国家自然科学基金(30271435)
- 作品数：13 被引量：24H指数：3
- 相关作者：高广道蒋小英周娟林元喜刘进军更多>>
- 相关机构：西安交通大学第四军医大学西安医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞表达上调基因的分离和鉴定被引量：5
- 2005年
- 为了对成年大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CF)受血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)刺激后上调基因表达 谱进行筛选及分析,以受Ang Ⅱ刺激CF为实验方,未刺激CF为驱动方,进行抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH),建立消减cDNA文库。经斑点杂交筛选文库后将表达变化显著的部分阳性克隆测序及同源性分析,共 获得19个上调表达的基因,分别与细胞外基质、细胞周期、胞内信号转导、细胞骨架及细胞代谢等功能相关,并克隆 到7个新的基因表达序列标签(expressed sequence tags,EST)。我们的数据证实了SSH可以有效地克隆成年大鼠CF受Ang Ⅱ 刺激后上调表达基因,对这些基因的研究将有助于阐明心肌重塑的分子机制。
- 王新凤高广道杨予白周娟王亚文苏兴利王琰韩锋产白玉杰
- 关键词：成纤维细胞抑制消减杂交
- 血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞表达下调基因的分离和鉴定
- ＜正＞目的:AngⅡ在心肌重塑的发生发展中起重要的调控作用,其中多种效应是由心肌成纤维细胞（CF）表型和代谢改变所致。研究证实:AngⅡ可通过影响CF合成分泌MMP及其抑制物TIMP来改变胶原的合成与降解;AngⅡ也可促...
- 王新凤高广道楚雍烈韩锋产张文红白玉杰林元喜
- 血管紧张素Ⅱ受体阻断对心肌成纤维细胞信号转导相关基因表达谱的影响被引量：4
- 2006年
- 为了研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinII,AngII)受体在成年大鼠心肌成纤维细胞的信号转导机制,分离及培养成年Sprague-Dawley大鼠心肌成纤维细胞,采用免疫组化染色测定AngⅡ受体的蛋白表达。将细胞随机分为四组进行药物干预48h:AngⅡ组、AngⅡ+losartan组、AngⅡ+PD123319组和AngⅡ+losartan+PD123319组。抽提mRNA制备cDNA探针,与G蛋白耦联受体信号通路发现者基因芯片杂交,筛选表达差异的基因。发现血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinIItype1,AT1)受体被losartan阻断后,AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ2型(angiotensinIItype2,AT2)受体蛋白高表达;34个基因表达差异在2倍以上,30个下调,4个上调,其最大改变不超过20倍;9条信号通路被活化:cAMP/PKA、Ca2+、PKC、PLC、MAPK、PI-3K、NO-cGMP、Rho、NF-κB通路。当AT2受体被PD123319阻断时,64个基因表达差异在2倍以上,48个下调,16个上调;11条途径基础活化,其中7个基因的改变在30倍以上:Cyp19a1(37倍)、Il1r2(42倍)、Cflar(53倍)、Bcl21(31倍)、Pik3cg(278倍)、Cdkn1a(90倍)、Agt(162倍)。在AT1受体阻断的基础上再阻断AT2受体,46个基因表达差异在2倍以上,36个下调,10个上调;11条信号途径全部活化。其结果与单独阻断AT2受体信号途径基本一致。RT-PCR选取IL-1β和TNF-α进行验证,结果与芯片各组间的变化趋势基本相符。结果表明,在成年大鼠心肌成纤维细胞,AT2受体阻断明显不同于AT1受体阻断,在信号转导通路相关基因表达谱上,两者有显著差异。
- 蒋小英高广道王新凤林元喜王亚文杨予白
- 关键词：心肌成纤维细胞AT2受体CDNA芯片
- AT2对成年压力超负荷性肥大心肌细胞TNFα、IL-1β及IL-6分泌的调控被引量：2
- 2008年
- 目的观察AT2对肥大心肌细胞炎症因子合成的调控作用及AT1和AT2间的相互关系。方法采用腹主动脉缩窄法构建SD大鼠压力超负荷性心肌肥大模型。选用术后8周肥大的心肌细胞,将其分为AngⅡ组、AngⅡ+losartan组、AngⅡ+PD123319及AngⅡ+losartan+PD123319组。待实验结束,RT-PCR法检测细胞TNFα、IL-1β及IL-6的mRNA表达水平,放免法检测TNFα、IL-1β及IL-6的蛋白表达。结果与AngⅡ组相比,AT1拮抗剂losartan不影响TNFα和IL-1β的mRNA及蛋白表达。单独应用AT2拮抗剂PD123319及联合应用losartan和PD123319均可使TNFα和IL-1β的mRNA及蛋白表达水平下调。联合应用二者TNFα和IL-1βmRNA的表达水平介于单独应用losartan和PD123319组之间。与AngⅡ单独联用losartan或PD123319相比,同时联用二者可使IL-6mRNA的表达水平上调。结论AT2参与了肥大心肌细胞炎症因子的表达调控。AT1与AT2之间并非简单的拮抗关系。
- 周娟徐心刘进军林元喜高广道
- 关键词：心肌细胞白介素-1Β
