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蒿鳖养阴软坚方对免疫性肝纤维化大鼠的治疗作用被引量：8: 2010年; 目的探讨蒿鳖养阴软坚方对牛血清白蛋白(BSA)免疫性肝纤维化大鼠的治疗作用。方法以18 mg/mL BSA与等体积的弗氏不完全佐剂混悬液足跖皮下多点注射5次免疫大鼠后,尾静脉攻击注射BSA生理盐水(每次2 mg/0.4 mL递增至3.4 mg/0.4 mL)15次,每周2次,制备肝纤维化模型;按体质量随机区组法分为模型组,蒿鳖养阴软坚方高、中、低剂量(8.2、2.59、0.82 g/kg,2.59 g/kg为临床等效剂量)组,复方鳖甲软肝片组,秋水仙碱组,各治疗组均于造模结束后ig给药(1 mL/100 g),每日1次,连续2个月,对照组和模型组分别ig等体积蒸馏水。酶谱法检测肝组织基质金属蛋白酶-2和-9(MMP-2、MMP-9),荧光法测定血清丙二醛(MDA),放免法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)。结果蒿鳖养阴软坚方各剂量均能显著降低肝组织羟脯氨酸(Hyp)、MMP-2及MMP-9、肝纤维化程度、血清HA、LN、Ⅳ-C水平(P<0.05),其高、中剂量能明显降低血清MDA水平(P<0.05)。结论蒿鳖养阴软坚方对BSA免疫性肝纤维化大鼠具有治疗作用,抗脂质过氧化与降低MMP-2及MMP-9为其部分作用机制。; 邢伟孔维涵方步武; 关键词：牛血清白蛋白肝纤维化基质金属蛋白酶-2 丙二醛

蒿鳖养阴软坚方中大黄素含量的高效液相色谱法测定被引量：1: 2010年; 目的建立测定蒿鳖养阴软坚方中大黄素含量的高效液相色谱(HPLC)方法。方法采用HPLC法,色谱柱HypersilODS2(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸(75∶25);流速:1.0ml.min-1;检测波长:254nm。结果大黄素在2.64～26.4μg.ml-1范围内呈良好线性关系,r=0.9998,平均加样回收率为99.7%,RSD为2.7%(n=6)。结论该方法可将大黄素从复方中充分提取分离,专属性强,结果准确,可用于蒿鳖养阴软坚方的质量控制。; 张玉萍薛春兰方步武; 关键词：大黄素高效液相色谱法

秋水仙碱体外抗乙型肝炎病毒的作用被引量：2: 2012年; 目的:探讨秋水仙碱在体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:以秋水仙碱作用于HBV全基因组转染的人肝癌细胞株(Hep G22.2.15),用罗氏电化学发光免疫分析仪检测HBsAg和HBeAg,用ABI7000荧光定量PCR扩增仪检测细胞内、外HBV-DNA、HBV-共价闭环DNA(HBV-cccDNA)(copies/cell)。数据表示为l g(x珚±s)。结果:(1)秋水仙碱6.25×10-6～1×10-4 mol·L-1能显著抑制Hep G22.2.15产生/分泌HBsAg(P<0.05,P<0.01),IC50=1.473×10-7 mol·L-1,其3.125×10-6和2.5×10-5～1×10-4 mol·L-1能显著抑制Hep G22.2.15产生/分泌HBeAg(P<0.05,P<0.01),IC50=2.387×10-7 mol·L-1,拉米夫定(lamivudine)IC50分别为3.52×10-4 mol·L-1和3.184×10-3 mol·L-1。(2)秋水仙碱和拉米夫定有类似的降低Hep G22.2.15细胞内HBV-DNA的作用(P<0.05),IC50分别为9.747×10-9 mol·L-1和2.649×10-6 mol·L-1。(3)秋水仙碱3.125×10-6和6.25×10-6 mol·L-1能明显减少Hep G22.2.15细胞内和上清液中HBV-cccDNA(P<0.05)。(4)秋水仙碱1.6×10-6～1×10-3 mol·L-1和拉米夫定2×10-4,1×10-3 mol·L-1皆能显著抑制Hep G22.2.15细胞增殖(P<0.05,P<0.01),IC50分别为7.933×10-6 mol·L-1和2.60×10-4 mol·L-1。结论:秋水仙碱在体外具有抗HBV的作用,包括降低HBsAg和HBeAg的产生/分泌,减低Hep G22.2.15细胞内、外HBV-cccDNA水平,减少细胞内HBV-DNA,且主要是由于直接抑制HBV-DNA和HBV-cccDNA的产生。; 孔维涵方步武朱争艳高英堂丁贤杜智; 关键词：秋水仙碱乙型肝炎病毒 HEP G2

