国家自然科学基金(31001050C1803)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 相关作者：田志军彭金美陈家锃安同庆王倩更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院上海兽医研究所东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)诱导特异性IFN-γ^+T细胞反应的研究被引量：3
- 2012年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)活疫苗(HuN4-F112株)诱导的特异性IFN-γ+T细胞反应与其保护作用的相关性,本研究将25头45日龄PRRSV阴性健康仔猪随机均分为5组,第1～3组分别于0 d、7 d、14 d免疫HuN4-F112疫苗(1头份/头,106.0TCID50),第4组为攻毒对照组,第1～4组于21 d用PRRSV强毒株HuN4-F5攻毒(3 mL/头,104.0TCID50),第5组为空白对照组。疫苗免疫后1周～2周产生部分保护,3周产生完全保护,第1～4组保护率分别为5/5、2/5、2/5和0/5。中和抗体检测显示免疫组免疫后7 d和14 d所有猪只均未检测到中和抗体,免疫后第21 d第1组4头猪检测到低效价(≤1∶8)的中和抗体。疫苗免疫后血清中IFN-γ含量略有升高,但变化不大,整体都处于较低的水平。采用酶联免疫斑点技术(ELISpot)检测PRRSV特异性IFN-γ+T细胞反应。免疫组免疫后7 d、14 d、21 d百万外周血单个核细胞中IFN-γ+T细胞频数分别为0±0、0±2、5±8,组间和组内统计分析显示差异不显著。结果表明在HuN4-F112株疫苗早期保护中,IFN-γ参与的特异性细胞免疫反应较弱,在早期免疫阶段难以发挥主要作用。本研究为了解PRRSV疫苗免疫保护机制提供参考,同时,也提示需要采用更多的指标和方法来评价该疫苗诱导的免疫反应。
- 吴玉全孟甄祥杨永倩陈家锃吴江冷超粮孙艳彭金美安同庆童光志田志军
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征酶联免疫斑点技术Γ干扰素
- 河南某规模化猪场内猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及多样性分析被引量：1
- 2015年
- 为研究规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）疫苗免疫猪群中PRRS病毒（PRRSV）感染及其变异情况,本研究采集了775份血清及21份病料样品进行病原检测分析,共分离获得了14株高致病性PRRSV（HP-PRRSV）分离株,分别将其命名为Henan-A1～Henan-A14.通过对其全基因组测序及比对分析结果显示,分离株与HP-PRRSV代表株JXA1、HuN4差异显著,同源性仅约为96％.此外,这14株分离株间差异较大,平均差异率达3.44％,呈现不同的变异方向.进一步研究表明,有5个分离株不能在Marc-145细胞中增殖,这是区别于其他HP-PRRSV的重要特征,表明部分分离株的细胞嗜性发生了改变.采用抗HP-PRRSV HuN4株血清对14株分离株进行中和试验,结果显示5份血清对其中9株分离株的中和活性较低,表明目前分离的大部分PRRSV分离株的中和抗原已经发生了较大的变异.本研究结果为有效预防PRRS提供了实验依据.
- 刘益民陈家锃白云张洪亮张秋月王倩张武超叶超彭金美安同庆田志军王笑梅
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞嗜性
- 一株不能被高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗抗血清中和的HP-PRRSV的分离鉴定被引量：5
- 2014年
- 为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的遗传变异及流行情况，本研究采用猪肺泡巨噬细胞培养分离PRRSV野毒株，从某疑似猪繁殖与呼吸综合征发病猪场的发病猪肺脏病料中分离了一株PRRSV，命名为HEL-12。并将该病毒测序分析，其基因组序列已提交到NCBI （序列号：KJ019330）。基因序列比对显示，该分离株与经典株相比其NSP2蛋白存在HP-PRRSV 30个氨基酸缺失的典型特征，与HP-PRRSV代表株JXA1和HuN4株的同源性仅为97.3 %，其变异主要位于基因组编码的结构蛋白GP2～GP5和非结构蛋白NSP2。血清中和试验表明10份HP-PRRSV疫苗抗血清均不能中和该病毒株，表明HEL-12的抗原发生了较大变异，是一株新的HP-PRRSV变异株。本研究表明，PRRSV一直处于不断变异中，需要对其遗传变异持续监测。
- 陈家锃白云常丹张秋月王倩冷超粮张武超赵鸿远叶超李琳田志军彭金美安同庆童光志
- 关键词：病毒中和试验
- 两株2.1d新基因亚型猪瘟病毒的全基因组序列分析及其基因亚型分子特征被引量：2
- 2016年
- 为研究猪瘟病毒(CSFV)2.1d新基因亚型的基因组特征,本研究根据Gen Bank中登录的Zj0801株CSFV全基因组序列设计合成6对引物,通过RT-PCR方法对2014年分离自山东的两株2.1d亚型CSFV(SDSG1410和SDLS1410)进行全基因组测序,两株CSFV全长均为12 296 nt。全基因组遗传演化分析表明这两个分离株位于一个独立分支中,属于2.1d亚型,与E2基因分型结果一致。核苷酸和推导氨基酸同源性分析显示,分离株全基因组同源性与参考株相比差异较大,与Zj0801株的全基因组同源性最高为97.3%~97.5%,而与1.1亚型的Shimen和HCLV株的同源性仅为85.0%~85.1%和84.3%~84.4%;部分基因和非翻译区变异较大,如N^(pro)、C、E2、NS2、NS5A和3'UTR。对全基因组氨基酸序列分析,结果显示2.1d亚型CSFV在V^(640)、K^(992)、A^(1020)、M^(1090)、R^(1395)和D^(2374) 6处氨基酸上具有共同的分子特征。以上研究结果增加了CSFV 2.1d新基因亚型的分型依据。
- 冯丽苹张洪亮彭金美刘春晓王倩李真吴桐翁长江蔡雪辉田志军熊涛
- 关键词：猪瘟病毒分子特征
- 2015年我国部分地区2.1d新基因亚型猪瘟病毒的分子流行病学分析被引量：10
- 2015年
- 为了解猪瘟病毒（CSFV）在我国的流行情况，本研究对2015上半年来自4个省疑似猪瘟（csF）病料样品采用RT．PCR方法进行检测，28份样品中14份为CSFV阳性，并对这些阳性样品进行CSFVE2基因遗传进化分析。结果表明，14个病毒株中11个属于2．1d新基因亚型，它们与CSFV代表株Shimen、HCLV和2．1b基因亚型病毒株的核苷酸同源性分别为82．8％～84．1％、81．1％～82．4％和92．6％～97．1％，氨基酸同源性分别为89．8％～91．2％、88．2％～89．8％和94．1％～98．9％，其余3个病毒株属于2．1b亚型。这些2．1d亚型新分离株在E2基因的4个氨基酸（R31、S34、K303和A331）上具有相同的分子特征。本研究结果与我们2014年CSFV流行病学研究结果一致，表明2．1d亚型病毒株已成为我国现阶段CSFV的主要流行株。
- 冯丽苹张洪亮刘春晓冷超粮陈家锃李真彭金美王倩白云张武超安同庆蔡雪辉童光志田志军
- 关键词：猪瘟病毒流行病学
