北京市自然科学基金(7011001)
- 作品数：8 被引量：52H指数：5
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- 相关机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市科委科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胶质细胞系源性神经营养因子在神经元发育中的生物学功能被引量：6
- 2006年
- 目的:考察胶质细胞系源性神经营养因子及其信号传导通路在神经元发育过程中的生物学功能,以及其中的分子机制。资料来源:应用计算机检索Medline1993-01/2005-10期间与胶质细胞系源性神经营养因子及其信号通路在神经元发育中的功能有关的文章,检索词“gliacellline-derivedneurotrophicfactor(GDNF)”分别和“neuralsurvival,neuraldifferentiation,neuralmigration,cellprogrammeddeath(apoptosis),RET,NCAM,mechanism”组合检索,并限定文章语言种类为English。资料选择:就检索到的700余篇文献进行筛选,以胶质细胞系源性神经营养因子及其信号通路在神经元发育中的生物学功能为主要内容的文献350多篇。其中研究内容与神经元存活,分化,迁移密切相关,以近5年且发表在较权威杂志者优先。资料提炼:最终选定105篇相关的文献,其中72篇检索到全文,而将其中观点相似的进行比较,以19篇近期发表的,叙述详尽的入选以进行综述。资料综合:胶质细胞系源性神经营养因子受体有GFRα和RET两类亚基,通过胶质细胞系源性神经营养因子/GFRα1信号传导通路能够促进神经元的存活、分化及正确迁移,除RET外神经系统内还存在新型的跨膜受体及复杂的胞内信号转导通路。结论:胶质细胞系源性神经营养因子对各种原因造成损伤后的神经细胞有保护和修复作用,在正常的神经元发育过程中也起到重要的作用。在神经系统发育中胶质细胞系源性神经营养因子存在多种相互关联的信号传导通路,能够促进发育中神经元的存活、分化及正确迁移。
- 郭瑾徐群渊
- 关键词：小神经胶质细胞脑源性神经营养因子神经元
- 建立永生化的中枢神经干细胞系被引量：1
- 2003年
- 神经干细胞是中枢神经系统中具有自我更新和多向分化能力的细胞。体外培养的神经干细胞系具有无限增殖及可分化的特点 ,建立的神经干细胞系可用于对神经系统发育及中枢神经系统疾病治疗的研究。本文对目前已建的细胞系、永生化方法及其用于治疗各种神经损伤的动物模型的进展做了回顾。在治疗研究中 ,通过观察其移植后迁移、存活、整和、迁移及分化情况 ,可以认为神经干细胞的确具有应用前景 ,但仍需进行大量基础研究方可用于临床。
- 兰兰徐群渊
- 关键词：神经干细胞体外培养细胞增殖细胞分化
- 6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型的制作和行为学评价被引量：7
- 2005年
- 6 羟基多巴胺能与多巴胺竞争性结合多巴胺转运体而进入细胞,通过诱发氧化应激反应、抑制 线粒体功能等选择性地损害多巴胺能神经元。将这种神经毒素于大鼠中脑黑质注射,神经元发生损伤至多巴 胺耗竭;于纹状体注射神经元损伤较慢呈渐进性过程。在这些情况下,神经元丢失程度都与注射部位相关。 在大鼠第三脑室注射能诱发出与人类极为相似的神经元退变模式,即中脑内不同区域的DA能神经元因敏感 性不同损伤程度也不同。大鼠模型的行为学评估包括药物诱发试验和非药物诱发试验,前者使用最多,而后 者种类较多。两种方法结合使用能使评估结果更有效、可靠。
- 张耀芬段德义徐群渊
- 关键词：神经元大鼠模型6-羟基多巴胺行为学帕金森病
- 胎儿脑组织体外保存获取神经干细胞的时限被引量：16
- 2002年
- 目的 探讨人胎儿脑海马组织体外保存不同时限后培养获取神经干细胞的可行性。 方法 利用无血清培养 ,从死亡后孵育在 4℃Hank液 0h、4h、2 4h、4 8h、72h及 96h的胎儿海马分离细胞 ,在体外连续传代培养 ;采用免疫荧光细胞化学方法检测培养细胞的神经上皮干细胞蛋白 (nestin)表达、经BrdU孵育后的BrdU表达以及诱导分化后的神经元标记 (tubulin)或星型胶质细胞抗原 (GFAP)表达 ;比较不同时限的细胞在Nestin的表达、增殖能力和诱导分化后神经元及胶质细胞比例的差异。 结果 从保存在 4℃Hank液 72h以内的各组胎儿海马中均可获得具有连续增殖能力的神经球 ,培养出的细胞Nestin表达为阳性 ,通过BrdU的摄取表明细胞处于活跃的有丝分裂状态 ,在此期限内各组之间无明显差异 ;诱导分化后的神经元和胶质细胞比例在各组之间亦相似 ;但随着在Hank液中孵育时间的延长 ,所获得的神经球数量呈减少趋势 ;在 96h组则未能获得神经球。 结论 人胎儿海马组织在 4℃Hank液中孵育 72h内可培养出呈神经球样生长的神经干细胞 。