蒿鳖养阴软坚方对四氯化碳所致肝纤维化的治疗作用研究被引量：4: 2009年; 目的探讨蒿鳖养阴软坚方治疗CCl4等所致肝纤维化的作用。方法0.5 ml CCl4/100 g wt皮下注射16次(后15次注射用CCl4∶橄榄油=4∶6,V/V)辅以10%乙醇为饮料制备肝纤维化模型,成模后以蒿鳖养阴软坚方治疗,灌胃用药[24.48 g/kg(生药/体重)和8.16 g/kg,每周6 d]2个月。结果8.16 g/kg蒿鳖养阴软坚方能明显降低肝纤维化大鼠肝组织胶原蛋白含量及血清透明质酸和IV型胶原(P<0.05)。结论蒿鳖养阴软坚方具有治疗CCl4等所致肝纤维化的作用。; 孔维涵郝洁方步武张永进邢伟刘洁莹凌宁生张玉萍崔志清; 关键词：胶原纤维羟脯氨酸透明质酸 IV型胶原

蒿鳖养阴软坚方对四氯化碳复合因素所致肝纤维化的预防作用被引量：8: 2013年; 目的:探讨蒿鳖养阴软坚方对CCl4复合因素所致大鼠肝纤维化的预防作用及可能的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型组,蒿鳖养阴软坚方高、中、低剂量组(8.20,2.59,0.82 g.kg-1),复方鳖甲软肝片组(0.54 g.kg-1),秋水仙碱组(1×10-4g.kg-1)。第1次sc CCl45 mL.kg-1,从第2次开始每隔3 d sc 40%CCl4花生油3 mL.kg-1至第12次;模型组和治疗组隔日ig 30%乙醇(1 mL/只),各治疗组每日给药1次,正常组和模型组均给予相应体积的蒸馏水,每周6d(停药1 d),共6周。观测肝组织形态和胶原蛋白,测定血清肝功能丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST);放免法测定血清透明质酸(HA)、IV型胶原(IV-C)、III型前胶原(PCIII),层黏连蛋白(LN)水平;紫外-可见分光光度法测定血清丙二醛(MDA)水平;检测肝组织中羟脯氨酸,胶原蛋白及白蛋白含量。结果:模型组大鼠肝组织内肝细胞广泛变性及坏死,大量炎性细胞浸润,类假小叶形成,大量胶原纤维形成;蒿鳖养阴软坚方高剂量组的肝脏病理变化程度较模型组明显减轻且无类假小叶形成;模型组的ALT,AST,HA及PCIII含量均高于正常对照组(P<0.01,P<0.05);各蒿鳖养阴软坚方给药组ALT,AST,HA及PCIII高剂量组显著低于模型组(P<0.05);MDA及胶原蛋白的含量均低于模型组(P<0.01),各蒿鳖养阴软坚方给药组白蛋白均高于模型组(P<0.01)。结论:蒿鳖养阴软坚方对四氯化碳复合因素诱导的大鼠肝纤维化有预防作用;其作用机制可能与抗脂质过氧化损伤,抗炎,抑制胶原蛋白的合成等有关。; 率红莉方步武邢伟刘洁莹; 关键词：CCL4 肝纤维化复方鳖甲软肝片秋水仙碱

蒿鳖养阴软坚方对肝纤维化大鼠抗氧化损伤与诱导凋亡的作用被引量：3: 2010年; 目的:探讨蒿鳖养阴软坚方抗氧化损伤和诱导凋亡而预防CCl4复合因素所致肝纤维化的作用。方法:大鼠80只按体质量分层随机抽样法分为7组。正常组6只,模型组14只,蒿鳖养阴软坚方低剂量组12只,中剂量组12只,高剂量组12只,复方鳖甲软肝片组12只和秋水仙碱组12只。采用复合因素CCl4注射、高脂高胆固醇玉米饼饲料、间断少量乙醇灌胃制备大鼠肝纤维化模型,以蒿鳖养阴软坚方粗提物预防用药,HE染色及胶原染色观察肝组织形态,基于T4 DNA连接酶的ApopTag ISOL法检测凋亡,免疫组化SABC法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),水解氧化比色法测肝组织羟脯氨酸(Hyp),比色法测血清丙二醛(MDA)。结果:与模型组相比,蒿鳖养阴软坚方中剂量与高剂量组具有显著降低肝纤维化程度分期和胶原蛋白含量的作用(P<0.01)。高剂量组可降低丙二醛(MDA)水平(P<0.05),减低α-SMA表达。中剂量组可诱导间质细胞凋亡(P<0.01),但抑制肝细胞凋亡(P<0.01)。结论:蒿鳖养阴软坚方通过抗氧化损伤、抑制HSC活化、促进活化的HSC凋亡等而发挥抗肝纤维化的作用。; 刘红艳方步武率红莉邢伟刘洁莹赵敏郭娟; 关键词：肌动蛋白类脂质过氧化作用

