国家自然科学基金(30772409)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
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- TLR9在人鼻黏膜上皮细胞中的表达及意义被引量：7
- 2008年
- 目的:利用RT-PCR、免疫组织化学及流式细胞术检测原代培养的人鼻黏膜上皮细胞TLR9的表达水平及意义。方法:原代培养人鼻黏膜上皮细胞,设计TLR9的引物,RT-PCR检测TLR9 mRNA在鼻黏膜上皮细胞中的表达。免疫组织化学及流式细胞术检测原代培养的人鼻黏膜上皮细胞中TLR9的表达水平。结果:400倍光镜下观察结果显示,原代培养的鼻黏膜上皮细胞呈圆形或不规则形,饱满贴壁。RT-PCR结果显示,鼻黏膜上皮细胞有TLR9 mRNA的表达。通过与内参照物GAPDH进行灰度分析比较,发现鼻黏膜上皮细胞中TLR9的表达高于外周血单个核细胞阳性对照组,差异有统计学意义。结论:人鼻黏膜上皮细胞中有TLR9的表达,TLR9 mRNA在人鼻黏膜上皮细胞中的表达高于外周血单个核细胞。
- 朱学伟朱冬冬董震孙克巍
- 关键词：鼻黏膜上皮细胞
- 唾液酸Lewis-X在慢性鼻-鼻窦炎鼻黏膜组织中的表达
- 2008年
- 目的:探讨唾液酸Lewis-X(SleX)在慢性鼻-鼻窦炎鼻黏膜组织中的表达。方法:利用SleX单克隆抗体,通过免疫组织化学技术对9例慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜组织及7例正常对照鼻黏膜组织进行染色,分析SleX在鼻黏膜组织中的表达。结果:SleX在鼻黏膜上皮细胞及中性粒细胞均有表达。SleX在慢性鼻-鼻窦炎鼻黏膜上皮细胞中的表达阳性率为88.9%,在正常鼻黏膜上皮细胞中的表达阳性率为14.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SleX在慢性鼻-鼻窦炎黏膜组织高表达,可能参与慢性鼻-鼻窦炎的发生。
- 朱学伟朱冬冬孙克巍王宇声董震
- 关键词：鼻窦炎鼻黏膜E选择素
- 人鼻黏膜上皮细胞中白细胞介素12和细胞间黏附分子1及单核细胞趋化因子3的表达研究被引量：4
- 2008年
- 目的:利用RT-PCR检测原代培养的人鼻黏膜上皮细胞中IL-12、细胞间黏附分子1(ICAM-1)以及单核细胞趋化因子3(MCP-3)mRNA的表达。方法:获取人鼻黏膜组织,原代培养人鼻黏膜上皮细胞。设计IL-12 p35亚基、IL-12 p40亚基I、CAM-1以及MCP-3的引物,参照物采用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH),目标扩增片段938 bp。半定量RT-PCR检测其mRNA在鼻黏膜上皮细胞的表达。结果:×400光镜下观察结果显示原代培养的鼻黏膜上皮细胞形状呈圆形或不规则形,饱满贴壁。RT-PCR结果通过1%琼脂糖凝胶电泳显示,鼻黏膜上皮细胞有IL-12 p35I、CAM-1以及MCP-3 mRNA的表达,但无IL-12 p40亚基的表达。结论:人鼻黏膜上皮细胞中有IL-12 p35、ICAM-1以及MCP-3的mRNA表达,但无IL-12p40亚基的表达。人鼻黏膜上皮细胞不能合成完整有活性的IL-12。
- 朱学伟朱冬冬孙克巍董震
- 关键词：鼻黏膜上皮细胞白细胞介素细胞间黏附分子单核细胞趋化因子
- Toll样受体9配体CpG寡核苷酸在特异性免疫治疗中的作用被引量：3
- 2008年
- 变应性疾病的变应原特异性免疫治疗开始于1911年，是目前惟一能够影响变应性鼻炎自然进程的治疗手段。经过一个世纪的临床实践，特异性免疫治疗日臻完善，尤其是标准化变应原疫苗在特异性免疫治疗中的应用和推广，大大降低了急性超敏反应等并发症，同时在临床上取得了令人满意的疗效。但目前特异性免疫治疗还面临着一些需要解决的问题。首先，免疫接种后急性超敏反应虽然被限制在极低的水平，但仍有个别病例发生。
- 朱学伟朱冬冬董震
- 关键词：特异性免疫治疗TOLL样受体9CPG寡核苷酸变应原疫苗配体变应性疾病