- 微小RNA在心肌重塑中的作用
- 2009年
- 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类含有约22个核苷酸的内源性非编码RNA,通过与靶mRNA的3′非翻译区(3′UTR)互补配对,抑制翻译或促进靶mRNA的降解介导转录后基因调控,涉及多种生物学过程。目前研究表明,miRNA参与了心脏的发育、病理性心肌肥大等过程,表明miRNA可作为新的治疗心肌肥大的靶向分子。本文就新近有关miRNA在心肌重塑中的研究进展予以综述。
- 蒋小英吕社民
- 关键词：微小RNA心肌重塑肾素-血管紧张素系统
- 血管紧张素Ⅱ受体阻断对成年大鼠心肌成纤维细胞ColⅠ和TIMP-1 mRNA水平的影响
- 2007年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)2型受体(AT2)在心肌成纤维细胞胶原代谢中的作用,以及AT2受体和AngⅡ1型受体(AT1)作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,将细胞分为4组进行药物干预:AngⅡ组、AngⅡ+Losartan(AT1受体阻断剂)组、AngⅡ+PD123319(AT2受体阻断剂)组、AngⅡ+Losartan+PD123319组,应用半定量RT-PCR检测4组细胞中的Ⅰ型胶原(ColⅠ)、组织蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)mRNA水平的表达。结果以β-actin作为内参照,AT1受体阻断使ColⅠ mRNA水平降至原水平的71.8%(P<0.05),AT2受体阻断降至81.5%(P<0.05),共阻断降至50.9%(P<0.05);AT1受体阻断使TIMP-1 mRNA水平降至原水平的88.1%(P<0.05),AT2受体阻断降至75.4%(P<0.05),共阻断后降至44.1%(P<0.05)。结论在成年大鼠心肌成纤维细胞,AT2受体阻断下调ColⅠ和TIMP1 mRNA水平,说明AT2受体参与胶原的合成与降解代谢,有促进心肌纤维化的作用。
- 蒋小英高广道
- 关键词：心肌成纤维细胞I型胶原
- 胚胎干细胞向心肌细胞分化机理的研究现状
- 2004年
- 蒋小英高广道
- 关键词：心肌细胞移植分化胚胎干细胞基因调控ES细胞
- 心肌成纤维细胞在血管紧张素Ⅱ刺激下表达下调基因的分离和鉴定
- 2006年
- 目的:对成年大鼠心肌成纤维细胞(CF)受血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后下调基因表达谱进行筛选及分析。方法:以受AngⅡ刺激CF为驱动方,未刺激CF为实验方,进行抑制消减杂交(SSH)建立消减cDNA文库。经斑点杂交筛选文库后将部分阳性克隆测序及进行同源性分析。结果:共获得17条下调表达基因,分别与胞内信号转导、转录抑制、纤维沉积和细胞骨架重构相关,并克隆到4条新基因表达序列标签(EST)。结论:SSH有效地克隆了成年大鼠CF受AngⅡ刺激后下调表达基因,对这些基因的研究将有助于阐明心肌改建的分子机制。
- 王新凤高广道刘健林元喜国荣楚雍烈苏兴利韩锋产张文红白玉杰
- 关键词：心肌成纤维细胞抑制性消减杂交基因表达
- 血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞表达下调基因的分离和鉴定
- 目的:AngⅡ在心肌重塑的发生发展中起重要的调控作用,其中多种效应是由心肌成纤维细胞(CF)表型和代谢改变所致。研究证实:AngⅡ可通过影响CF合成分泌MMP及其抑制物TIMP来改变胶原的合成与降解;AngⅡ也可促进CF...
- 王新凤高广道楚雍烈韩锋产张文红白玉杰林元喜
- 血管紧张素Ⅱ2型受体对AngⅡ诱导成年大鼠心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β的作用被引量：4
- 2007年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype2 receptors,AT2)在成年心肌成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α(α-TNF)和白介素1β(IL-1β)中的作用,明确AT2受体和AT1受体作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,将细胞分为4组进行药物干预:对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、AngⅡ+氯沙坦(losartan)组、AngⅡ+PD123319组,应用放射免疫法检测各组细胞分泌α-TNF和IL-1β的水平。结果AngⅡ诱导使心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β明显增加。与AngⅡ组相比,α-TNF在AT1受体阻断后下调了58.7%(P<0.05),AT2受体阻断后下调了65.9%(P<0.05);IL-1β在AT1受体阻断后下调了69.1%(P<0.05),AT2受体阻断后下调了78.7%(P<0.05)。结论AT2受体参与介导心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β。
- 蒋小英高广道周娟国荣林元喜
- 关键词：心肌成纤维细胞Α肿瘤坏死因子白介素1Β
