转基因生物新品种培育专项(2009ZX08012-014B)
- 作品数：9 被引量：70H指数：5
- 相关作者：黄明周光宏肖笑沈文飚祝长青更多>>
- 相关机构：南京农业大学江苏出入境检验检疫局南京晓庄学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 储藏温度和时间对转基因大豆外源基因及蛋白的影响被引量：2
- 2012年
- 采用PCR和Western-blot方法,研究了储藏过程中不同温度(4、25和37℃)和不同时间(10、30、50、70和90 d)对转基因大豆外源cp4-epsps基因和EPSPS蛋白的影响。结果表明:在储藏过程中外源cp4-epsps基因没有发生明显变化;外源EP-SPS蛋白发生轻微降解,降解产物相对分子质量约为46.2×103,而且37℃降解条带较25℃明显,说明相对较高的温度(25和37℃)在储藏90 d期间能够促进外源EPSPS蛋白的降解,而对基因完整性影响较小。
- 周兴虎祝常青吴洪洪沈文飚周光宏黄明
- 关键词：转基因大豆储藏温度储藏时间WESTERN-BLOT
- 大豆转基因检测中DNA提取方法的比较研究被引量：19
- 2013年
- 为筛选出用于大豆DNA提取的适宜方法,分别使用Bayer法、DuPont法、Monsanto法、Qiagen和Tiangen试剂盒法提取大豆子粒DNA,并通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法与实时荧光聚合酶链式反应分析DNA质量。结果显示:Bayer法提取的DNA含有较多杂质,抑制实时荧光聚合酶链式反应;Monsanto法提取的DNA纯度差且得率低,不符合检测要求;DuPont法、Qiagen与Tiangen试剂盒法能提取到纯度好、得率高、完整性好的DNA,符合实时荧光聚合酶链式反应的检测要求,但是Qiagen试剂盒法成本过高。因此,DuPont法与Tiangen试剂盒法适用于大豆转基因检测中的DNA提取。
- 刘欣祝长青王毅谦沈赟黄明蒋原周光宏
- 关键词：大豆DNA提取转基因生物琼脂糖凝胶电泳
- 转基因稻米DNA提取方法的比较研究被引量：7
- 2010年
- 目的:建立一种以水稻种子为原料,简便、快速、有效的基因组DNA提取方法,作为转基因稻米的PCR检测基础。方法:选择传统的CTAB法、改良的碱处理法、高温水煮法,以转基因糙米、非转基因糙米、转基因精米为材料提取DNA,并对提取物进行检测。结果:改良的碱处理法提取的DNA模板的完整性、纯度和PCR反应方面与传统CTAB法相近,且比CTAB法的产率高、耗时短、成本低。结论:改良的碱处理法可以代替传统的CTAB法用于转基因稻米检测中DNA模板的制备。
- 宋尚新肖红梅高峰周光宏邱良焱
- 关键词：水稻DNA提取转基因检测
- 转基因食品常用检测方法的研究现状与展望被引量：11
- 2009年
- 介绍了转基因食品的发展现状,简述了常用的转基因技术,重点罗列了食品安全控制中转基因成分的检测方法,并在此基础上对不同的检测方法进行了比较。
- 詹世红陈楚芹李聪肖笑吉宏武黄明
- 关键词：转基因食品基因重组安全性
- 大豆中转基因成分的定性PCR检测被引量：3
- 2013年
- 实验利用CTAB法对大豆DNA进行提取,设计并合成引物对转基因大豆的内源基因Lectin、外源基因CaMV35S启动子、NOS终止子和目的基因Cp4 EPSPS基因进行PCR检测,成功建立了大豆中转基因成分的检测方法。
- 郭云鹂俞淑芳张凤红周红霞
- 关键词：转基因大豆DNA提取PCR检测
- 改良一步法提取植物RNA·DNA和蛋白质的研究
- 2011年
- [目的]利用改良的一步法提取植物RNA、DNA和蛋白质。[方法]采用CTAB试剂对Biozol抽提法进行改良,用一步法分别对玉米(Zea mays L.)、大豆(Glycine max L.)、苜蓿(Medicago sativa L.)和黄瓜(Cucumis sativus L.)4种作物根的RNA、DNA和蛋白质进行共提取,并对其HO-1和CDPK1基因及HO-1蛋白质进行鉴定。[结果]经紫外分光光度计测定和琼脂糖凝胶电泳分析证明获得的RNA和DNA样品纯度较高;HO-1和CDPK1基因的RT-PCR结果呈阳性;所提取的蛋白质也可用于Western blot分析;整个提取过程只需3h。[结论]该方法实用性较强,具有广泛的应用价值。
- 肖笑韩斌徐晟李乐何健黄明谢贵水沈文飚
- 关键词：一步法RNADNA蛋白质
- 免疫PCR检测技术及其在食品安全领域中的应用被引量：7
- 2010年
- 免疫PCR技术是一种在免疫学和PCR技术基础上建立起来的新型检测技术,这种技术同时具有ELISA的高特异性和PCR的高灵敏性。本文介绍了免疫PCR的技术原理和反应体系,比较其不同种类和应用范围,指出免疫PCR存在的问题并提出相应的对策;归纳了目前免疫PCR在食品安全等领域中的应用;并结合免疫PCR技术的优势提出其在食品安全检测中的应用前景。
- 黄明肖笑徐晟周兴虎周光宏沈文飚
- 关键词：免疫PCR食品安全
- 内源性蛋白酶对宰后肌肉嫩化机制研究进展被引量：17
- 2011年
- 肌肉的宰后嫩化机制一直是国内外肉品科学研究的一个热点,目前认为肌肉宰后嫩度的改善主要归因于内源性水解酶作用所引起的肌原纤维蛋白的有限降解。钙激活酶虽然是宰后嫩度改善的一个主要贡献者,但不是惟一的,而是多种内源酶类协同作用的结果。本文综述了溶酶体组织蛋白酶、蛋白酶体、钙激活酶在宰后嫩化过程的作用;介绍了细胞凋亡的特点、通路及凋亡酶,并对细胞凋亡酶对宰后嫩度改善的潜在贡献进行了讨论;最后分析了细胞凋亡酶和钙激活酶在宰后成熟过程中的交互作用及共同贡献于肌肉宰后嫩化的可能性。
- 黄明黄峰黄继超徐宝才周光宏徐幸莲
- 关键词：钙激活酶凋亡
- PCR法定性检测大豆食用油中转基因成分被引量：5
- 2012年
- 针对大豆食用油中核酸含量低且被严重破坏、DNA难以提取的问题,对CTAB法进行优化,有效从食用油中提取到可用于PCR扩增反应的DNA模板。同时定性检测出大豆内源基因lectin,外源调控序列启动子CaMV35S、终止子Nos及目的基因CP4-EPSPS序列,成功建立了基于PCR技术在大豆食用油中快速检测转基因成分的方法。
- 周红霞华春张红琳李俊芳祝长青黄明周光宏
- 关键词：转基因检测DNA提取PCR
