安徽省自然科学基金(1308085MH167)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：张开光陈思李琴崔喻芳王巧民更多>>
- 相关机构：安徽医科大学附属省立医院安徽医科大学第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- TRAIL真核表达载体联合顺铂对胃癌细胞MDR1/P-gp的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合应用顺铂对胃癌多药耐药(MDR)细胞SGC7901/VCR的杀伤作用及作用机制。方法采用人可溶性TRAIL(sTRAIL)重组表达质粒pAVV-sTRAIL转染SGC7901/VCR细胞,利用其自身分泌表达的sTRAIL蛋白联合亚毒性剂量(0.535 g/L)顺铂,联合作用于SGC7901/VCR细胞。采用MTT和流式细胞术分别检测细胞存活率及凋亡率,RT-PCR及ELISA分别检测细胞内MDR1基因和P-糖蛋白(P-gp)的表达。结果 MTT结果显示:联合组的细胞存活率较对照组、TRAIL组及顺铂组明显减低(P<0.01);流式细胞术结果表明:对照组、TRAIL组、顺铂组及联合组的细胞晚期凋亡率分别为0.74%、7.68%、18.52%和24.41%,与其他3组相比,联合组细胞凋亡率明显升高;RT-PCR及ELISA结果表明:联合组MDR1/P-gp的表达也较对照组、TRAIL组及顺铂组明显下降(P<0.01,P<0.05)。结论sTRAIL与顺铂联合可协同杀伤SGC7901/VCR细胞,可逆转胃癌细胞的MDR,其机制可能是通过下调MDR基因MDR1/P-gp的表达有关。
- 崔喻芳张开光喻龙姗朱邢超
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体P-糖蛋白
- 跌倒及平衡能力减退在类风湿关节炎合并脊柱骨质疏松性骨折中的临床研究被引量：4
- 2018年
- 目的分析跌倒及平衡能力减退对RA患者发生脊柱骨质疏松性骨折（OPF）的影响。
方法选择2013年1月至2015年10月安徽医科大学第一附属医院风湿科386例住院的RA患者和同期158例年龄、性别相匹配的健康人，摄脊柱（T5~L5）正侧位X线片并以半定量（SQ）法作为判断脊柱OPF的标准，其中296例RA患者记录了近1年内跌倒发生情况，263例RA患者采用Berg平衡量表法测定了平衡能力，采用t检验和χ2检验以及Logistic多元回归进行统计分析。
结果① 386例RA患者中有67例发生OPF，发生率为17.4%（67/386），是健康对照组中OPF发生率3.8%（6/158）的4.5倍（χ2=17.743，P〈0.01）。296例RA患者中近1年内有60例发生过跌倒，发生率为20.3%。②发生OPF的RA患者Berg评分明显低于未发生OPF组[（33±15）和（43±14），t=4.150，P〈0.01]；发生跌倒的RA患者Berg评分明显低于未发生跌倒组[（31±16）和（41±14），t=4.373，P〈0.01]。③发生OPF的RA患者中跌倒的发生率为39.2%（20/51），明显高于未发生OPF组中的15.7%（22/140）（χ2=12.036，P=0.01）；RA患者Berg评分〈40分组跌倒的发生率为32.5%（37/114），高于Berg评分≥40分组的12.1%（18/149），差异有统计学意义（χ2=16.212，P〈0.01）。RA患者OPF组的Berg评分〈40分的发生率为68.8%（33/48），明显高于无OPF组的29.7%（35/118），差异有统计学意义（χ2=21.558，P〈0.01）。④ Logistic回归分析发现：年龄[OR=1.064，95%CI（1.025，1.103），P=0.001]和跌倒[OR=2.735，95%CI（1.168，6.407），P=0.021]为RA患者发生脊柱OPF的危险因素，Berg平衡量表评分[OR=0.967，95%CI（0.940，0.993），P=0.012]与RA患者发生脊柱OPF呈负相关。
结论RA患者脊柱OPF的发生与跌倒和平衡能力的减退密切相关。
- 孙红丽徐胜前刘文齐姗吴颖徐建华
- 关键词：关节炎类风湿骨质疏松性骨折跌倒
- TRAIL逆转人胃腺癌SGC7901/ADR细胞多药耐药的机制探讨被引量：4
- 2017年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人胃腺癌阿霉素耐药细胞(SGC7901/ADR细胞)多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax表达的影响,以明确TRAIL逆转胃癌多药耐药的可能机制。方法 MTT法检测SGC7901/ADR细胞和其亲本细胞SGC7901对阿霉素、长春新碱、顺铂的药物敏感性。实时荧光定量PCR法检测SGC7901/ADR细胞和SGC7901细胞MDR1、MRP1、Bcl-2、Bax mRNA表达。不同浓度(10、50、100 ng/m L)TRAIL处理SGC7901/ADR细胞后,使用实时荧光定量PCR法、蛋白印迹法检测各处理细胞和空白对照(未加TRAIL)细胞MDR1、MRP、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白的表达。结果药物敏感试验显示,与亲本细胞SGC7901相比,长春新碱、阿霉素、顺铂对SGC7901/ADR细胞的IC50明显提高(P<0.01或<0.05)。SGC7901/ADR细胞中MDR1、MRP1、Bcl-2的mRNA表达量与亲本细胞SGC7901相比上升,Bax mRNA表达量降低(P均<0.01)。TRAIL处理细胞后,下调了SGC7901/ADR细胞的MDR1、MRP1、Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量,提高了Bax mRNA相对表达量,与空白对照相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 TRAIL可能通过下调MDR1、MRP1、Bcl-2和上调Bax的表达促进胃癌耐药细胞的凋亡,进而部分逆转胃癌的多药耐药。
- 孙海兵张开光李琴刘应玲陈思
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多药耐药
