江苏检验检疫局科研项目(2004KJ01)
- 作品数：4 被引量：33H指数：4
- 相关作者：陈飞邵红霞秦爱建陶建平彭金彪更多>>
- 相关机构：张家港出入境检验检疫局扬州大学更多>>
- 发文基金：江苏检验检疫局科研项目高层次人才科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽沙门氏菌毒力岛标志基因研究与mgtC基因序列分析被引量：8
- 2010年
- 根据GenBank发表的沙门氏菌毒力岛(SPI)基因序列,设计扩增SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5核心蛋白的基因PCR引物,建立检测沙门氏菌毒力岛的PCR方法;以保存的30株禽源沙门氏菌标准菌株为参考,确定禽沙门氏菌毒力岛的主要类型为SPI-1(携带率83.3%)、SPI-2(携带率93.3%)、SPI-3(携带率100%)、SPI-4(携带率73.3%)、SPI-5(携带率86.7%),由此证明SPI-3可作为检测沙门氏菌的毒力标志。通过对3株沙门氏菌SPI-3的mgtC基因的序列分析,发现mgtC基因的高度保守性,进一步明确了mgtC基因可作为检测禽沙门氏菌的标志。
- 陈飞成大荣王丽芳孙怀昌张鑫宇
- 关键词：沙门氏菌
- 抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备与特性鉴定被引量：8
- 2007年
- 目的:制备抗伏马菌素B1(Fumonisin B1,FB1)单克隆抗体(mAb),并对其进行特性鉴定。方法:人工合成免疫原BSA-FB1,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞融合技术制备抗FB1的mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA筛选阳性克隆。以间接竞争ELISA法对mAb的敏感性、特异性、亲和力等特性进行检测,并对其效价、亚类、稳定性等特性进行鉴定。结果:获得了1株稳定分泌抗FB1mAb的杂交瘤细胞(命名为5H12-C6-C2),其亚类为IgG2b,腹水和上清效价分别为1∶1.28×106和1∶3.2×103,亲和常数为3.13×106M-1。mAb的间接竞争ELISA法灵敏度为0.09088mg/L,与FB1的类似物FB2有轻微交叉反应,与污染玉米的另外5种真菌毒素ZEN、AFB1、DON、T-2、OA以及载体蛋白BSA和OVA无交叉反应性,稳定性良好。结论:成功地制备了抗FB1特异性mAb,为开展FB1免疫学检测方法的研究提供了有力的工具。
- 许金俊陈飞秦爱建陶建平彭金彪邵红霞金文杰
- 关键词：伏马菌素B1单克隆抗体生物学特性
- 伏马菌素B1免疫学检测方法的研究被引量：7
- 2007年
- 目的制备抗伏马菌素B1(Fumonisin B1,FB1)单克隆抗体,在此基础上建立一种可用于定量检测玉米中FB1含量的间接竞争ELISA方法。方法人工合成免疫原BSA-FB1和包被抗原OVA-FB1,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞融合技术制备抗FB1的单抗,并对其特性进行鉴定。以OVA-FB1作为包被抗原,FB1为竞争抗原,两者与一定量的抗FB1单抗竞争反应,建立检测FB1的间接竞争ELISA方法,对玉米样品进行初步检测应用。结果获得了1株稳定分泌抗FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞(命名为5H12-C6-C2)。对间接竞争ELISA方法进行反应条件优化后,建立了检测FB1的标准曲线,回归方程为y=1.113-0.313x,相关系数R2为-0.990,最适可测范围为10ng/ml^1000ng/ml,灵敏度为90.88ng/nl,最低检测限为7.83ng/ml,方法的批内和批间平均变异系数分别为3.24%和2.45%,样品添加平均回收率为94.32%。结论成功地制备了抗FB1特异性单抗,建立了FB1的间接竞争ELISA检测方法,为进一步研制FB1检测试剂盒奠定了基础。
- 许金俊陈飞秦爱建陶建平彭金彪邵红霞金文杰戴先礼
- 关键词：伏马菌素B1单克隆抗体间接竞争ELISA
- 伏马菌素B1间接竞争ELISA检测方法的建立和应用被引量：12
- 2007年
- 以人工合成的抗原OVA-FB1作为包被抗原,FB1（伏马菌素B1）为竞争抗原,两者与一定量的抗FB1单抗反应,建立检测FB1的间接竞争ELISA方法,对玉米样品进行初步检测应用。结果表明,间接竞争ELISA方法最佳抗原包被浓度为196 ng/ml,包被时间为4℃过夜,单抗最佳工作浓度为1∶4 000,酶标二抗最佳工作浓度为1∶2 500,最佳的抗原抗体竞争反应时间和温度为4℃过夜作用。可测最适范围为10-1 000 ng/ml,回归方程为y=1.113-0.313x,相关系数R^2为-0.990,灵敏度为90.88 ng/nl,最低检测限为7.83 ng/ml,批内和批间变异系数分别为3.24%和2.45%,平均添加回收率为94.32%。
- 陈飞邵景东
- 关键词：伏马菌素B1间接竞争ELISA
