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短蛸胃肠道产蛋白酶菌株的筛选及其酶学性质研究被引量：1: 2014年; 为获得能产生高效蛋白酶的新菌株,应用于洗涤、食品、饲料加工及医药等领域,由短蛸的胃肠道中分离筛选出10种胃肠道菌株,其中4种菌S-1、S-2、S-3和S-8的蛋白酶活性较高,对其产生的蛋白酶进行生化特性的研究。结果显示,这4种菌株发酵产粗酶液的酶活性分别为1289、937、1222、885U/mL;S-1和S-3蛋白酶的最佳反应温度为30℃,S-2和S-8为50℃;蛋白酶最佳反应pH值分别为8.5、7.0、8.0和7.0。通过SDS-PAGE测定,并以酪蛋白为底物进行活性染色,发现粗酶溶液活性高的S-1菌株产生的主要蛋白酶分子量分别为149.6、127.4、40.3ku;S-3菌株产生的主要蛋白酶分子量分别为123.3、112.2、71.6ku和37.8ku。研究表明,从短蛸胃肠道中可分离出产蛋白酶菌株的发酵条件容易实现,产生的蛋白酶活力较高,性质稳定,可应用于工业生产。; 王玉荣曲田丽金玉兰; 关键词：短蛸蛋白酶生化特性胃肠道

短蛸产蛋白酶菌的鉴定、发酵条件优化及酶学性质被引量：1: 2015年; 采用生理生化特征、16S r DNA分析的方法对分离自短蛸胃肠道产蛋白酶菌株S-3进行鉴定。通过单因素试验、正交设计优化发酵产生蛋白酶条件,对产蛋白酶的粗酶性质进行研究。结果表明,菌株S-3与灿烂弧菌最相似,在以淀粉0.5%,蛋白胨0.5%,酵母膏0.1%,磷酸高铁0.1%为最佳培养基,初始p H 8.0,接种量7%,20℃发酵3.5 d时产蛋白酶活性最高,即121.1 U/m L。所产粗蛋白酶最适作用p H 9.0,最佳作用温度50℃,具有较高的热稳定性及p H稳定性,这为蛋白酶的工业应用提供了理论依据。; 金玉兰王玉荣杜英侠; 关键词：弧菌蛋白酶酶学性质短蛸

合欢内生菌H8的分离、鉴定及其抗菌代谢物质研究被引量：11: 2015年; 为了寻找结构新颖，高效的农用抗菌活性物质，以药用植物合欢叶为试验材料，分离筛选出一株内生细菌H8。采用对峙培养法与琼脂扩散法进行抑菌试验，结果表明：H8菌株、发酵液、无菌发酵液及其活性组分对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌等6种供试植物病原菌均具有较强的抑菌活性，抑菌带宽度可达20．5～34．5 mm。经形态观察、生理生化试验和16S rDNA系统进化分析，鉴定其为死谷芽孢杆菌（Bacillus vallismortis）。采用液-液萃取、薄层层析及硅胶柱层析，对内生菌H8的代谢液提取分离，得6个组分，对抑菌活性高的2个组分硅烷化衍生后，经GC-MS检测，确定代谢液中有脂肪酸、芳香酸、环二肽等28种活性化合物。; 曲田丽张淑颖金玉兰; 关键词：合欢内生菌

长蛸胃肠道产蛋白酶菌的筛选及粗酶性质研究: 2015年; 通过透明圈法从长蛸胃肠道内筛选出4株产蛋白酶的菌株,L-1、L-2、L-3、L-5,采用偶氮酪蛋白法测定粗酶液蛋白酶活力,采用SDS-PEAG活性电泳测定粗酶液中具有蛋白水解活性的蛋白酶的种类及分子量.菌株L-2产蛋白酶比酶活最高,达到4.80U/μg,菌株L-1比酶活最低为3.31U/μg.菌株L-2粗酶液中含有4种酶活较高的蛋白酶,分子量分别为105.2、86.9、69.3、37.8kD,其他3株菌株的粗酶液中各蛋白酶分子量相近.菌株L-1和L-2蛋白酶最佳反应温度为40℃,最佳反应pH为8.0;L-3产蛋白酶的最佳反应温度为50℃,最佳pH为7.0;菌株L-5产蛋白酶在温度为60℃,pH为8.5时有最大酶活力.; 王玉荣金玉兰孙淑静朴美子; 关键词：长蛸胃肠道蛋白酶酶学性质

章鱼肠道产蛋白酶菌的筛选、产酶条件及酶学性质被引量：12: 2013年; 采用检测水解透明圈和测定蛋白酶活力的方法,从章鱼肠道中分离筛选出一株高产蛋白酶的菌株QDV-3,并对其产酶条件及酶学性质进行研究。结果表明:QDV-3菌株在以果糖为碳源,蛋白胨为氮源,培养基初始pH8.0,培养温度30℃的条件下振荡培养3.5d时,所产蛋白酶活力最高,Mn2+和Ba2+对菌株产蛋白酶有促进作用。所产蛋白酶在SDS-PAGE电泳上显示至少有5种蛋白酶,分子质量范围为32.4～124.2kD,蛋白酶的最适作用温度为50～60℃,最适作用pH值为9～11,在50℃条件下保温1h,剩余酶活力为95%,热稳定性较好。; 任佩金玉兰朴美子; 关键词：蛋白酶酶学性质

章鱼下脚料发酵液中多肽的分离及抗氧化活性的研究被引量：4: 2015年; 以章鱼下脚料为原料,V-3菌种发酵后,采用阴离子交换层析法分离章鱼下脚料发酵液中的多肽。通过改变缓冲液流速、上样量和洗脱离子强度,确定了最佳分离条件,并测定了分离组分的含量及抗氧化活性。结果表明:最佳分离条件为流速0.8mL/min,上样量90mg,洗脱离子强度1mol/L。经测定发酵液多肽含量为40.5mg/g(下脚料粉),分离后组分FⅠ多肽含量为65.2mg/g,FⅡ多肽含量为921.3mg/g。同时,FⅠ和FⅡ两个组分在浓度为0.6mg/mL时对羟自由基清除率分别为60.1%和40.2%,IC50分别为0.40mg/mL、0.62mg/mL,对超氧阴离子自由基清除率分别为42.0%和36.4%,IC50分别为0.83mg/mL、1.08mg/mL。对DPPH自由基清除率分别为40.2%和31.5%,IC50分别为0.73mg/mL、0.93mg/mL,说明FⅠ和FⅡ对自由基具有清除作用,且FⅠ的清除作用强于FⅡ。; 贾晨李静媛金玉兰朴美子; 关键词：多肽抗氧化活性

产蛋白酶菌Planomicrobium sp.L-2发酵条件的优化被引量：4: 2014年; 通过优化从长蛸胃肠道筛选得到的产蛋白酶菌Planomicrobiumsp.L-2菌株的发酵条件,提高其产蛋白酶的活力。采用单因素实验研究发酵培养基的最佳碳源、氮源以及最佳发酵条件,采用Box-Behnken设计方法进行响应面实验设计,进一步优化培养基组成。结果表明,最佳培养基组成及发酵条件为:可溶性淀粉0.73%、蛋白胨0.68%、酵母膏0.15%、磷酸高铁0.01%、海水,培养基初始pH值8.0,接种量8%,发酵温度25℃,发酵时间3.5d。优化后,所产蛋白酶的最高酶活力为1 457U·mL-1,比优化前提高约2倍。; 金玉兰王玉荣; 关键词：蛋白酶发酵条件 BOX-BEHNKEN设计

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山东省自然科学基金(ZR2011CM023)