浙江省自然科学基金(Y306638)
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
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- 相关机构：浙江省农业科学院西北农林科技大学浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
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- 稻瘟病菌对二穗短柄草的致病性研究
- 本文为了进一步研究二穗短柄草与植物病原真菌之间的互作，建立了稻瘟病菌对二穗短柄草的接种与发病体系，观察了稻瘟病菌对二穗短柄草的致病特性，并与水稻和大麦上的发病情况进行了比较。结果表明，水稻稻瘟病菌能够在二穗短柄草上发生典...
- 王教瑜王小艳柴荣耀杜新法王艳丽孙国昌
- 关键词：二穗短柄草稻瘟病菌致病特性病理机制
- 丝状真菌目标基因替换过程中的策略与方法被引量：7
- 2007年
- 目标基因替换是基因功能分析的重要手段。随着基因组测序和转化技术的进展,该技术在丝状真菌功能基因组学中的应用越来越广泛,新的体系与方法不断建立和完善。文章在转化体系、打靶载体构建、突变体筛选等方面综述了丝状真菌目标基因替换过程中的策略与方法,并对各方法的优缺点及发展趋势进行了评述。
- 王教瑜杜新法柴荣耀孙国昌林福呈
- 关键词：丝状真菌基因功能分析
- GFP-PTS1与GFP-PTS2融合蛋白表达载体的构建与稻瘟病菌转化子的共聚焦分析
- 分别扩增 GFP 与过氧化物酶体定位信号的融合基因 GFP-PTS1和 GFP-PTS2,并构建 GFP、GFP-PTS1与 GFP-PTS2的双元表达载体,转化稻瘟病菌,筛选单拷贝插入转化子,在共聚焦显微镜下观测。结果...
- 王教瑜吴小燕杜新法柴荣耀张震毛雪琴邱海萍王艳丽孙国昌
- 关键词：绿色荧光蛋白稻瘟病菌
- 文献传递
- 稻瘟病菌致病性增强突变体B11的基因分析被引量：6
- 2009年
- 在农杆菌介导转化(AtMT)的稻瘟病菌突变体库中,筛选到一个菌丝生长增快,对大麦致病性增强的突变体B11。Southern杂交分析表明B11中T-DNA为单拷贝插入。通过TAIL-PCR克隆插入位点侧翼序列,序列测定与比对分析显示T-DNA位于假想基因MG01679的编码区内。利用PCR的方法,克隆基因的DNA和cDNA序列。该基因开放阅读框包括1个内含子和2个外显子,编码序列的长度为696 bp,编码231个氨基酸的多肽,编码产物属于ThiJ/PfpⅠ蛋白家族。因此,将该基因命名为MgThiJ1。MgThiJ1蛋白序列与尖胞镰刀菌假想蛋白FOXG_09029有57%的同源性,与禾谷镰刀菌假想蛋白FGSG_08979有54%的同源性。MgThiJ1基因可能为致病过程的负调控因子,其具体作用机制有待进一步研究。
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- 关键词：稻瘟病菌突变体基因基因功能蛋白序列
- GUS为负标记的稻瘟病菌目标基因替换突变体双筛选体系(英文)被引量：3
- 2009年
- 目标基因替换是基因功能研究的重要方法,在生物工程领域广泛应用。为了提高真菌目标基因替换的效率,以稻瘟病菌为研究对象,建立了一种以gusA基因为负筛选标记的目标基因替换突变体双筛选体系(GUS-DS)。首先,检测了78个真菌菌株的内源GUS活性,发现除3个菌株外均呈阴性。同时,将gusA基因导入稻瘟病菌、镰刀病菌、炭疽病菌后,转化子可获得高的GUS活性。表明gusA可用作真菌中的筛选标记。然后,以gusA为负标记,HPH为正标记,以过氧化物酶体定位信号受体基因MGPEX5与MGPEX7的替换为例,建立稻瘟病菌GUS-DS体系。对潮霉素抗性筛选获得的转化子通过GUS活性检测进一步筛选,呈阴性者为可能突变体。通过PCR与Southern杂交对可能突变体进行验证,以此评估GUS-DS的筛选效率。结果表明GUS-DS将Δmgpex5与Δmgpex7的筛选效率由原来的65.8%和31.2%分别提高到90.6%和82.8%。另外,还建立了一种适合于GUS-DS的多重PCR法(M-PCR)用于突变体的验证。通过扩增目标位点的不同区段,可以有效区分突变体、野生型和随机插入转化子。M-PCR法验证突变体简便、迅速,可信度与Southern杂交相同。GUS-DS及M-PCR为功能基因组学及生物工程的研究提供了有力的工具。
- 王教瑜张震杜新法柴荣耀毛雪琴邱海萍王艳丽孙国昌
- 关键词：GUS活性
- 植物病原真菌过氧化物酶体的发生机制及功能被引量：6
- 2008年
- 过氧化物酶体(peroxisome,P)是真核细胞中普遍存在的细胞器,参与多种重要的代谢过程。P的产生、增殖及降解是细胞器发生机理研究的重要部分。到目前已知的P发生相关基因有30多个,但其机制仍不完全清楚。作为一种多细胞真核生物,丝状真菌在P发生机制的研究中有重要价值。近年来,随着基因组序列的应用和真菌生物技术的进展,丝状真菌中P功能及发生机制的研究取得了较大进展。同时,作为丝状真菌真菌中的重要类群,植物病原真菌P在致病过程中的作用也引起关注。本文对P发生机制、在丝状真菌中的研究概况,以及与植物病原真菌致病性的关系进行了综述。
- 王教瑜吴小燕杜新法柴荣耀孙国昌
- 关键词：丝状真菌