蒿鳖养阴软坚方对刀豆球蛋白A诱导的肝纤维化的预防作用研究被引量：3: 2011年; 目的:研究蒿鳖养阴软坚方对刀豆蛋白A(ConA)诱导的肝纤维化的预防作用。方法:将Balb/c小鼠随机分为7组,即正常、模型、复方鳖甲软肝片、秋水仙碱和蒿鳖养阴软坚方高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组采用ConA15mg·kg-1尾静脉注射,每周1次,连续10周,复制小鼠肝纤维化模型,给药结束后观察各组小鼠的肝组织病理学变化,检测肝组织羟脯氨酸含量,并检测血清玻璃酸(HA)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的含量。结果:模型组肝组织见大量炎症细胞浸润,肝细胞呈点、灶状和大片状坏死,汇管区、中央静脉周围及血窦内胶原纤维增生,肝纤维化程度分期及计分皆显著增高(P<0.01);与模型组比较,各给药组能不同程度地降低肝组织胶原蛋白含量,显著减轻肝纤维化程度(P<0.05),在降低胶原蛋白含量方面以1.16g·kg-1蒿鳖养阴软坚方和复方鳖甲软肝片的作用显著(P<0.05),而11.58g·kg-1蒿鳖养阴软坚方降低HA的作用较强。结论:蒿鳖养阴软坚方具有预防ConA诱导的小鼠肝纤维化的作用。; 彭龙希刘红艳方步武; 关键词：肝纤维化刀豆球蛋白A

蒿鳖养阴软坚方中虎杖苷的含量测定被引量：11: 2010年; 目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定蒿鳖养阴软坚方中虎杖苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法对制剂中的虎杖苷进行了定量分析，色谱柱Hypersil ODS2（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（21：79），检测波长：306nm，流速1．0ml·min^-1。结果虎杖苷得到完全分离，在1．688～16．88μg·ml^-1范围内线性关系良好，r=0．9999，平均加样回收率为101．0％，RSD为2．5％（n=6）。结论此方法可将虎杖苷从复方中充分的提取分离，专属性强，精密度和稳定性良好，结果准确，可用于蒿鳖养阴软坚方的质量控制。; 余琼张玉萍方步武; 关键词：虎杖苷高效液相色谱法

蒿鳖养阴软坚方制剂工艺的正交实验与药理筛选比较研究: 2010年; 目的:探讨药理筛选在完善以有效成分的正交实验结果为依据所确立的蒿鳖养阴软坚方制剂工艺中的作用。方法:以复方中辅药的水溶性(丹酚酸B、梓醇)和脂溶性(大黄素)有效成分为评价指标,按HPLC测定其含量,对溶剂倍量、提取次数、提取时间、乙醇浓度等因素各3个水平进行正交实验,据以制定提取工艺共10种方案。0.5mlCCl4/100gwt皮下注射16次(后15次注射用CCl4:橄榄油=4:6,V/V)辅以10%乙醇为饮料引起大鼠肝纤维化,成模后按体重随机区组法分组,分别以蒿鳖养阴软坚方10种提取方案各2个剂量(24.48g/kg,8.16g/kg)治疗用药,每日1次、每周6天灌胃共2个月,模型对照组和正常对照组则灌胃蒸馏水。以肝胶原蛋白含量、肝组织形态及血清中肝纤维化标志物评价疗效。结果:蒿鳖养阴软坚方按方案1-1(水提低含量和醇提低含量)提取,24.48g/kg能明显降低肝胶原蛋白及血清透明质酸和IV型胶原水平(P<0.05),按方案3-2(水提低含量和醇提高含量)提取,8.16g/kg能降低肝胶原蛋白及明显降低血清透明质酸和IV型胶原水平(P<0.05)。结论:对有效成分含量的正交实验基础上以疗效指标进行药理筛选应作为确立复方提取工艺方案的最终依据。; 方步武凌宁生汪芳邢伟郝洁张玉萍张永进刘洁莹崔志清; 关键词：正交实验胶原蛋白透明质酸

蒿鳖养阴软坚方对大鼠酒精性肝损伤的预防作用: 目的：探讨蒿鳖养阴软坚方对酒精性肝损伤的作用.方法：采用酒精灌胃及高脂饲料、吡唑和羰基铁等建立大鼠酒精性肝病模型,灌胃蒿鳖养阴软坚方预防性治疗.造模10周后检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(A...; 方步武赵敏郭娟崔志清; 关键词：酒精性肝病脂质过氧化物胶原蛋白

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天津市应用基础与前沿技术研究计划(06YFJZJC02900)

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