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四川省部分猪场PCV-2感染的血清学调查被引量：5: 2010年; 为了研究四川省规模化猪场猪圆环病毒2型(PCV-2)的感染现状和不同生长阶段猪群的感染情况,研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自四川省5个地区6个猪场的种公猪、母猪、后备母猪、保育猪及哺乳仔猪共184份血清进行了PCV-2的抗体检测,同时运用PCR方法对种公猪及经产母猪的20份扁桃体进行了PCV-2的抗原检测。结果表明:PCV-2抗体总阳性率为69.57%(128/184),种公猪阳性率为75.00%(18/24),经产母猪阳性率为97.87%(46/47),后备母猪阳性率为91.11%(41/45),保育猪阳性率为43.75%(21/48),哺乳仔猪阳性率为10.00%(2/20);PCR检测结果为种公猪阳性率为70.00%,经产母猪阳性率为90.00%。说明四川地区普遍存在圆环病毒的感染并且比较严重。; 吴俊朱玲易悦石恬; 关键词：猪圆环病毒2型血清学酶联免疫吸附试验

猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达及在ELISA中的初步应用被引量：5: 2011年; 本研究旨在建立以PCV2Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET32a-ORF2并转化至Rosetta菌,在1.0mmol.L-1 IPTG和37℃条件下诱导下,Cap蛋白获得高效表达,Western blot检测证实其具有免疫反应活性,以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果表明抗原最适包被浓度为2.16μg.mL-1;血清最佳稀释度为1∶40;抗原最佳包被条件为4℃过夜;最佳封闭条件为1%BSA 37℃1h;血清反应时间为37℃30min;酶标二抗最适作用时间为37℃45min;底物最佳反应条件为37℃显色15min。用该方法对四川省184份猪血清样品进行检测,总阳性率为80.98%(149/184),与商品化的PCV2ELISA试剂盒得到的结果基本一致。本试验成功建立了PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测。; 赵玲朱玲郭万柱徐志文漆信桥李凤勤; 关键词：圆环病毒2型 CAP蛋白间接ELISA

猪输血性传播病毒2型全基因组的克隆与序列分析被引量：2: 2011年; 为了监测猪输血性传播病毒2型(TTV2)的疫源和进化情况,为进一步研究TTV2的形态结构、遗传变异和基因功能奠定生物学基础,参照国外发表的猪输血性传播病毒(TTV)全基因组核苷酸序列(GU456386.1),设计3对特异性引物,采用巢式PCR对采自四川省的疑似猪输血性传播病毒感染的血清样品进行TTV全基因组的克隆、测序和拼接,并对其进行同源性分析和遗传进化分析。结果显示,该基因组全长2 802bp,与国内外参考株同源性介于87%～96%之间,ORF1的同源性介于81%～95%;ORF2的同源性较高,介于93%～99%之间。系统进化树分析表明,该分离株与美国株PTTV2c-VA的同源性高达96%。结果表明,该毒株为TTV2,与国内外参考株有一定的相似性。; 赵玲徐志文朱玲梅淼吴云飞; 关键词：克隆

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四川省应用基础研究计划项目(2006J13-047)