- 路易斯寡糖-X及CD24在鼻内翻性乳头状瘤中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的探讨路易斯寡糖-X(sialyl Lewis-X,SLeX)和CD24的表达与鼻内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma,NIP)病理特征的关系。方法对11例NIP组织标本进行HE染色,并用SleX及CD24单克隆抗体进行免疫组织化学染色分析。结果11例NIP患者中,1例(9.1%)为重度不典型增生,但尚未突破基底膜。SleX特异性染色定位于细胞膜,NIP组中有9例(81.8%)阳性表达,对照组中有1例(16.7%)阳性表达(P<0.05)。CD24特异性染色定位于细胞膜及细胞浆,NIP组中有8例(72.7%)阳性表达,对照组中只有少量淋巴细胞阳性表达,鼻黏膜上皮细胞阴性表达。结论部分NIP在诊断时就伴有重度不典型增生,同时有CD24表达,是一种交界性肿瘤。SleX在NIP中的表达及基质炎性细胞的浸润提示其与炎性反应关系密切。
- 朱学伟朱冬冬孙克巍孟粹达董震
- 关键词：乳头状瘤内翻抗原CD24P选择素
- Toll样受体9配体CpG寡脱氧核苷酸鼻内预免疫对豚鼠鼻变态反应抑制作用的研究被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨Toll样受体9（toll like receptor 9,TLR9）配体CpG寡脱氧核苷酸（CpG oligodeoxynucleotides）鼻内预免疫对豚鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）的抑制作用.方法 50只实验豚鼠采用随机数宁表法分为5组,每组10只,分别为：空白对照组（简称对照组）、AR模型组（AR组）、CpG组、CpG＋卵清蛋白组（ovalbumin,OVA,CpG＋OVA组）、CpG模拟序列＋OVA组（CpG-M＋OVA组）.AR组及对照组给予生理盐水预免疫;CpG组给予5.2 μg CpG826;CpG＋OVA组给予5.2μg CpG＋4.8μg OVA;CpG-M＋OVA组给予不具免疫活性的CpG1982加OVA滴鼻.4个实验组动物依次进行腹腔OVA和氢氧化铝凝胶基础致敏,2次鼻腔激发,对照组则给予生理盐水.观察鼻黏膜组织损伤情况及嗜酸粒细胞计数.酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清及鼻黏膜组织匀浆中白细胞介素（IL）5及γ干扰素（interferon γ,IFN-γ）的水平.免疫荧光（immunofluorescence,IF）观察细胞间黏附分子（intercellular adhesion molecule,ICAM）1在鼻黏膜上皮组织的表达.采用SPSS 11.0软件对数据进行分析.结果 CpG组动物的喷嚏,抓鼻症状要轻于AR组（Z值分别为3.412、3.523,P值均〈0.05）,CpG＋OVA组症状轻于CpG-M＋OVA组（Z值分别为3.984、4.452,P值均〈0.05）.CpG组豚鼠鼻黏膜组织嗜酸粒细胞平均（（x）±s,下同）计数为（20.0±9.6）个,低于模型组的（53.5±19.8）个,CpG＋OVA组豚鼠鼻黏膜组织嗜酸粒细胞计数为（9.5±5.7）个,低于CpG-M＋OVA组的（49.2±18.9）个,差异有统计学意义（q值分别为3.785、4.576,P值均〈0.05）.ELISA结果显爪CpG组血清及鼻黏膜组织匀浆中IL-5水平低于AR组（q值分别为3.890、4.019,P值均〈0.05）,而CpG＋OVA组低于CpG-M＋OVA组（q值分别为4.128、4.245,P值均〈0.05）,而各组IFN-γ的水平差异尢统计学意义（F值分别为2.078、2.102,P值均〉0.05）.免疫荧光结果赤示CpG组鼻黏膜组织ICAM-1的表达水平要低于AR组,CpG＋O
- 朱冬冬朱学伟姜晓丹董震
- 关键词：变应性寡脱氧核糖核苷酸类TOLL样受体9
- 携带T-bet基因的重组腺病毒载体的构建
- 2008年
- 目的包装携带人T细胞转录因子T-bet基因的重组腺病毒,为研究T-bet在人鼻黏膜中作用的分子机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法从健康人PBMC中扩增出转录因子T-bet的cDNA序列,构建重组穿梭载体pDC316-T-bet;采用阳离子脂质体介导将重组穿梭载体pDC316 T-bet与pBHGloxΔE1,3C re质粒共转染293细胞,包装出携带T-bet基因的重组腺病毒rAdT-bet,空斑纯化,PCR鉴定阳性rAdT-bet。结果以空斑纯化后的rAdT-bet为模板,作PCR均扩增出含1633 bp的片断,阳性率达100%,证实T-bet稳定整合于重组腺病毒。结论利用AdMaxTM腺病毒包装系统成功包装了rAdT-bet,为进一步研究T-bet基因在鼻黏膜中作用的分子机制和探讨变应性鼻炎治疗新手段均具有重要意义。
- 孙克巍朱学伟朱武飞朱冬冬董震
- 关键词：转录因子T-BET重组腺病毒变应性鼻炎
