、4.47和0.47 mg/L。通过在微晶纤维素培养基中添加表观遗传沉默抑制药物表明:100μmol/L 5′-AZA的添加使得ChA的产量提高至原来的3.6倍,100μmol/L SAHA将ChA的产量提高到原来的2.4倍,DMSO使得ChA的产量提高到原来的1.7倍。这个结果预示ChA的合成的某些基因受到表观遗传调控。
- 郝晓冉牛学良李强潘皎朱旭东
- 关键词：南方根结线虫球毛壳菌木质纤维素