- 姜传涛杨秋慧苏玉金赵春礼杨慧徐群渊
- 关键词：胎儿脑组织体外保存神经干细胞无血清培养
- 胎儿海马神经干细胞的体外培养及神经元前体细胞的纯化被引量：7
- 2002年
- 目的 从人胎儿海马分离培养具有自我更新和多向分化能力的神经干细胞 ,并从中纯化神经元前体细胞。 方法 利用无血清培养从胚胎 4个月的胎儿海马区分离细胞 ,并在体外连续传代培养 ;采用免疫荧光细胞化学技术检测神经上皮干细胞蛋白 (nestin)的表达、经BrdU孵育后的BrdU表达 ;比较两种诱导分化方法所获得的神经元和胶质细胞的比例差异 ;利用单细胞克隆技术纯化神经元前体细胞。 结果 分离的细胞具有连续克隆能力 ,在体外培养了 16个月 ,传了 4 3代 ;细胞冻存、复苏后仍保持干细胞特性 ;培养的细胞呈Nestin阳性 ,在BrdU孵育后呈BrdU阳性 ,诱导分化后的细胞能够表达Tubulin、NeuN或GFAP ;利用无血清诱导所得到的分化细胞中神经元的比例约占 80 % ,而血清诱导的分化细胞中胶质细胞的比例则大于 90 %。利用单细胞克隆技术可从神经球中纯化的细胞表达Nestin ,并且全部分化成神经元。 结论 从胎儿海马区分离的细胞具有自我更新能力和多向分化潜能 ,属于神经干细胞 。
- 姜传涛赵春礼杨秋慧杨慧王元身鲁强徐群渊
- 关键词：胎儿海马神经干细胞体外培养神经元前体细胞纯化无血清培养
- 免疫磁珠体外纯化人胎脑中CD133阳性干细胞的实验研究被引量：13
- 2004年
- 为了探讨免疫磁珠体外纯化人胎儿脑内 CD13 3阳性细胞的可行性 ,本研究取人胎儿脑室下区并制备单细胞悬液 ,采用磁珠分选法选择 CD13 3阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力并采用流式细胞仪鉴定纯化前后 CD13 3的阳性表达率。结果显示 ,分选后所得细胞纯度为 ( 85 .5 7± 1.66) % ,回收率为 ( 62 .3± 18) % ,纯化前后细胞活力无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :联合应用CD13 3表面标志及免疫磁珠分选系统可有效地从人胎儿脑组织中直接分离得到高纯度的 CD13 3阳性干细胞 。
- 余爽张京钟张海燕赵春礼徐群渊
- 关键词：免疫磁珠纯化人胎儿CD133细胞活力
- 温度敏感型基因永生化神经前体细胞系的建立被引量：2
- 2005年
- 目的建立温度敏感型永生化神经前体细胞系,鉴定其细胞生长特点及表达抗原的特性。方法利用逆转录病毒感染原代培养的胚胎13d SD大鼠中脑神经前体细胞,建立温度敏感型永生化神经前体细胞系RMN,利用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞分析方法测定RMN细胞的特征。结果在33℃条件下,RMN细胞呈多边形,有较短突起;细胞增殖迅速,群体倍增时间为48 h,可连续传代和冷冻保存;细胞表达SV40大T抗原,nestin蛋白和Nurr1蛋白;RMN细胞中未发现染色体倍体的异常,裸鼠接种20周后未观察到肿瘤的形成。在39℃条件下,RMN细胞增殖速度减缓,细胞形成较长突起。在含1%胎牛血清的培养基中培养1周后,RMN细胞可表达-βIII-tubulin,GFAP和Gal C等抗原,但SV40抗原表达减弱。结论RMN细胞系是SV40/tsA58基因永生化的大鼠神经前体细胞系,是具有温度敏感性及多分化潜能的前体细胞系。
- 张海燕段德义赵春礼兰兰赵咏梅王蓓蓓苏玉金徐群渊
- 关键词：神经前体细胞永生化体外培养免疫细胞化学
- 人胎儿脑室区神经前体细胞的分离纯化、培养及鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的建立有效的人胎儿神经前体细胞分离及纯化系统。方法取人自然流产胎儿脑室区(VZ)并制备单细胞悬液,采用免疫磁珠法分离CD133阳性及CD133阴性细胞群,体外培养并比较两者增殖能力。用免疫荧光化学方法检测CD133阳性细胞群中神经上皮干细胞蛋白(nestin)的表达及诱导分化后的多向分化潜能。结果纯化后CD133阳性细胞群体外扩增能力强,在无血清培养体系中能形成神经球并可连续传代,免疫荧光化学法检测表明其nestin抗原阳性,诱导分化后可分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。而CD133阴性细胞在培养体系中多呈单个分散状态,神经球形成数目与CD133阳性细胞有显著性差异(P<0.05)。结论免疫磁珠法可有效分离人胎儿脑内CD133阳性细胞,且该细胞在体外培养体系中具有神经前体细胞的特征。
- 余爽张京钟赵春礼张海燕徐群渊
- 关键词：神经前体细胞分离纯化免疫磁珠CD133胎儿