- 顺铂对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体逆转胃癌多药耐药现象的增敏作用及机制被引量：6
- 2015年
- 目的：研究顺铂（DDP）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）逆转人胃腺癌耐长春新碱（ VCR） SGC7901-VCR细胞多药耐药现象的增敏作用，以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测不同化疗药物处理组SGC7901和SGC7901-VCR细胞的半数抑制浓度（ IC50）和细胞存活率。以不同浓度的DDP和TRAIL单独或联合处理SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR、荧光定量PCR和Western blot法检测不同处理组中多种基因的mRNA和蛋白表达。以c-myc-siRNA干扰、重组c-myc质粒转染SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR和Western blot法检测不同处理组SGC7901-VCR细胞中死亡受体（ DR）4、DR5、c-myc基因的mRNA和蛋白表达。结果与单用TRAIL组和空白对照组比较，联合DDP后，VCR、DDP、阿霉素和氟尿嘧啶对SGC7901-VCR细胞的IC50均明显降低（均P＜0．05）。 TRAIL联合DDP时，对SGC7901-VCR细胞中caspase-3的激活作用以及对DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路、耐药基因MDR1、MRP1的抑制程度明显高于TRAIL单独作用时（均P＜0．01）。以siRNA干扰沉默c-myc后，SGC7901-VCR细胞中c-myc、DR4和DR5的表达明显减低（均P＜0．01）；以重组 c-myc质粒转染高表达 c-myc后，SGC7901-VCR细胞中 c-myc、DR4和DR5的表达明显增加（均P＜0．01）。10 ng／ml TRAIL组、0．25μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组和0．5μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组c-myc蛋白的相对表达量分别为0．314±0．012、0．735±0．026和0．876±0．028，细胞色素C（cyt C）蛋白的相对表达量分别为0．339±0．036、0．593±0．020和0．735±0．031，差异有统计学意义（P＜0．05）；DR4、DR5、活性caspase-9和活性caspase-3蛋白的相对表达量也随着DDP 浓度的增加而增加。结论 SGC7901-VCR的多药耐药性与DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路的激活以及耐药基因MDR1和MRP1的高表达有关。与TRAIL 联合时，DDP能够通过增加c-myc的表达促进DR4和D
- 朱邢超张开光王巧民陈思苟雅雯崔喻芳李琴
- 关键词：顺铂肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多药耐药相关蛋白质类细胞系
- siRNA抑制Mcl-1基因表达对TRAIL诱导的人胃腺癌SGC7901/ADR细胞凋亡的影响
- 2016年
- 目的 :研究沉默髓样细胞白血病1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因表达对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人胃腺癌耐多柔比星(adriamycin,ADR)SGC7901/ADR细胞凋亡的影响,并探讨胃癌耐药细胞株耐T RAI L凋亡效应的可能机制。方法 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)处理SGC7901/ADR细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞活力和细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表达水平。采用脂质体转染法将Mcl-1-si RNA转染至SGC7901/ADR细胞,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Mcl-1-si RNA对Mcl-1 m RNA及蛋白表达水平的影响。采用TRAIL(50 ng/m L)处理Mcl-1基因沉默后的SGC7901/ADR细胞,MTT法和FCM法分别检测Mcl-1基因沉默后TRAIL对细胞增殖及凋亡率的影响,并进一步用蛋白质印迹法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)的表达水平以及凋亡相关蛋白caspase 3和caspase 9的激活情况。结果 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)均能抑制人胃腺癌耐药株SGC7901/ADR细胞的增殖,并诱导其凋亡(P值均<0.05),但敏感性较低;TRAIL能明显提高SGC7901/ADR细胞中Mcl-1m RNA(P值均<0.001)和蛋白(P值均<0.05)的表达水平。Mcl-1-si RNA转染后,SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白表达均明显下调(P值均<0.001)。与阴性对照组(转染阴性对照-siR NA+TRAIL)相比,Mcl-1-siR NA转染后联合应用TRAIL组SGC7901/ADR细胞的增殖能力明显下降(P<0.001),细胞凋亡率明显增加(P<0.001),Cyt C、active-caspase 3和active-caspase 9蛋白的表达水平均明显增加(P值均<0.001)。结论 :TRAIL能上调胃癌耐药细胞株中抗凋亡蛋白Mcl-1表达,siR NA抑制Mcl-1表达可增强TRAIL对SGC7901/ADR细胞的致凋亡作用,提示胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR耐TRAIL致凋亡效应可能与Mcl-1高表达有关。
- 李琴张开光朱邢超孙海兵陈思王巧民
- 关键词：TNF相关凋亡诱导配体细胞凋亡
