上海市科学技术发展基金(954119028)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 相关作者：林琳莫忠根乔生军张尚权严缘昌更多>>
- 相关机构：上海市肿瘤研究所中国科学院上海生命科学研究院上海医科大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蓖麻毒素A链蛋白的表达、活性及其对人肺腺癌细胞SPC的毒性作用被引量：7
- 2000年
- 目的 :研究构建重组单链免疫毒素 ,对人体肿瘤进行导向治疗。方法 :采用PCR方法从克隆化载体中拉出蓖麻毒素A链 (ricinA)基因 ,装入经过改建的pTSA 18F表达载体 ,进行目的基因DNA序列分析后导入E .coliBL2 1(DE3)中进行表达 ,表达产物进行SDS PAGE和Westernblot检查 ,表达产物的生物活性通过RNAN 糖苷酶活性检查、无细胞体系中对蛋白质生物合成的抑制以及对肿瘤细胞的毒性作用来分析。结果 :SDS PAGE检查表明 ,转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中出现 1条Mr约 30× 10 3 大小、较空载体对照E .coliBL2 1(DE3) (pTS)明显浓黑的条带 ;Westernblot检查表明 ,转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中有杂交条带出现 ,而E .coliBL2 1(DE3) (pTS)中没有 ;表达蓖麻毒素A链蛋白能够特异地作用于大鼠肝 2 8S核糖体RNA ,使其产生约 45 0nt大小的核酸片段 ;对无细胞体系中蛋白质生物合成的IC50 为 3 7× 10 -9mol/L ,略高于天然蓖麻毒蛋白 ;具有与天然蓖麻毒蛋白相近的肿瘤细胞毒性。结论 :蓖麻毒素A链基因在转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中获得表达 ,表达产物具有与天然蓖麻毒蛋白相近的RNAN 糖苷酶活性 ,在无细胞体系中对蛋白质生物合成具有抑制作用 。
- 乔生军莫忠根林琳
- 关键词：蓖麻毒素A链肺腺癌SPC基因表达
- 表皮生长因子受体单抗诱导人肺癌SPCA1细胞凋亡被引量：1
- 2000年
- 目的 观察表皮生长因子受体 (EGFR)单克隆抗体是否可诱导人肺癌SPCA1细胞凋亡 ,以进一步说明EGFR单抗所具有的抗肿瘤作用。方法 以不同浓度的EGFR单克隆抗体干预培养人肺腺癌SPCA1细胞株 72h ,收集癌细胞并提取DNA ,采用凝胶电泳法和流式细胞仪分析细胞凋亡现象。结果 凝胶电泳显示 ,单抗浓度为 1 .0 μmol/L时 ,可见明显的凋亡梯状条带出现。流式细胞仪分析发现 ,在EGFR单抗干预培养的各SPCA1细胞样本存在低荧光的亚G1细胞群 ,而在空白对照和正常非相关IgG对照样本均未见低荧光细胞群存在。
- 陈小东张尚权严缘昌
- 关键词：单克隆抗体SPC肺肿瘤EGFR
